QCM : Évaluation de la Viabilité et Prolifération Cellulaire — 14 questions

Questions et réponses du QCM

1. Que permet d’estimer la cytométrie en flux dans une analyse de prolifération avec CFSE ?

Le nombre de divisions subies par chaque cellule
La quantité totale d’ATP dans le surnageant
La présence de phosphatidylsérine exposée
La concentration de LDH libérée par les cellules

Le nombre de divisions subies par chaque cellule

Explication

En cytométrie en flux, la dilution de la CFSE révèle combien de divisions ont eu lieu dans chaque cellule. Les autres propositions concernent la viabilité, l’apoptose ou la cytotoxicité.

2. Quelle combinaison de paramètres correspond aux conditions standard d’un incubateur pour la culture de cellules animales ?

37 °C, atmosphère sèche et oxygène enrichi
25 °C, atmosphère sèche et air filtré
4 °C, atmosphère humide et azote contrôlé
37 °C, atmosphère très humide et CO2 contrôlé

37 °C, atmosphère très humide et CO2 contrôlé

Explication

Les cellules animales sont maintenues à 37 °C dans une atmosphère très humide avec une teneur en CO2 contrôlée. Ces conditions soutiennent leur survie et leur fonctionnement in vitro.

3. Quel énoncé caractérise l’iodure de propidium ?

Il marque spécifiquement les cellules en phase S
Il pénètre seulement si la membrane est perméable et s’accumule dans l’ADN
Il traverse librement toutes les membranes intactes
Il mesure directement l’activité de la luciférase

Il pénètre seulement si la membrane est perméable et s’accumule dans l’ADN

Explication

L’iodure de propidium entre dans les cellules dont la membrane est endommagée, puis s’accumule dans l’ADN. C’est donc un marqueur de perte d’intégrité membranaire.

4. Quelle définition correspond le mieux à la sénescence cellulaire ?

Une migration cellulaire vers un support tridimensionnel
Un arrêt de la prolifération avec maintien d’une activité métabolique
Une destruction rapide et irréversible de la membrane plasmique
Une division accélérée avec accumulation d’ATP

Un arrêt de la prolifération avec maintien d’une activité métabolique

Explication

La sénescence est un arrêt de division cellulaire, mais les cellules restent métaboliquement actives. Elle se distingue donc d’une simple mort cellulaire.

5. Quel énoncé décrit le mieux une culture en suspension ?

Des cellules sont fixées sur une lame après coloration
Des cellules forment uniquement des structures tridimensionnelles
Des cellules flottent dans le milieu sans être attachées à un support
Des cellules sont organisées en couches sur une matrice de collagène

Des cellules flottent dans le milieu sans être attachées à un support

Explication

En culture en suspension, les cellules ne sont pas attachées à un support et flottent dans le milieu. Les autres propositions décrivent d’autres modalités de culture ou de préparation.

6. Quel résultat traduit la fragmentation organisée de l’ADN lors de l’apoptose ?

Une augmentation de la taille des chromosomes
Une absence totale de signal ADN
Un smear continu sans bandes distinctes
Une échelle de fragments de type ladder

Une échelle de fragments de type ladder

Explication

L’apoptose produit une fragmentation de l’ADN en fragments réguliers donnant un profil en échelle, appelé ladder. Un smear continu est moins compatible avec cette fragmentation organisée.

7. Pourquoi le protocole de dosage de l’ATP comprend-il une étape de perméabilisation des cellules ?

Pour transformer le glucose en formazan
Pour faire entrer l’iodure de propidium dans les cellules vivantes
Pour libérer l’ATP cellulaire avant l’ajout de la luciférase
Pour rendre les cellules adhérentes au plastique

Pour libérer l’ATP cellulaire avant l’ajout de la luciférase

Explication

La perméabilisation permet de libérer l’ATP afin qu’il puisse servir de substrat à la réaction enzymatique. Cela précède l’ajout de luciférase et la mesure de la luminescence.

8. Quel est le principe fondamental d’un test d’exclusion de colorant ?

Un colorant marque toutes les cellules de façon identique
Un colorant traverse préférentiellement les cellules en mitose
Un colorant entre seulement dans les cellules dont la membrane est endommagée
Un colorant se fixe uniquement aux ribosomes des cellules vivantes

Un colorant entre seulement dans les cellules dont la membrane est endommagée

Explication

Dans un test d’exclusion, les cellules viables gardent une membrane intacte et n’absorbent pas le colorant. Les cellules mortes ou endommagées laissent entrer le colorant.

9. Quel principe décrit correctement un dosage de l’ATP par luminescence ?

L’ATP bloque la fluorescence des cellules vivantes
L’ATP est coloré par un colorant qui devient violet
La luciférase catalyse une réaction produisant de la lumière proportionnelle à l’ATP
L’ATP absorbe directement la lumière à 570 nm

La luciférase catalyse une réaction produisant de la lumière proportionnelle à l’ATP

Explication

Le dosage de l’ATP repose sur une réaction catalysée par la luciférase qui émet de la lumière. L’intensité mesurée reflète la quantité d’ATP présente.

10. Quelle formule permet de calculer l’indice de viabilité cellulaire ?

Nombre total de cellules divisé par le nombre de cellules viables, multiplié par 100
Nombre de cellules viables divisé par le nombre total de cellules, multiplié par 100
Nombre de cellules mortes divisé par le nombre total de cellules, multiplié par 100
Nombre de cellules viables divisé par le nombre de cellules mortes, multiplié par 100

Nombre de cellules viables divisé par le nombre total de cellules, multiplié par 100

Explication

L’indice de viabilité correspond au pourcentage de cellules vivantes dans la population. Il se calcule donc comme le rapport cellules viables / cellules totales × 100.

11. Quel élément fait partie des fonctions cellulaires reflétées par la viabilité ?

La production d’ATP et l’activité enzymatique
La migration hors du milieu de culture
La fragmentation de l’ADN en fragments réguliers
La duplication chromosomique exclusive en phase M

La production d’ATP et l’activité enzymatique

Explication

La viabilité reflète des fonctions métaboliques actives, comme l’activité enzymatique et la production d’ATP. La fragmentation de l’ADN concerne plutôt l’apoptose.

12. Quel profil de marquage correspond à une cellule apoptotique précoce en double marquage Annexine V / iodure de propidium ?

Annexine V négative et iodure de propidium positive
Annexine V positive et iodure de propidium positive
Annexine V positive et iodure de propidium négatif
Absence totale de marquage fluorescent

Annexine V positive et iodure de propidium négatif

Explication

Au stade précoce de l’apoptose, la phosphatidylsérine est exposée mais la membrane reste encore intacte, d’où Annexine V positive et IP négatif. Le double positif indique plutôt une apoptose tardive.

13. Quel couple de marqueurs est particulièrement associé au phénotype sécrétoire de sénescence ?

IL-6 et IL-8
LDH et XTT
BrdU et CFSE
Annexine V et iodure de propidium

IL-6 et IL-8

Explication

Le SASP est notamment caractérisé par la sécrétion de cytokines comme IL-6 et IL-8. Les autres couples correspondent à d’autres types d’analyses cellulaires.

14. Quel marquage fluorescent est utilisé pour suivre les divisions cellulaires par dilution du signal ?

Annexine V
CFSE
Iodure de propidium
SA-β-gal

CFSE

Explication

La CFSE se fixe aux protéines cytoplasmiques et son signal diminue à chaque division cellulaire. Cette dilution permet de suivre la prolifération en cytométrie en flux.

Révisez avec les flashcards

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Culture cellulaire — conditions ?

37°C, humidité, CO2 contrôlé

Indice de viabilité — formule ?

(cellules viables / total) × 100

Viabilité cellulaire — fonctions ?

Activité enzymatique, perméabilité, ATP, adhésion, NADPH, absorption

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