Qu'est-ce que le développement en biologie ?
C'est l'ensemble des processus cellulaires générant un phénotype complexe multicellulaire.
Quelle différence la préformation établit-elle avec l'épigenèse ?
La préformation suppose un embryon miniature préexistant, l'épigenèse une apparition progressive.
Qui a formulé la théorie cellulaire en 1838-1839 ?
Mathais Schleiden et Theodor Schwann.
Que dit la théorie cellulaire formulée par Schleiden et Schwann ?
Tout être vivant est constitué d'une ou plusieurs cellules, unité fondamentale de la vie.
Qui a formulé le principe « omnis cellula e cellula » en 1858 ?
Rudolf Virchow.
Que signifie le principe « omnis cellula e cellula » ?
Toute cellule provient d'une cellule préexistante, la première étant la cellule-œuf.
Qu'est-ce que la potence cellulaire ?
La capacité d'une cellule à se différencier en d'autres types cellulaires.
Quelle différence y a-t-il entre spécification et détermination ?
La spécification est réversible, la détermination est irréversible après transplantation.
Qu'est-ce qu'une cellule inductrice dans la communication cellulaire ?
Une cellule qui émet un signal.
Que fait une cellule compétente face à un signal inducteur ?
Elle interprète le signal et modifie son devenir.
Comment un morphogène produit-il une information spatiale ?
Par une source localisée, diffusion et différenciation selon concentration.
Qu'est-ce que l'apoptose ?
Une mort cellulaire programmée qui élimine des tissus.
Quel rôle joue l'apoptose dans la formation des organes ?
Elle participe notamment à l'interdigitisation.
Que désigne le génotype d'une cellule ?
L'ensemble des gènes présents dans chaque cellule.
Comment varie l'expression spatio-temporelle du génome ?
Par activation ou répression des gènes.
Quelles différences produit l'expression variable du génome ?
Des différences de morphologie et de fonction.
Quels types d'échantillons utilise-t-on en biologie cellulaire et du développement ?
Des organismes ou organes entiers, des coupes histologiques et des cellules en culture.
Comment obtient-on une culture primaire en biologie cellulaire ?
Par prélèvement, dissociation du tissu, ensemencement en milieu liquide stérile, puis prolifération en monocouche.
Que caractérise la phase stationnaire d'une culture cellulaire ?
La confluence à 100 %, épuisement du milieu et arrêt de la prolifération par inhibition de contact.
Qu'est-ce que le passage cellulaire en culture ?
Le repiquage des cellules, souvent par trypsinisation, pour maintenir la culture et obtenir des cultures secondaires.
Quels échantillons comprend la biologie cellulaire et développementale ?
Des animaux ou embryons entiers, organes disséqués, coupes histologiques et cellules en culture.
Qu'est-ce que la culture in vitro ?
Faire croître des cellules ex vivo, hors de l'organisme, en conditions stériles.
Quelles conditions régulent les incubateurs de culture cellulaire ?
Une température d'environ 37 °C, humidité d'environ 95 % et 5 % de CO2 atmosphérique.
Que contient un milieu de culture stérile ?
Du glucose ou pyruvate, acides aminés essentiels, ions, tampon bicarbonate, sérum de veau fœtal et parfois antibiotiques.
Qu'est-ce qu'un anticorps ?
Une immunoglobuline IgG sécrétée par les plasmocytes pour détecter un antigène.
Quelle différence entre anticorps polyclonaux et monoclonaux ?
Les polyclonaux ciblent plusieurs épitopes, les monoclonaux un seul.
Comment produit-on un anticorps primaire ?
Par immunisation répétée, prélèvement du sérum, purification et titration.
Quelles étapes comprend un immunomarquage indirect ?
Fixation, perméabilisation, saturation, incubation anticorps, détection, montage, observation.
Quelle différence entre immunomarquage et Western blot ?
L'immunomarquage localise la protéine in situ, le Western blot la détecte ex situ.
Comment vérifie-t-on la spécificité d’un immunomarquage ?
Par contrôles positifs et négatifs incluant blocage et absence d’anticorps primaire.
Qu'est-ce que l'électrophorèse ?
Une technique de séparation de molécules chargées par migration dans un gel sous champ électrique.
Quelles étapes comprend la préparation d'un échantillon pour Western blot ?
Lyse chimique et mécanique avec inhibiteurs, centrifugation, chauffage, agent réducteur, traitement au SDS.
Quel effet a le SDS sur les protéines en conditions réductrices et dénaturantes ?
Il déplie les protéines et les recouvre de charges négatives proportionnelles à leur masse.
De quoi dépend la séparation des protéines en SDS-PAGE ?
Uniquement de leur masse moléculaire.
Quelles étapes composent un Western blot ?
Électrophorèse dénaturante, transfert sur membrane, immunomarquage indirect, détection et observation.
Quelle quantité de protéines utilise-t-on généralement en SDS-PAGE ?
Entre 10 et 40 µg de protéines totales par puits.
Sous quelles conditions se fait la migration en SDS-PAGE ?
Sous 100 à 200 V pendant 30 minutes à 2 heures.
Quelle différence principale existe entre Western blot et immunomarquage ?
Western blot détecte et compare protéines, immunomarquage localise précisément les protéines.
Quelle sensibilité de détection a le Western blot pour une protéine ?
Le Western blot détecte des protéines à l'ordre du nanogramme.
Quelle technique permet de localiser précisément les protéines dans les tissus ?
L'immunomarquage permet de localiser précisément les protéines.
Quelle condition rend valide la comparaison de protéines entre deux échantillons par Western blot ?
La comparaison est valide seulement si les contrôles appropriés ont été réalisés.
Qu'est-ce que la SDS-PAGE ?
Une électrophorèse sur gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes.
Comment les protéines se déplacent-elles lors du transfert Western blot ?
Elles migrent du gel vers une membrane sous un courant électrique.
Sur quel type de membrane les protéines se fixent-elles en Western blot ?
Sur une membrane de nitrocellulose ou de PVDF.
Quelles sont les quatre étapes principales du Western blot ?
Électrophorèse dénaturante, transfert, immunomarquage indirect, détection.
Comment le bleu de Coomassie colore-t-il les protéines dans un gel ?
Par interactions électrostatiques avec leurs groupements amino et carboxyle.
Quel est le rôle d'un contrôle de charge identique dans chaque puits en Western blot ?
Il permet d’estimer semi-quantitativement le niveau de la protéine d’intérêt.
Le contrôle de charge fournit-il une valeur numérique absolue du niveau protéique ?
Non, il ne fournit pas de valeur numérique absolue.
Quelles protéines sont utilisées comme contrôles de charge en Western blot ?
Des protéines ubiquitaires et constitutives comme GAPDH, β-actine ou β-tubuline.
De quoi dépend l’intensité du signal en Western blot ?
Elle est proportionnelle au temps d’exposition et à l’abondance de la protéine sur la membrane.
Quelle condition est nécessaire pour que l’intensité du signal soit proportionnelle à l’abondance protéique ?
Il ne doit pas y avoir de saturation du signal.
Peut-on comparer les niveaux d’expression de protéines différentes si leurs signaux proviennent d’anticorps différents ?
Non, car l’intensité dépend aussi des anticorps utilisés.
Qu'est-ce que l'immunoprécipitation ?
Une méthode ex situ utilisant un anticorps pour extraire une protéine cible et ses partenaires non covalents.
Quelles étapes comprend un protocole d'immunoprécipitation ?
Incubation avec anticorps, fixation sur billes d'agarose, centrifugation, lavages, élution, puis Western blot.
Quelle spécificité possède la protéine A de Staphylococcus aureus ?
Elle se lie spécifiquement à la région Fc des IgG de nombreux mammifères.
Quelle est la masse moléculaire de la protéine A ?
Elle est comprise entre 35 et 50 kDa.
Quel est le but de l'IP inverse ?
Confirmer l'interaction entre la protéine cible initiale et son partenaire.
Quels contrôles négatifs utilise-t-on en immunoprécipitation ?
Billes sans anticorps spécifique et anticorps non spécifique de même isotype.
Qu'est-ce que révèle l'hybridation in situ ?
La localisation d'un ARNm dans un organisme, tissu ou cellule.
Quelles étapes comprend le protocole d'hybridation in situ ?
Fixation, perméabilisation, saturation, pré-hybridation, hybridation, lavages, immunomarquage, détection, montage, observation.
Quel rôle joue le Triton X-100 dans l'hybridation in situ ?
Il perméabilise pour rendre les ARNm accessibles à la sonde.
Quel résultat doit donner un contrôle négatif avec une sonde sens ou scramblée ?
Il doit être dépourvu de marquage.
Pourquoi un contrôle négatif sans marquage est-il important ?
Pour valider la spécificité de l'hybridation.
Quels facteurs influencent l'hybridation in situ ?
Température, durée, nature et composition des acides nucléiques, mésappariements, composition ionique, longueur de la cible ARNm.
Quelle différence principale existe entre mutagénèse aléatoire et morpholinos ?
La mutagénèse modifie le génome, les morpholinos bloquent temporairement la traduction sans modifier le génome.
Quelle est la première étape de la mutagénèse aléatoire chez les poissons ?
Traiter les mâles adultes avec un agent mutagène.
Que recherchent les chercheurs après avoir produit les poissons F3 en mutagénèse aléatoire ?
Des anomalies phénotypiques chez les descendants.
Quel type de mutations induisent principalement l’EMS et l’ENU ?
Des mutations ponctuelles hétérozygotes dans les cellules germinales.
Quelle est la proportion attendue de poissons homozygotes mutants (m/m) chez la descendance de deux F1 hétérozygotes ?
25% de la descendance est homozygote mutant (m/m).
Comment agit un morpholino injecté au stade une cellule ?
Il s’hybride à l’ARNm cible et bloque la traduction au site de départ.
Comment s’appellent les embryons injectés avec un morpholino ?
Ils s’appellent des morphants.
Quels comportements la cellule adapte-t-elle selon les signaux environnementaux reçus ?
Elle adapte son entrée dans le cycle, sa prolifération, sa différenciation, sa quiescence ou l’apoptose.
Quelles étapes comprend l’intégration des signaux cellulaires ?
La réception, la captation, le décodage, la transmission et l’action sur les protéines.
Quels types de signaux les cellules reçoivent-elles et comment y répondent-elles ?
Elles reçoivent des signaux prolifératifs, anti-prolifératifs, de survie, de mort, de différenciation et de stress, et répondent selon les signaux majoritaires.
Quel est le rôle des mécanismes de régulation du cycle cellulaire ?
Ils maintiennent l’intégrité de l’organisme.
Que peut entraîner le dérèglement des mécanismes de régulation du cycle cellulaire ?
Une transformation cancéreuse.
Quels sont les principaux acteurs de la régulation du cycle cellulaire ?
Les récepteurs, complexes CDK-cycline, inhibiteurs CDKI, pRb et p53.
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1. À propos de l’histoire de la théorie cellulaire, cochez la (les) proposition(s) exacte(s) :
2. Les étapes d’un immunomarquage indirect comprennent :
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