Fiche de révision : Amibes et amœbose : diagnostic et pathologies

📋 Plan du Cours

1. Amibes et amœbose définition OMS
2. Morphologie d’Entamoeba histolytica formes
3. Amibes parasites de l’homme et localisations
4. Amibes commensales du colon non pathogènes
5. Réservoir et répartition géographique de l’amibiase
6. Passage amibiase infestation vers amibiase maladie
7. Amibiase intestinale aiguë dysenterie amibienne
8. Amibiase colique maligne colite fulminante
9. Amoebome pseudo tumeur inflammatoire
10. Amibiase hépatique et pleuro-pulmonaire
11. Autres localisations et triade de Fontan
12. Diagnostic biologique et traitement amoebicides

📖 1. Amibes et amœbose définition OMS

🔑 Notions clés & Définitions

• Amibes : Les amibes sont des protozoaires qui se déplacent grâce à des pseudopodes et se multiplient par fission binaire.
• Rhizopodes : Les Rhizopodes regroupent les protozoaires à pseudopodes, dont font partie les amibes décrites dans le cours.
• Amibiase : L’amibiase (ou amoebose) est une affection parasitaire cosmopolite due à Entamoeba histolytica, liée au péril fécal.
• Entamoeba histolytica : Entamoeba histolytica est l’amibe responsable majoritairement de l’amibiase chez l’homme.
• Péril fécal : Le péril fécal désigne la transmission liée à la contamination des matières fécales, favorisant la transmission féco-orale.

📝 Points essentiels

• L’OMS (1969) définit l’amibiase comme l’état où l’organisme héberge Entamoeba histolytica, avec ou sans manifestations cliniques.
• Les amibes sont classées comme protozoaires à pseudopodes (Rhizopodes) et se reproduisent par multiplication asexuée par fission binaire.
• Les amibes peuvent être libres, parasites d’animaux, ou parasites de l’homme.
• L’amibiase est cosmopolite et sa forte incidence est liée à la transmission féco-orale et à l’existence de nombreux porteurs asymptomatiques.
• La mortalité annuelle estimée est comprise entre 40 000 et 100 000 personnes, avec une menace persistante en zone intertropicale.

💡 Astuce mémo

OMS 1969 = « héberge même sans symptômes » (amibiase = portage d’Entamoeba histolytica).

📖 2. Morphologie d’Entamoeba histolytica formes

🔑 Notions clés & Définitions

• Forme kystique : La forme kystique est une forme de résistance éliminée dans les selles et responsable de la dissémination du parasite.
• Trophozoïte minuta : Le trophozoïte minuta correspond à une forme végétative peu pathogène d’Entamoeba histolytica.
• Trophozoïte histolytica : Le trophozoïte histolytica est la forme végétative fragile responsable de la maladie.
• Kyste à 4 noyaux : Le kyste à maturité contient 4 noyaux du même type, critère morphologique majeur lors de l’observation.
• Cristalloïdes ou corps sidérophiles : Les cristalloïdes, aussi appelés corps sidérophiles, peuvent être observés dans certains kystes d’Entamoeba histolytica.

📝 Points essentiels

• Le kyste est bien arrondi, mesure 8 à 15 μm, possède une double membrane épaisse et réfringente.
• Le kyste à maturité contient 4 noyaux du même type et peut présenter des cristalloïdes ou corps sidérophiles.
• Le cytoplasme du kyste apparaît brillant et peut paraître vide à l’observation.
• Le trophozoïte est mobile, mesure 20 à 40 μm, avec chromatine périphérique en fins granules et caryosome central petit.
• Le trophozoïte montre de nombreuses petites vacuoles et des pseudopodes importants avec mouvements rapides.
• Le trophozoïte peut contenir des hématies phagocytées, signe d’amibes hématophages dans les selles.

💡 Astuce mémo

Kyste = Contamination (8–15 μm, 4 noyaux, double membrane) ; Trophozoïte = Maladie (20–40 μm, mobile, hématies possibles).

📖 3. Amibes parasites de l’homme et localisations

🔑 Notions clés & Définitions

• Amibiase extra-intestinale : Forme d’amibiase où les amibes gagnent des organes à distance, après passage hématogène, en dehors du tube digestif.
• Voie hématogène : Mécanisme de dissémination où les amibes passent dans le sang pour atteindre différents organes.
• Péril fécal : Mode de contamination lié à la présence de matières fécales dans l’environnement, favorisant l’ingestion de formes parasitaires.
• Kystes à 4 noyaux : Forme infectante ingérée lors de la contamination, correspondant à des kystes contenant 4 noyaux.
• Réservoir humain : Réservoir du parasite où l’homme héberge l’amibe et libère des kystes dans le milieu extérieur.

📝 Points essentiels

• Les localisations extra-intestinales surviennent après dissémination hématogène, avec le foie en premier puis éventuellement les poumons et le cerveau.
• La contamination se fait par ingestion de kystes à 4 noyaux, via des contacts directs (mains sales, pratiques oro-anales) ou indirects (eaux, aliments, insectes).
• La répartition est cosmopolite et dépend des conditions socio-économiques, avec une sévérité accrue dans les régions chaudes et humides.
• La prévalence rapportée est d’environ 10% de malades, dont 90% de porteurs sains (infestation) plutôt que d’amibiase maladie.
• Dans les pays développés, la maladie est surtout sporadique chez les migrants, alors que dans les pays sous-développés elle est endémique et reflète une hygiène collective et individuelle insuffisante.

💡 Astuce mémo

Péril fécal → kystes à 4 noyaux → foie d’abord (puis poumons/cerveau).

📖 4. Amibes commensales du colon non pathogènes

🔑 Notions clés & Définitions

• Amibes libres : Protozoaires vivant en milieu naturel, capables de contaminer accidentellement l’humain sans être des parasites obligatoires.
• Naegleria fowleri : Amibe libre responsable de méningo-encéphalite primitive à évolution très rapide, surtout après exposition à l’eau douce chaude.
• Acanthamoeba sp : Amibe libre pouvant provoquer une encéphalite granulomateuse à évolution lente et une kératite amibienne.
• Kératite amibienne : Infection cornéenne rare due à Acanthamoeba sp, pouvant évoluer vers une ulcération profonde puis une perforation.
• Méningo-encéphalite amibienne primitive : Forme neurologique fulminante liée à Naegleria fowleri, avec atteinte méningée et cérébrale rapide.

📝 Points essentiels

• Les amibes libres sont présentes dans la nature et la contamination peut survenir lors de baignades accidentelles.
• Naegleria fowleri provoque une méningo-encéphalite primitive avec évolution rapide vers la mort.
• Naegleria fowleri : incubation rapide d’environ 4 jours et évolution en 2 à 3 jours après le début.
• Naegleria fowleri : début brutal avec syndrome méningé (fièvre, céphalées violentes, vomissements) chez un sujet jeune, puis convulsions.
• Naegleria fowleri : atteinte des zones olfactives, frontales, temporales et cérébelleuses, avec infection nécrosante et hémorragique.
• Acanthamoeba sp : encéphalite granulomateuse amibienne à évolution lente, avec incubation de plusieurs semaines à plusieurs mois et coma pouvant dépasser 15 jours sans traitement.

💡 Astuce mémo

Naegleria = « Nage vite » (incubation ~4 j, mort 2–3 j) ; Acanthamoeba = « Acantha lente » (semaines–mois, coma >15 j).

📖 5. Réservoir et répartition géographique de l’amibiase

🔑 Notions clés & Définitions

• Réservoir strictement humain : Le réservoir de l’amibiase est exclusivement l’être humain, malade ou porteur, qui élimine des kystes dans les selles.
• Transmission féco-orale : La transmission de l’amibiase se fait par ingestion de kystes excrétés, selon une voie féco-orale.
• Péril fécal : Le péril fécal désigne la contamination par ingestion d’aliments, d’eau ou de crudités souillés par des selles.
• Kystes résistants : Les kystes survivent dans le milieu extérieur grâce à leur résistance, ce qui permet une contamination indirecte.
• Amibiase cosmopolite : L’amibiase est une maladie présente dans le monde entier, avec une fréquence liée aux conditions d’hygiène.

📝 Points essentiels

• Parmi les espèces d’amibes humaines, seule E. histolytica est pathogène, les autres pouvant être non pathogènes ou de pathogénicité incertaine.
• Les kystes d’E. histolytica sont la forme de survie dans le milieu extérieur et constituent la forme transmise par ingestion.
• La transmission directe correspond au contact mains sales avec un malade, ce qui illustre la voie féco-orale.
• La transmission indirecte survient après ingestion de crudités, d’aliments ou d’eau souillés par des selles, car les kystes résistent dans l’environnement.
• Les mouches peuvent agir comme pont entre les excréta et les aliments, favorisant la contamination.
• La répartition géographique est cosmopolite et dépend du niveau d’hygiène, avec une estimation OMS d’environ 10% de la population mondiale infestée.

💡 Astuce mémo

Réservoir humain + kystes résistants = péril fécal : mains sales (direct) ou eau/aliments souillés (indirect), mouches en renfort.

📖 6. Passage amibiase infestation vers amibiase maladie

🔑 Notions clés & Définitions

• Entamoeba histolytica kystes matures : Les kystes matures d’Entamoeba histolytica sont recherchés dans les selles moulées pour suspecter une amibiase-infection.
• Entamoeba histolytica kystes immatures : Les kystes immatures d’Entamoeba histolytica sont recherchés dans les selles diarrhéiques pour orienter vers une amibiase-maladie.
• Trophozoïte minuta : Le trophozoïte minuta d’Entamoeba histolytica est une forme à rechercher dans les selles diarrhéiques lors du diagnostic d’amibiase-maladie.
• Forme histolytica : La forme histolytica d’Entamoeba histolytica est le trophozoïte mobile associé à l’amibiase-maladie, identifiable à l’examen frais.
• Abcès en coup d’ongle : L’abcès en coup d’ongle correspond à une lésion typique observée en recto-sigmoïdoscopie lors d’une amibiase-maladie colique.

📝 Points essentiels

• Si les selles sont moulées, rechercher des kystes matures d’E. histolytica et les distinguer des kystes d’Entamoeba coli et d’autres amibes non pathogènes.
• Si les selles sont diarrhéiques, rechercher des kystes immatures d’E. histolytica et des trophozoïtes minuta d’E. histolytica.
• Le diagnostic d’amibiase-maladie repose sur un prélèvement de selles avec glaires sanglantes et un examen immédiat à 37°C.
• À l’examen frais, la forme histolytica est mobile par émission brutale de pseudopodes et contient des hématies intra-vacuolaires.
• En recto-sigmoïdoscopie, l’amibiase-maladie colique se manifeste par des abcès en coup d’ongle contenant la forme histolytica.
• La mise en culture sur milieu spécial NNN permet d’étayer le diagnostic d’amibiase-maladie colique ou de localisation associée.

💡 Astuce mémo

Selles moulées → kystes matures ; selles diarrhéiques → kystes immatures + minuta ; maladie → glaires sanglantes + 37°C + pseudopodes + hématies intra-vacuolaires.

📖 7. Amibiase intestinale aiguë dysenterie amibienne

🔑 Notions clés & Définitions

• Amibiase intestinale aiguë : Infection intestinale aiguë due à une amibe, responsable de tableaux dysentériques.
• Dysenterie amibienne : Syndrome dysentérique lié à l’atteinte du côlon par une amibe, avec diarrhée sanglante et douleurs.
• Entamoeba histolytica : Espèce d’amibe responsable de l’amibiase chez l’humain, reconnue comme seule responsable en 1957.
• Amibes libres : Amibes vivant dans le milieu extérieur, capables de provoquer des atteintes oculaires, neurologiques ou pulmonaires.

📝 Points essentiels

• La dysenterie amibienne correspond à une atteinte intestinale aiguë liée à une amibe du groupe responsable de l’amibiase.
• En 1957, l’idée admise est que seule Entamoeba histolytica est responsable de l’amibiase.
• Les amibes libres sont associées à des pathologies rares et individualisées, avec atteintes oculaires, neurologiques ou pulmonaires.
• Deux genres majeurs en pathologie humaine sont Naegleria et Acanthamoeba, responsables de formes cérébrales et de kératites.
• Les amibes libres se distinguent d’Entamoeba histolytica par leur écologie (milieu extérieur) et leurs localisations typiques (œil, système nerveux, poumon).

💡 Astuce mémo

Histo = intestin (amibiase) ; Libres = œil/cerveau/poumon (pathologies opportunistes rares).

📖 8. Amibiase colique maligne colite fulminante

🔑 Notions clés & Définitions

• Amibes libres : Les amibes libres sont des amibes non parasitaires capables de provoquer des infections humaines, souvent rares et récemment mieux individualisées.
• Acanthamoeba : Acanthamoeba est un genre d’amibes libres appartenant à la famille Acanthamoebidae, impliqué dans des atteintes oculaires et neurologiques.
• Trophozoïte : Le trophozoïte est la forme végétative d’Acanthamoeba, mobile grâce à des pseudopodes et caractérisée par un noyau bien visible.
• Kyste d’Acanthamoeba : Le kyste est la forme de résistance d’Acanthamoeba, à paroi double et grossièrement étoilée, pouvant coexister avec la forme végétative.
• Encéphalite amibienne granulomateuse : L’encéphalite amibienne granulomateuse est une atteinte neurologique due à des amibes libres, avec une évolution souvent subaiguë ou chronique.

📝 Points essentiels

• La dissémination des Acanthamoeba semble se faire surtout par voie hématogène à partir d’une porte d’entrée nasale, mais peut aussi être pulmonaire ou cutanée.
• Les sujets immunodéprimés ou débilités sont les plus touchés, parfois sans notion de baignade.
• L’incubation est plus longue que pour la méningo-encéphalite primitive, avec une évolution moins rapide mais fatale (environ 3 à 4 semaines).
• Le début est lent et insidieux avec un syndrome méningé incomplet, puis des signes mal systématisés (anorexie, vomissements, céphalées, fièvre 39–40°, troubles mentaux, crises convulsives pouvant aller au coma).
• À l’imagerie (TDM), on peut voir des lésions multifocales de densité atténuée (cortex et substance blanche sous-corticale) ou une masse unique.
• Dans le LCR, les amibes ne sont jamais mises en évidence directement, et le diagnostic repose surtout sur l’immunologie (rarement évoquée) et l’anatomo-pathologie (trophozoïtes et kystes sur biopsies).

💡 Astuce mémo

Acanthamoeba = deux formes (mobile trophozoïte + survivant kyste) et un tableau neuro lent (3–4 semaines) avec fièvre 39–40°.

📖 9. Amoebome pseudo tumeur inflammatoire

🔑 Notions clés & Définitions

• Amoebome : L’amoebome est une lésion inflammatoire liée à une amibiase, pouvant mimer une tumeur par son aspect clinique et radiologique.
• Pseudo-tumeur inflammatoire : Une pseudo-tumeur inflammatoire désigne une masse due à l’inflammation, sans être une vraie tumeur néoplasique.
• Entamoeba histolytica : Entamoeba histolytica est une amibe capable d’envahir les tissus et d’être responsable de formes pathogènes de l’amœbose.
• Corticothérapie : La corticothérapie est un traitement immunomodulateur dont l’usage dans l’amibiase est discuté car elle peut aggraver l’infection.

📝 Points essentiels

• L’amoebome correspond à une présentation inflammatoire pouvant simuler une tumeur, ce qui complique le diagnostic.
• La corticothérapie est controversée car elle peut provoquer une immunosuppression pouvant être fatale en cas d’amibiase.
• Le traitement initial de l’amibiase repose sur des antiamibiens, avec une prise en charge intensive et souvent associée à plusieurs molécules.
• Les kystes d’amibes sont très résistants dans le milieu extérieur, ce qui favorise la dissémination et rend la prévention essentielle.

💡 Astuce mémo

Amoebome = inflammation qui imite une tumeur (et la corticothérapie peut “casser” les défenses).

📖 10. Amibiase hépatique et pleuro-pulmonaire

🔑 Notions clés & Définitions

• Abcès amibien du foie : Infection amibienne du foie se manifestant souvent par un tableau grave nécessitant une prise en charge rapide.
• Hépatomégalie douloureuse : Augmentation du volume du foie associée à une douleur provoquée lors de la palpation ou de l’ébranlement.
• Amœbose pleuropulmonaire : Atteinte pulmonaire et/ou pleurale due à une amibiase, le plus souvent secondaire à un abcès amibien du foie.
• Vomique chocolat : Évacuation par les voies bronchiques d’un contenu caractéristique lors de l’abcédation avec fistule bronchique.

📝 Points essentiels

• Le début de l’abcès amibien du foie est souvent progressif, survenant plusieurs mois ou années après la contamination, parfois après un épisode dysentérique.
• Le tableau typique associe douleur de l’hypocondre droit irradiant vers l’épaule, fièvre précoce constante en plateau à 39–40 °C, et altération de l’état général.
• L’examen retrouve une hépatomégalie lisse et douloureuse à l’ébranlement, et l’ensemble correspond le plus souvent à un abcès du foie grave.
• Des manifestations pulmonaires à la base droite peuvent exister, mais l’ictère est généralement absent.
• En l’absence de traitement, l’évolution de l’abcès amibien du foie est défavorable.

💡 Astuce mémo

Fièvre en plateau 39–40 + douleur vers l’épaule = foie amibien (penser abcès).

📖 11. Autres localisations et triade de Fontan

🔑 Notions clés & Définitions

• Naegleria fowleri : Espèce d’amibe libre capable de provoquer une méningo-encéphalite amibienne primitive chez l’homme.
• Acanthamœba : Genre d’amibes libres pouvant être responsable d’encéphalite amibienne granulomateuse et de kératite amibienne.
• Méningo-Encéphalite Amibienne Primitive (MEAP) : Forme aiguë de méningo-encéphalite amibienne survenant surtout chez des sujets jeunes après exposition à des eaux réchauffées.
• Encéphalite Amibienne Granulomateuse (EAG) : Atteinte du système nerveux central plus lente, survenant chez des sujets fragilisés, avec une évolution fatale malgré une incubation prolongée.
• Kératite amibienne : Infection de la cornée par une amibe libre, favorisée notamment chez les porteurs de lentilles de contact après microtraumatismes.

📝 Points essentiels

• MEAP : triade symptomatique de méningite aiguë avec céphalées violentes, vomissements et fièvre élevée à 39–40 °C.
• MEAP : délai typique de 4 à 7 jours après la baignade, puis aggravation rapide vers le coma et décès en 24–48 h.
• MEAP : évolution totale en général 4 à 6 jours, avec atteinte nécrosante et hémorragique des zones olfactive, frontale, temporale et cérébelleuse.
• MEAP : à l’anatomopathologie, on retrouve uniquement des formes végétatives.
• EAG : incubation de plusieurs semaines à plusieurs mois, avec céphalées et fièvre élevée puis troubles visuels et pharyngés avant l’apparition d’hallucinations, somnolence, crises et raideur de nuque.
• EAG : survient chez des sujets fragilisés (ex. cirrhose, Hodgkin) ou sous traitements lourds (corticoïdes, antibiotiques, immunosuppresseurs) et reste fatale, avec une durée souvent de 2 à 4 mois.

💡 Astuce mémo

MEAP = « 4-7 jours → triade → 24-48 h » ; EAG = « semaines à mois → plus lent mais fatal ».

📖 12. Diagnostic biologique et traitement amoebicides

🔑 Notions clés & Définitions

• Coloration au bleu coton : Technique de coloration utilisée pour mettre en évidence les amibes libres, avec une meilleure performance rapportée que d’autres colorations classiques.
• Mise en culture sur gélose enrichie : Culture systématique sur gélose en boîte de Pétri enrichie avec une suspension d’entérobactéries pour nourrir les amibes bactériovores.
• Trophozoïtes de Naegleria : Formes mobiles observées en diagnostic, caractérisées par des pseudopodes très actifs et parfois des formes flagellées.
• Kystes d’Acanthamoeba : Formes immobiles observées en culture, apparaissant en moyenne vers le 10e jour et souvent regroupées en amas ou colonies à la surface.
• MEAP Amphotericine B : Traitement amoebicide des rares cas positifs de méningoencéphalite amibienne primitive reposant sur l’amphotéricine B administrée par voie intrarachidienne.

📝 Points essentiels

• Les colorations possibles incluent Gram ou Giemsa, mais le bleu coton est présenté comme la meilleure coloration.
• La culture est réalisée sur gélose en boîte de Pétri enrichie avec quelques gouttes d’une suspension d’entérobactéries, notamment Escherichia coli.
• L’ensemencement se fait à partir du culot de centrifugation du LCR (ou d’autres prélèvements) puis incubation à 37 °C.
• La première lecture de culture se fait à 48 heures, puis des lectures sont répétées tous les 4 jours pendant 3 semaines.
• En culture, Naegleria montre des trophozoïtes à pseudopodes très actifs (bouillonnement) ou parfois des formes flagellées, mais la réponse du laboratoire arrive souvent trop tard.
• En culture, Acanthamoeba forme des kystes en moyenne au 10e jour, regroupés en amas ou colonies à la surface de la gélose.

💡 Astuce mémo

Culture = 37°C + E. coli pour nourrir l’amibe; Naegleria bouillonne vite, Acanthamoeba kyste vers J10.

📅 Repères chronologiques

📊 Tableaux de synthèse

Formes d’Entamoeba histolytica et lien clinique

⚠️ Pièges & confusions fréquents

1. Confondre amibiase-infestation et amibiase-maladie: selles moulées → kystes matures (portage), selles diarrhéiques/glaires sanglantes → formes végétatives (minuta/histolytica) et examen immédiat à 37°C.
2. Croire que le diagnostic au microscope distingue E. histolytica d’E. dispar: le cours précise que l’optique ne différencie pas et impose un rendu E. histolytica / E. dispar.
3. Oublier que les trophozoïtes sont fragiles: ils ne se retrouvent que dans des selles fraîches; un examen tardif perd la valeur diagnostique.
4. Mélanger les localisations: l’atteinte hépatique est secondaire à une contamination colique (foie en premier), et l’extra-intestinal n’est pas “primitive” dans le cours.
5. Confondre amibes libres et Entamoeba histolytica: les amibes libres (Naegleria/Acanthamoeba) sont opportunistes et responsables d’atteintes oculaires/neurologiques, pas du péril fécal.
6. Penser que le LCR montre directement les amibes dans l’EAG: le cours indique que les amibes ne sont jamais mises en évidence directement dans le LCR.
7. Sous-estimer le rôle de la corticothérapie: elle est discutée et peut aggraver l’infection (controverse, immunosuppression potentiellement fatale).

✅ Checklist Examen

1. Définir l’amibiase selon l’OMS (1969) et relier sa transmission au péril fécal et à la voie féco-orale.
2. Citer les deux formes d’Entamoeba histolytica (kystique et végétative) et donner les tailles clés du cours pour kyste (10–15 μm) et trophozoïtes (20–40 μm).
3. Expliquer le cycle évolutif: ingestion de kystes mûrs à 4 noyaux, transformation en trophozoïtes, passage en kystes lors de la formation du bol fécal, et passage histolytique en cas de pathogénicité.
4. Décrire les modes de contamination (directe mains sales, indirecte eau/aliments/crudités, insectes, oro-anale) et le réservoir strictement humain.
5. Associer les localisations extra-intestinales à la dissémination hématogène (foie en premier, puis poumons/cerveau) et rappeler la notion de porteurs asymptomatiques.
6. Distinguer amibiase-infestation vs amibiase-maladie sur les selles: selles moulées (kystes matures) vs diarrhéiques (kystes immatures + minuta) et maladie (glaires sanglantes, examen immédiat à 37°C).
7. Décrire les signes de l’amibiase intestinale aiguë (dysenterie amibienne) et les formes atténuées diarrhéiques (absence de fièvre/altération de l’état général).
8. Citer les formes coliques et leurs diagnostics: amoebome (pseudo-tumeur inflammatoire, sérologie/biopsie) et colite chronique post-amibienne (séquelle).
9. Donner la triade de Fontan pour l’amibiase hépatique (douleur, fièvre en plateau 39–40°C, hépatomégalie) et les éléments de diagnostic biologique/clinique du cours.
10. Expliquer le diagnostic biologique de l’amibiase intestinale (EPS: état frais, colorations, concentration, répétition) et les limites de différenciation E. histolytica/E. dispar au microscope optique.
11. Lister les amoebicides et leur logique thérapeutique (tissulaire diffusible vs contact) et rappeler les grandes indications (porteurs sains, dysenterie, amibiase hépatique, colite post-amibienne).
12. Pour les amibes libres, associer agent–tableau clinique–délais: Naegleria fowleri (MEAP, incubation ~4 jours, évolution 2–3 jours) et Acanthamoeba (EAG, incubation semaines–mois, évolution 3–4 semaines; kératite amibien:
13. Décrire les prélèvements et examens en amibes libres (état frais, colorations dont bleu coton/acridine orange, culture à 37°C avec E. coli, et PCR selon le cours) ainsi que les principes de prévention (hygiène lentilles,