Caractérisation de la liaison ligand-récepteur

📋 Plan du Cours

1. Objectifs et principe du binding
2. Méthode par saturation
3. Méthode par compétition
4. Interprétation pharmacologique

📖 1. Objectifs et principe du binding

🔑 Notions clés & Définitions

• Étude de liaison : Caractérise l’affinité d’une substance pour un récepteur et sert de base à la sélection de substances nouvellement synthétisées ainsi qu’au screening pharmacologique.

📝 Points essentiels

• La procédure générale d’étude de liaison utilise des ligands radiomarqués, notamment le tritium (3H) et l’iode 125 (125I).

💡 Astuce mémo

Radiomarquage → mesure de liaison → caractérisation de l’affinité

📖 2. Méthode par saturation

★ À maîtriser

• Dans la méthode par saturation, on ajoute à une préparation de membrane une quantité croissante de ligand radioactif L* afin de déterminer le Kd et le nombre de récepteurs présents dans la préparation.

📌 La liaison spécifique correspond à la différence entre la liaison totale mesurée et la liaison non spécifique mesurée.

📐 Formule — La constante de dissociation vérifie $K_D = \frac{[L][R]}{[LR]} = \frac{[L]([R_t]-[LR])}{[LR]}$.

Compléments

📐 Formule — La relation de saturation peut s’écrire $Y = \frac{[RL^*]}{[R_t]} = \frac{[L^*]}{K_D + [L^*]}$, avec B pour la fraction liée et F pour la fraction libre.