Quelle plage de longueurs d'onde utilise la microscopie photonique ?
La lumière visible entre 390 et 760 nm.
Quelle résolution atteint un microscope photonique par transmission ?
Il observe des structures jusqu'à environ 0,2 μm.
Comment un microscope confocal produit-il des images tridimensionnelles ?
Par balayage laser et traitement informatique.
Qu'est-ce que le grossissement utile en microscopie ?
Le grossissement permettant de distinguer les détails les plus fins à l'œil.
Comment se fait l'observation au microscope photonique ?
Par transparence.
Quel type d'objet observe-t-on en lumière réfléchie avec une loupe binoculaire ?
Les objets opaques.
Qu'est-ce que la profondeur de champ en imagerie ?
La zone entre le premier et le dernier plan net d'une image.
Comment varie la profondeur de champ avec le grossissement ?
Elle diminue quand le grossissement augmente.
Quelle est la profondeur de champ pour un grossissement de 25 ?
Elle est de 25 μm.
Quelle est la profondeur de champ pour un grossissement de 1000 ?
Elle est de 0,6 μm.
Qu'appelle-t-on la limite de résolution ?
La plus petite distance distinguant deux objets en observation optimale.
Quelle est la résolution de l’œil humain à 25 cm ?
Environ 75 μm.
Quelle est la résolution d’une loupe binoculaire ?
Voisine de 2 μm.
Que permet d'observer la loupe binoculaire en lumière réfléchie ?
Les objets opaques.
Quelle est la limite de résolution d'une loupe binoculaire ?
Environ 2 μm.
Quel est le grossissement utile d'une loupe binoculaire ?
Environ x200.
Quel est le rôle du condenseur dans un microscope photonique classique ?
Il concentre la lumière traversant l’échantillon.
Comment se forme l'image dans un microscope photonique classique ?
L’objectif agrandit et renverse l’image, l’oculaire l’agrandit une seconde fois pour une image virtuelle.
Quelle est la formule du grossissement total d'un microscope ?
.
Quelle est la limite de résolution d'un microscope photonique classique ?
Elle peut atteindre 0,2 μm.
Quel avantage offre un objectif à immersion ?
Il améliore la résolution grâce à un liquide d’indice proche du verre.
Comment le contraste de phase sélectionne-t-il la lumière déviée par l’objet ?
Grâce à un anneau clair dans le condenseur et un anneau sombre dans l’objectif.
Quelle est la principale caractéristique du contraste interférentiel ?
Il utilise une lumière polarisée dédoublée puis recomposée.
Quel avantage donne le contraste interférentiel par rapport au halo lumineux ?
Il n’y a aucun halo lumineux avec le contraste interférentiel.
Comment le fond noir permet-il d’observer les bactéries ?
Il bloque la lumière directe et ne laisse passer que la lumière diffusée par l’objet.
Quels éléments utilise la polarisation pour visualiser les structures biréfringentes ?
Un polariseur avant le condenseur et un analyseur après l’objet.
Que se passe-t-il en polarisation avec des lames perpendiculaires ?
Il y a une extinction totale de la lumière.
Qu’est-ce que l’épifluorescence utilise pour exciter les objets fluorescents ?
Une lumière excitatrice sélectionnée par des filtres.
Quelle est la propriété du DAPI en fluorescence ?
Il s’incorpore à l’ADN et émet une fluorescence bleue.
Quelles étapes suivent les cellules pour la préparation au microscope photonique ?
Un étalement, une fixation puis une coloration.
Quelles étapes suivent les tissus pour la préparation au microscope photonique ?
Une fixation, une inclusion, une coupe puis une coloration.
Qu'est-ce que la fixation en préparation d'échantillons ?
La fixation préserve les structures proches du vivant, durcit les pièces, arrête les réactions biologiques et tue les cellules.
À quelle vitesse progresse la fixation dans un échantillon ?
Environ 1 mm de pénétration par heure.
Quel effet a une fixation rapide sur la qualité de la fixation ?
Elle améliore la qualité de la fixation.
Quelle est la différence entre fixateurs coagulants et additifs ?
Les coagulants coagulent les protéines, les additifs créent des pontages chimiques entre elles.
Citez trois fixateurs coagulants courants.
Le méthanol, l’éthanol et l’acide acétique.
Quels sont les trois préparations fixatrices principales et laquelle est surtout utilisée en cytogénétique ?
Le formol tamponné, le liquide de Bouin et le Carnoy, ce dernier utilisé en cytogénétique.
Quelles étapes comprend l'inclusion en paraffine ?
Elle lave, déshydrate, clarifie, remplace le solvant par paraffine liquide, puis refroidit en bloc.
À quelle température chauffe-t-on la paraffine liquide pour l'inclusion ?
À 56 °C.
Combien de temps dure l'inclusion en paraffine ?
Entre 36 et 48 heures.
Quelle épaisseur ont les lames coupées au microtome dans un bloc de paraffine ?
De 4 à 6 μm.
Quelle préparation est nécessaire avant de couper les os en paraffine ?
Une décalcification par un acide faible.
Quelles étapes comprend la coloration d'une lame ?
Suppression de la paraffine, réhydratation, application du colorant, rinçage à l'eau.
Quel est le rôle de la résine hydrophobe lors du montage ?
Assurer la conservation et améliorer la visibilité.
Quelle différence principale existe entre la technique en paraffine et celle en congélation ?
La paraffine conserve bien mais est lente et dissout lipides, la congélation est rapide et maintient activité biochimique mais donne une qualité d'image moindre.
Quelle est la différence entre colorations vitales et éosine-nigrosine ?
Les colorations vitales colorent les cellules vivantes avec des colorants peu toxiques, l’éosine-nigrosine colore les cellules mortes perméables.
Qu'est-ce que la métachromasie ?
La métachromasie est la propriété d’un colorant de changer de couleur selon le pH des molécules fixées.
Sur quelles structures se fixent les colorants acides et basiques ?
Les colorants acides se fixent sur les structures acidophiles, les colorants basiques sur les structures basophiles.
Quelle molécule est mise en évidence par la coloration de Feulgen-Rosenbeck ?
La coloration de Feulgen-Rosenbeck met en évidence l’ADN.
À quoi est proportionnelle l’intensité de la coloration de Feulgen-Rosenbeck ?
Elle est proportionnelle à la quantité d’ADN présente.
Que révèle la technique PAS et quel type de sucres élimine-t-elle ?
La technique PAS révèle les sucres complexes et élimine les monosaccharides et glucides simples.
Quelles substances sont mises en évidence par les colorations argentiques et la coloration de Perl’s ?
Les colorations argentiques révèlent la mélanine, amines biogènes et neurofibrilles, Perl’s révèle le fer.
Comment l’histo-enzymologie révèle-t-elle une activité enzymatique ?
Une enzyme transforme un substrat en produit insoluble et coloré sur matériel frais ou congelé non fixé.
Qu'est-ce que l'immuno-histochimie localise dans les cellules ?
Des protéines cellulaires.
Quelle caractéristique distingue les anticorps polyclonaux ?
Ils sont hétérogènes et reconnaissent plusieurs épitopes.
Quelle caractéristique distingue les anticorps monoclonaux ?
Ils sont homogènes et reconnaissent un seul épitope.
Comment agit l'anticorps en immunofluorescence directe ?
Il se fixe directement à l'antigène avec un fluorochrome.
Quel est le rôle de l'anticorps primaire en immunofluorescence indirecte ?
Il se fixe à l'antigène sans être marqué.
Que fait l'anticorps secondaire en immunofluorescence indirecte ?
Il se fixe à l'anticorps primaire et est fluorescent.
Qu'est-ce que l'hybridation in situ met en évidence ?
Des séquences définies d'ADN ou d'ARN.
Comment sont dénaturés les sondes et l'ADN cible en hybridation in situ ?
Par la chaleur.
Que se passe-t-il après la dénaturation en hybridation in situ ?
Les sondes complémentaires se fixent à la séquence recherchée.
Quel type de marquage produit l'hybridation in situ si la séquence cible est présente ?
Un marquage par fixation des sondes complémentaires.
Quels types de marquage peuvent être utilisés pour les sondes en hybridation in situ ?
Un isotope ou un colorant fluorescent.
Quel type de marquage est rarement utilisé en hybridation in situ ?
Un isotope.
Quel type de marquage est utilisé dans la technique FISH ?
Un colorant fluorescent.
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1. Quelle plage de longueurs d’onde correspond à la lumière visible utilisée par les microscopes photoniques ?
2. Quelle distinction caractérise la microscopie par transmission et la microscopie confocale ?
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