Qu'est-ce que la culture cellulaire ?
C'est l'ensemble des techniques pour faire croître des cellules hors de leur organisme d'origine.
Que permet d'étudier la culture cellulaire ?
Elle permet d'étudier le cycle cellulaire, l'expression des gènes, le métabolisme et les fonctions cellulaires.
Quelle application thérapeutique peut-on développer grâce à la culture cellulaire ?
On peut développer des cibles thérapeutiques.
Quelles sont les applications médicales de la culture cellulaire ?
Elles incluent autogreffes, ingénierie cellulaire, dépistage chromosomique, thérapie génique et fécondation in vitro.
Quels avantages offre la culture cellulaire pour les expériences ?
Elle facilite l'obtention de cellules homogènes et le contrôle des conditions expérimentales.
Quel inconvénient présente l'isolement des cellules en culture ?
Il modifie leurs communications et peut altérer leur comportement par rapport à l'organisme.
Quelle différence principale existe entre cellules en suspension et adhérentes ?
Les cellules en suspension se multiplient sans support d’adhérence, les adhérentes en nécessitent un.
Quelles sources permettent d'obtenir des cellules en suspension ?
Des liquides biologiques, liquide amniotique, moelle osseuse ou petites tumeurs.
Comment dissocie-t-on les tissus solides pour obtenir des cellules ?
Par digestion enzymatique et dissociation mécanique des fragments tissulaires.
Qu'est-ce qu'une culture primaire dissociée ?
Une culture issue directement de cellules isolées d’un tissu.
Quel est l'objectif de la purification cellulaire ?
Obtenir une culture pure d'un seul type cellulaire.
Quelles méthodes physiques inclut la purification cellulaire ?
La centrifugation sur gradient, la cytométrie en flux et l’ultracentrifugation.
Comment la cytométrie couplée à un trieur identifie-t-elle les cellules ?
Par des anticorps associés à des fluorochromes selon leurs antigènes.
Quel est le rôle du laser en cytométrie avec trieur ?
Exciter individuellement les cellules pour leur séparation.
Comment fonctionne le tri magnétique des lymphocytes B ?
Un anticorps anti-CD19 couplé à une bille magnétique retient les cellules CD19 positives.
Quel anticorps est utilisé pour trier les lymphocytes B par tri magnétique ?
L’anticorps anti-CD19.
Quelles sont les étapes principales de la culture de cellules en suspension ?
Récupération, mise en culture en P0, prolifération, centrifugation, division en P1, conservation.
Quels cryoprotecteurs sont utilisés en congélation cellulaire ?
Le glycérol et le DMSO.
À quelle température sont stockées les cellules en azote liquide ?
À -196 °C.
Pourquoi utilise-t-on la congélation cellulaire ?
Pour préserver les cellules pendant des années.
Comment décolle-t-on les cellules adhérentes à la confluence ?
Avec de la trypsine.
Que fait-on après avoir décolle les cellules adhérentes et les avoir centrifugées ?
On les repique à plus faible densité ou on les congèle.
En quoi consiste le dénombrement manuel des cellules ?
Décoller, centrifuger, déposer sur lame et compter au microscope.
Pourquoi les cellules vivantes ne sont-elles pas colorées dans un test d’exclusion ?
Elles expulsent le colorant.
Que se passe-t-il avec les cellules mortes dans un test d’exclusion de colorant ?
Elles restent colorées car elles ne peuvent plus expulser le colorant.
Qu'est-ce qu'une lignée cellulaire ?
Une population de cellules homogènes et stables avec division illimitée.
Quelle différence principale existe entre cultures primaires et lignées continues ?
Les cultures primaires s'épuisent, les lignées continues divisent indéfiniment.
Pourquoi les cellules cancéreuses peuvent-elles être immortelles ?
À cause d'une forte activité de la télomérase empêchant le raccourcissement des télomères.
Quelles phases comprend la croissance cellulaire ?
Quiescence, prolifération exponentielle, puis phase stationnaire.
À quelle température sont cultivées les cellules en étuve humide ?
À 37 °C.
Quel pourcentage de CO2 contient généralement l'atmosphère en culture cellulaire ?
Environ 5 % de CO2.
Comment est maintenu le pH du milieu de culture cellulaire ?
Grâce à des tampons comme l’HEPES et le bicarbonate.
Quel est le pH approximatif du milieu de culture cellulaire ?
Environ 7,4.
Quelles sont les sources principales de nutrition cellulaire ?
Le glucose pour le carbone et les acides aminés pour l’azote.
Quels facteurs de croissance sont nécessaires à la nutrition cellulaire ?
Le sérum de veau, les vitamines, l’insuline et le FGF.
Comment est assurée la stérilité des cultures cellulaires ?
Par manipulation sous hotte à flux laminaire et usage de milieux et instruments stériles.
Quels produits peuvent être utilisés pour prévenir les contaminations en culture cellulaire ?
Des antibiotiques ou des antifongiques.
Quelle différence principale distingue la co-culture directe de la co-culture indirecte ?
La co-culture directe place deux types cellulaires ensemble, la co-culture indirecte les sépare.
Comment fonctionne une co-culture indirecte par milieu conditionné ?
Le milieu sécrété par un type cellulaire est transféré à l'autre pour étudier ses effets.
Quel rôle joue la membrane poreuse dans un système d’insert ?
Elle sépare les types cellulaires et laisse passer les molécules selon la taille des pores.
Quelle différence y a-t-il entre culture 2D et culture 3D ?
La culture 2D forme une monocouche, la culture 3D utilise une matrice ou gel pour interactions tridimensionnelles.
Comment s'alignent les cellules endothéliales soumises à un flux ?
Elles s'alignent dans le sens du flux.
Quelle perméabilité ont les cellules endothéliales sous flux ?
Elles deviennent moins perméables.
Quel est l'effet du flux sur le stress oxydant des cellules endothéliales ?
Le stress oxydant est diminué.
Qu'est-ce qu'un bioréacteur en ingénierie tissulaire ?
Un système reproduisant des contraintes environnementales pour la culture cellulaire.
Quelles contraintes un bioréacteur peut-il reproduire ?
Un flux, une tension ou une compression.
Quelle est la première étape en ingénierie tissulaire ?
Le prélèvement des cellules.
Que fait-on après avoir amplifié les cellules en ingénierie tissulaire ?
On les implante dans une matrice adaptée aux conditions d'origine.
Quelle est la dernière étape du processus d'ingénierie tissulaire ?
La réimplantation du substitut biologique chez l'hôte.
Qu'est-ce qu'un organoïde en biologie cellulaire ?
Une structure obtenue par culture de cellules isolées avec matrice et stimuli pour reconstituer partiellement un organe.
À quoi servent les organoïdes en recherche biomédicale ?
À étudier maladies, toxicologie, développement, médecine régénérative, médicaments, infections et réduire l'expérimentation animale.
Comment obtient-on un organoïde alvéolaire ?
En cultivant des cellules épithéliales pulmonaires avec matrice et facteurs, formant un épithélium polarisé après apoptose centrale.
Quelles étapes comprend le fractionnement cellulaire ?
Homogénéisation en milieu isotonique, lyse cellulaire, puis purification des organites par centrifugation ou autres méthodes.
Comment fonctionne la centrifugation différentielle ?
Elle sépare les constituants cellulaires en augmentant vitesse et durée, récupérant d'abord les noyaux puis d'autres organites.
Quels organites sont récupérés avant les mitochondries en centrifugation différentielle ?
Les noyaux sont récupérés avant les mitochondries.
Que permettent de suivre les tests fonctionnels sur cellules vivantes ?
La prolifération, migration, sénescence, métabolisme et cytotoxicité grâce à l'imagerie et sondes spécifiques.
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