Fiche de révision : Cytologie et technique histopathologique

📋 Plan du Cours

1. Métier et évolution de la cytotechnologie
2. Dépistage du cancer cervical
3. Circuit du frottis cervico-vaginal
4. Classification de Bethesda
5. Cytopathologie non gynécologique
6. Étapes de la technique histologique
7. Techniques complémentaires diagnostiques
8. Risques et prévention des erreurs

📖 1. Métier et évolution de la cytotechnologie

🔑 Notions clés & Définitions

• Cytotechnicien : Technicien spécialisé dans la préparation et la lecture des lames cytologiques gynécologiques ou non gynécologiques, avec réalisation des prélèvements techniques, des colorations et une participation au diagnostic.

★ À maîtriser

• 🔄 Le travail comprend les étapes suivantes :

  1. traitement des échantillons
  2. réalisation des lames
  3. colorations
  4. contribution au diagnostic

• Les aides à la lecture peuvent sélectionner automatiquement 22 champs microscopiques d’intérêt selon l’hyperchromatisme, la taille des noyaux et le rapport nucléocytoplasmique.

• La digitalisation et l’intelligence artificielle permettent de réaliser le diagnostic sur écran plutôt que sur microscope optique, avec disparition du screening au profit du diagnostic seul, un gain de temps et une sensibilité augmentée.

Compléments

• La formation du cytotechnicien repose notamment sur un BTS, un DUT ou un BUT, éventuellement complété par un DEUST, une licence professionnelle, une formation de fournisseur ou une formation interne.

💡 Astuce mémo

Digitalisation et IA → diagnostic sur écran, gain de temps et sensibilité

📖 2. Dépistage du cancer cervical

★ À maîtriser

• Les HPV 16 et 18 sont la cause principale du cancer du col de l’utérus, qui représente près de 3000 nouveaux cas et plus de 1000 décès par an.

📌 La vaccination contre certains HPV, notamment les types 6, 11, 16 et 18, est proposée aux filles et aux garçons entre 11 et 15 ans.

📌 Le dépistage du cancer du col par frottis cervico-vaginal est recommandé entre 25 et 30 ans selon les recommandations de la HAS de 2019.

Compléments

• Douze types d’HPV sont considérés comme cancérigènes.

💡 Astuce mémo

Prévention primaire par vaccination, prévention secondaire par dépistage

📖 3. Circuit du frottis cervico-vaginal

📝 Points essentiels

• Le frottis cervico-vaginal consiste à recueillir les cellules exocervicales et endocervicales avec un cervex brush, puis à les mettre en suspension dans une solution alcoolique de méthanol à 35–55 %.

• 🔄 Le circuit pré-analytique comprend : déballage, étiquetage, enregistrement, vérification de l’identitovigilance, orientation vers la cytologie ou la virologie HPV

• Dans l’automate ThinPrep 5000, la suspension est homogénéisée, le liquide est aspiré par les pores d’un filtre, les cellules restent sur la paroi du filtre, puis celle-ci est apposée sur une lame de verre.

• La coloration utilise trois solutions principales :

  • solution aqueuse d’hématoxyline pour les noyaux
  • solution alcoolique EA 50 contenant l’éosine-azur pour le cytoplasme
  • solution alcoolique OG 6 contenant l’orange 6 pour la kératine

💡 Astuce mémo

Prélever → suspendre → filtrer → déposer → fixer → colorer → lire

📖 4. Classification de Bethesda

📝 Points essentiels

• Le compte rendu de Bethesda précise :
  • le type d’échantillon
  • la satisfaction pour l’analyse microscopique
  • la catégorie générale
  • les anomalies épithéliales
  • les tests complémentaires
  • l’assistance à la lecture
  • les recommandations diagnostiques

📌 Un frottis est non satisfaisant en cas de paucicellularité inférieure à 5000 cellules, avec éventuellement une hémorragie, une inflammation ou la présence de gel lubrifiant.

📌 La catégorie négative pour une lésion intraépithéliale ou maligne comprend les modifications cellulaires non néoplasiques et des organismes ou modifications compatibles avec une vaginose bactérienne, Candida spp., des parasites, Actinomyces spp. ou Herpes simplex virus.

• Les anomalies malpighiennes comprennent : ASC-US, ASC-H, lésion intraépithéliale malpighienne de bas grade, lésion intraépithéliale malpighienne de haut grade, carcinome épidermoïde

💡 Astuce mémo

Échantillon satisfaisant ou non, puis négatif ou anormal

📖 5. Cytopathologie non gynécologique

🔑 Notions clés & Définitions

• Cytopathologie non gynécologique : Recherche des cellules atypiques, notamment tumorales malignes, dans des liquides spontanément émis ou prélevés et dans des cytoponctions de nodules.

★ À maîtriser

📌 La cytopathologie non gynécologique est peu invasive et rapide, mais ses limites diagnostiques sont importantes, notamment pour apprécier l’invasion.

• La cytologie urinaire dépiste et suit les lésions tumorales du système urinaire, tandis que la cytologie thyroïdienne classe les lésions nodulaires pour orienter la surveillance, la lobectomie ou la thyroïdectomie totale.

Compléments

• La cytologie bronchique recherche les cellules tumorales malignes, précise leur nature comme un carcinome ou un adénocarcinome et détermine leur origine primitive ou métastatique.

• Dans les épanchements pleuraux ou péritonéaux, la cytologie recherche une inflammation caractérisée par des polynucléaires neutrophiles ou des lymphocytes, ainsi que des cellules tumorales malignes et leur origine.

📖 6. Étapes de la technique histologique

📝 Points essentiels

• 🔄 La chronologie histologique comprend :

  1. réception et tri
  2. fixation et macroscopie
  3. déshydratation et clarification
  4. imprégnation et enrobage en paraffine
  5. microtomie et étalement
  6. coloration et montage
  7. validation

• Le formol est un fixateur universel qui conserve le prélèvement et sa structure anatomique proche de l’état in vivo, mais sa vitesse moyenne de pénétration est de 1 mm par heure, soit 5 heures pour 5 mm.

• La déshydratation élimine l’eau avec de l’alcool, la clarification utilise un solvant miscible à l’eau et à la paraffine comme le xylène, puis l’imprégnation remplace le solvant par de la paraffine.

• La coloration HES associe :

  • hématoxyline pour les noyaux en violet
  • éosine pour le cytoplasme en rose
  • safran pour le collagène en orange

💡 Astuce mémo

Fixer → déshydrater → clarifier → imprégner → enrober → couper → colorer

📖 7. Techniques complémentaires diagnostiques

★ À maîtriser

• L’immunohistochimie repose sur :

  • antigène
  • anticorps primaire
  • anticorps secondaire lié à une enzyme
  • substrat de révélation

• La coloration PAS met en évidence les polysaccharides et peut orienter vers une infection fongique ou une maladie auto-immune, tandis que Grocott révèle les filaments mycéliens et le bleu alcian les mucosités acides et les mucines acétiques.

• KRAS code normalement une protéine transmettant les signaux de croissance, et sa mutation est présente dans 30–40 % des cancers ; lorsqu’une tumeur porte cette mutation, les traitements par anticorps monoclonaux ciblant EGFR peuvent être inefficaces.

Compléments

• La technique Idylla repose sur une PCR en temps réel réalisée à partir de copeaux de paraffine introduits dans une cartouche spécifique du gène recherché.

📖 8. Risques et prévention des erreurs

📝 Points essentiels

• Les risques principaux sont :
  • perte du prélèvement
  • dégradation du prélèvement
  • difficulté de lecture
  • erreur d’interprétation

📌 Les non-conformités sont recherchées dès la réception par l’identitovigilance et la vérification de la concordance des renseignements fournis, notamment le nom, le prénom et les numéros.

📌 Pour limiter les inversions, le laboratoire manipule un seul flacon à la fois, conserve les flacons pendant 2 à 3 semaines, réalise un seul bloc à la fois lors de l’enrobage et utilise une lame à la fois lors de la microtomie.

• 🔄 La conduite à tenir comprend : identifier le dossier potentiellement inversé, faire vérifier la concordance par un pathologiste, faire le point sur la prise en charge, tracer les actions dans le dossier, déclarer une non-conformité

💡 Astuce mémo

Non-conformité ou inversion → vérification, traçabilité et formation

📊 Tableaux de synthèse

Principales colorations