Fiche de révision : Électrophorèse des protéines sériques

📋 Plan du Cours

1. Composition du sang et prélèvements
2. Répartition des protéines plasmatiques
3. Principes de l’électrophorèse
4. Électrophorèse capillaire normale
5. Indications de l’électrophorèse
6. Origine et variations des protéines
7. Méthode d’interprétation d’une EPS
8. Syndrome inflammatoire et complément
9. Gammapathies et immunoglobulines
10. Atteintes rénale et hépatique

📖 1. Composition du sang et prélèvements

📝 Points essentiels

• Le sang contient environ 55 % de plasma, 40 % de globules rouges et moins de 5 % de globules blancs.

• Le plasma est constitué d’environ:

  • 90 % d’eau
  • 7 % de protéines
  • 3 % de lipides, ions, sels, gaz, vitamines et oligoéléments

📌 Le sérum est obtenu après coagulation et ne contient plus les facteurs de coagulation consommés, tandis que le plasma est obtenu avec un anticoagulant et conserve ces facteurs.

📌 L’électrophorèse des protéines sériques se réalise toujours sur du sérum, car la concentration et la répartition des protéines diffèrent entre sérum et plasma.

💡 Astuce mémo

Sérum sans facteurs de coagulation, plasma avec facteurs

📖 2. Répartition des protéines plasmatiques

★ À maîtriser

• Les dix principales protéines plasmatiques sont:
  • albumine
  • IgG
  • transferrine
  • fibrinogène
  • IgA
  • α2-macroglobuline
  • α1-antitrypsine
  • complément C3
  • IgM
  • haptoglobine

Compléments

• Vingt-deux protéines représentent environ 99 % des protéines plasmatiques.

📖 3. Principes de l’électrophorèse

🔑 Notions clés & Définitions

• Électrophorèse : Méthode de séparation de particules chargées qui migrent dans un support soumis à un champ électrique.

★ À maîtriser

📌 La migration électrophorétique dépend principalement de la charge globale de la protéine ; une particule dépourvue de charge ne migre pas.

Compléments

• L’haptoglobine et l’α2-macroglobuline peuvent migrer au même endroit malgré une α2-macroglobuline environ dix fois plus grosse que l’haptoglobine.

💡 Astuce mémo

Charge différente → migration différente → séparation

📖 4. Électrophorèse capillaire normale

📝 Points essentiels

• L’électrophorèse sérique sépare six fractions : albumine, α1, α2, β1, β2 et γ.

• Les valeurs de référence sont de 60 à 78 g/L pour les protéines sériques, 40,2 à 47,6 g/L pour l’albumine, 2,1 à 3,5 g/L pour α1, 5,1 à 8,5 g/L pour α2, 3,4 à 5,2 g/L pour β1, 2,3 à 4,7 g/L pour β2 et 6 à 13,5 g/L pour γ.

• Lors d’une électrophorèse capillaire, le sérum est injecté à l’anode, migre dans le capillaire, passe devant un détecteur puis permet d’obtenir les six fractions.

📌 L’électroendosmose entraîne les protéines vers la cathode malgré leur migration théorique vers l’anode, car le courant liquide généré par les charges positives est plus fort que le champ électrique imposé.

💡 Astuce mémo

Injection → migration → détection → six fractions

📖 5. Indications de l’électrophorèse

★ À maîtriser

• L’électrophorèse est l’examen de référence pour dépister un myélome lorsqu’un pic monoclonal est suspecté.

• Les principales indications comprennent:

  • infections répétées
  • douleurs osseuses inexpliquées
  • polyarthrite inexpliquée
  • adénopathies ou splénomégalie
  • neuropathie inexpliquée
  • hypercalcémie
  • insuffisance rénale récente
  • protéinurie supérieure à 0,5 g/L

Compléments

• Une immunoglobuline monoclonale est retrouvée chez environ 3 % des personnes de 50 ans et 7 à 8 % des personnes de 80 ans.

📖 6. Origine et variations des protéines

🔑 Notions clés & Définitions

• Demi-vie protéique : Temps nécessaire pour dégrader 50 % des molécules présentes à un moment donné.

★ À maîtriser

• Le foie synthétise la majorité des protéines sanguines, notamment l’albumine, l’α1-antitrypsine, l’α2-macroglobuline, l’haptoglobine, la transferrine et le complément, tandis que les immunoglobulines sont produites par les plasmocytes.

• Les protéines peuvent être perdues: dans les urines lors d’un syndrome néphrotique, dans les selles lors d’une entéropathie exsudative, par la peau lors de brûlures

Compléments

• L’hypermétabolisme, comme dans l’hyperthyroïdie, et l’hypercatabolisme endogène, comme dans l’hypercortisolisme, augmentent la destruction des protéines.

💡 Astuce mémo

Synthèse, pertes ou catabolisme → variation sérique

📖 7. Méthode d’interprétation d’une EPS

★ À maîtriser

• 🔄 L’interprétation suit trois étapes:

  1. analyse quantitative
  2. analyse qualitative du tracé
  3. commentaire bref

• L’analyse qualitative recherche:

  • un tracé cohérent
  • une allure gaussienne
  • le nombre de fractions
  • des pics supplémentaires
  • les éléments attirant l’œil

Compléments

📌 Un commentaire d’électrophorèse doit tenir en environ trois lignes plutôt que dans une description détaillée.

💡 Astuce mémo

Quantitatif → qualitatif → commentaire

📖 8. Syndrome inflammatoire et complément

📝 Points essentiels

📌 Dans un syndrome inflammatoire, l’albumine, la préalbumine, les apolipoprotéines et la transferrine diminuent, tandis que les fractions α1, α2 et β2 augmentent.

• Le complément regroupe plusieurs dizaines de protéines de l’immunité innée impliquées dans l’inflammation, la lyse des pathogènes et l’opsonisation.

📌 Le complément C3 et C4 augmente dans l’inflammation, mais peut diminuer par consommation après son activation contre un agent infectieux.

💡 Astuce mémo

Albumine et transferrine diminuent, α1, α2 et β2 augmentent

📖 9. Gammapathies et immunoglobulines

🔑 Notions clés & Définitions

• Pic monoclonal : Déformation étroite de la zone des immunoglobulines produite par un clone de plasmocytes sécrétant une seule immunoglobuline.

📝 Points essentiels

• Un pic monoclonal peut se situer dans:

  • la fraction γ
  • la fraction β2
  • la fraction β1
  • exceptionnellement la fraction α2

• Un pic monoclonal est associé à un cancer dans 20 à 25 % des cas, tandis que les autres cas correspondent à des stades précancéreux ou à des artéfacts.

📌 Une augmentation polyclonale des gammaglobulines est large et homogène, tandis qu’une gammapathie monoclonale forme un pic étroit et pointu.

💡 Astuce mémo

Base large = polyclonal, pic étroit = monoclonal

📖 10. Atteintes rénale et hépatique

🔑 Notions clés & Définitions

• Syndrome néphrotique : Défini biologiquement par une albuminémie inférieure à 30 g/L et une protéinurie supérieure à 3 g par 24 heures.

★ À maîtriser

📌 Dans le syndrome néphrotique, toutes les protéines diminuent sauf principalement l’α2-macroglobuline, trop volumineuse pour traverser le glomérule, ce qui augmente relativement la fraction α2.

📌 L’insuffisance hépatocellulaire diminue les protéines synthétisées par le foie et peut produire un bloc bêta-gamma lié à une synthèse polyclonale d’immunoglobulines, notamment des IgA.

Compléments

• L’α2-macroglobuline est une glycoprotéine de haut poids moléculaire qui inhibe de nombreuses protéases et transporte des cytokines, des facteurs de croissance et environ 20 % du zinc.

• Une EPS réalisée sur du plasma peut produire un faux pic monoclonal à la jonction β2-γ en raison du fibrinogène, et les produits de contraste peuvent provoquer un aspect similaire.

💡 Astuce mémo

Syndrome néphrotique : α2 conservée ; insuffisance hépatique : protéines hépatiques diminuées

📊 Tableaux de synthèse

Sérum et plasma