Fiche de révision : Histologie et cytologie I

📋 Plan du Cours

1. Théorie cellulaire et types cellulaires
2. Organisation générale de la cellule
3. Principes de microscopie
4. Préparation en microscopie optique
5. Fixation et inclusion des tissus
6. Microscopie électronique à transmission
7. Coloration et mise en contraste

📖 1. Théorie cellulaire et types cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Théorie cellulaire : Schleiden et Schwannn — Reconnaît la cellule comme l’unité fonctionnelle du vivant et affirme que tous les organismes sont composés d’une ou plusieurs cellules.

★ À maîtriser

• La taille moyenne d’une cellule eucaryote est de 10 à 20 micromètres.

• La vie se transmet par division cellulaire, ce qui établit une continuité du vivant.

Compléments

• Selon la théorie cellulaire présentée, tous les êtres vivants sont issus d’un ancêtre commun.

💡 Astuce mémo

Division cellulaire → continuité de la vie

📖 2. Organisation générale de la cellule

🔑 Notions clés & Définitions

• Protoplasme : Tout ce qui se trouve à l’intérieur de la membrane plasmique et comprend le cytoplasme et le noyau.

★ À maîtriser

📌 Les cellules procaryotes ne possèdent pas de noyau, tandis que les cellules eucaryotes possèdent un noyau.

• Une cellule est principalement composée d’eau, de macromolécules organiques et de substances inorganiques, et elle se trouve dans un milieu essentiellement aqueux.

Compléments

• La taille d’un globule rouge est d’environ 7 micromètres.

💡 Astuce mémo

Procaryote sans noyau, eucaryote avec noyau

📖 3. Principes de microscopie

🔑 Notions clés & Définitions

• Limite de résolution : La plus petite distance permettant de discerner deux points distincts.

★ À maîtriser

• Robert Hooke a observé des écorces de chêne avec les premiers microscopes optiques et a proposé le terme « cellule », issu des chambres des moines dans les monastères.

• Le pouvoir de résolution de l’œil humain est d’environ 0,2 millimètre, celui du microscope optique d’environ 0,2 micromètre et celui du microscope électronique d’environ 0,2 nanomètre.

📌 Un rayonnement ne permet pas d’observer des détails beaucoup plus petits que sa propre longueur d’onde, donc un petit détail nécessite un rayonnement de courte longueur d’onde.

Compléments

• Dans un microscope, le rayonnement est émis par une source, focalisé sur l’échantillon, modifié par l’objet, puis projeté par les lentilles afin de former une image observable.

💡 Astuce mémo

Rayonnement → échantillon → lentilles → image

📖 4. Préparation en microscopie optique

📝 Points essentiels

• La préparation d’un tissu pour la microscopie optique comprend la fixation, l’inclusion, la microtomisation et la coloration.

• La microtomisation produit des tranches de tissu de 5 à 10 micromètres d’épaisseur, déposées sur un support en verre pour laisser passer la lumière.

📌 La coloration est nécessaire parce qu’un tissu non coloré est transparent et que ses structures sont difficiles à observer.

💡 Astuce mémo

Fixer, inclure, couper, colorer

📖 5. Fixation et inclusion des tissus

🔑 Notions clés & Définitions

• Fixation : Fige les cellules dans un état aussi proche que possible du vivant et empêche leur destruction par autolyse.

★ À maîtriser

• L’inclusion en paraffine déshydrate le tissu avec de l’alcool, le traite au xylène, puis l’imprègne de paraffine liquide qui durcit en refroidissant.

Compléments

• Le formaldéhyde réagit avec les groupements amines des protéines et forme des liaisons covalentes qui stabilisent la structure cellulaire.

• Le glutaraldéhyde est un dialdéhyde plus efficace que le formaldéhyde parce qu’il forme de multiples ponts entre les protéines.

• La congélation à l’azote liquide et les micro-ondes sont des méthodes physiques de fixation qui stoppent l’activité enzymatique.

💡 Astuce mémo

Paraffine dissout les graisses, congélation les conserve

📖 6. Microscopie électronique à transmission

★ À maîtriser

📌 Le microscope optique utilise la lumière visible, tandis que le microscope électronique à transmission utilise des électrons accélérés.

• La préparation pour le microscope électronique à transmission comprend la fixation au glutaraldéhyde et au tétraoxyde d’osmium, l’inclusion dans une résine, l’ultramicrotomisation et la mise en contraste avec des agents lourds.

Compléments

• Le tétraoxyde d’osmium se lie aux queues hydrophobes des lipides et empêche leur dégradation.

• En microscopie électronique à transmission, le noyau et les ribosomes deviennent plus denses et apparaissent noirs après la mise en contraste.

💡 Astuce mémo

Fixation → résine → ultramicrotomie → contraste

📖 7. Coloration et mise en contraste

🔑 Notions clés & Définitions

• Basophilie : Une affinité pour les colorants basiques et se colore avec eux.
• Acidophilie : Une affinité pour les éléments acides et se colore avec un colorant acide.

★ À maîtriser

• Dans la coloration trichrome, l’hématoxyline colore les acides nucléiques, notamment l’ADN et l’ARN, en mauve.

Compléments

• Dans la coloration trichrome, la safranine colore les fibres de collagène de la matrice extracellulaire en jaune-orange.

• En microscopie électronique à transmission, le citrate de plomb augmente le contraste des membranes et l’acétate d’uranyle augmente le contraste de l’ADN.

💡 Astuce mémo

Basophile attire les colorants basiques, acidophile les colorants acides

📊 Tableaux de synthèse

Comparaison des microscopes