Pourquoi les micro-organismes sont-ils utiles en laboratoire ?
Ils sont nombreux, peu encombrants, à reproduction rapide et modifiables génétiquement.
Que sont les virus en biologie ?
Des machines biologiques qui injectent leur ADN dans une cellule eucaryote pour se multiplier.
Qu'est-ce que la transcriptase inverse ?
Une enzyme qui synthétise de l’ADN à partir d’un ARN.
Quel est le rôle de la transcriptase inverse en RT-PCR ?
Elle est utilisée pour synthétiser de l’ADN à partir d’un ARN.
Quelle est la première étape pour amplifier un plasmide bactérien ?
Introduire le plasmide dans une bactérie.
Comment sélectionne-t-on les bactéries lors de l'amplification d'un plasmide ?
En choisissant celles résistantes à l’antibiotique.
Que font les bactéries avec les protéines recombinantes simples ?
Elles les produisent efficacement.
Pourquoi les bactéries ne conviennent-elles pas pour les protéines complexes ?
Elles ne réalisent pas correctement les modifications post-traductionnelles nécessaires.
Pourquoi Drosophila melanogaster est-elle un modèle génétique utile ?
Son cycle reproductif est rapide.
Quelle homologie importante possède Drosophila melanogaster ?
Elle a une homologie importante avec l’Homme.
Quelle taille fait Caenorhabditis elegans ?
Environ 1 mm.
Quelle découverte a permis Caenorhabditis elegans ?
La compréhension de la mort cellulaire programmée, ou apoptose.
Pourquoi utilise-t-on la souris en laboratoire ?
Pour étudier la biologie des mammifères et les maladies humaines.
Quelle est la durée du cycle de gestation de la souris ?
Trois semaines.
Quelle mutation porte la souris Trembler ?
Une mutation du gène Pmp22.
Quelle mutation porte la souris Nude et quel est son intérêt ?
Elle porte une mutation du gène Foxn1 et permet de greffer des cellules cancéreuses humaines sans rejet immunitaire immédiat.
Qu'est-ce que la transgénèse ?
L'introduction d'un ou plusieurs gènes dans un organisme pour qu'ils y soient exprimés.
Quelle est la première étape de la transgénèse classique chez la souris ?
Injecter de l'ADN linéaire dans le pronucléus d'un ovocyte fécondé.
Que fait-on après l'injection d'ADN dans la transgénèse classique ?
Réimplanter l'embryon dans une femelle porteuse.
Comment détecte-t-on le transgène chez les souriceaux ?
On crible les souriceaux pour détecter le transgène.
Quelle est la caractéristique de l'intégration du transgène en transgénèse classique ?
Elle est aléatoire.
Quels paramètres du transgène ne sont pas maîtrisés en transgénèse classique ?
Le nombre de copies, le site d'intégration et le niveau d'expression.
À quoi sert un gène rapporteur sous contrôle d'un promoteur ?
À visualiser le lieu et le moment d'expression d'un gène.
Qu'est-ce que la recombinaison homologue ?
C'est l'insertion d'un transgène dans une région ciblée grâce à des séquences homologues.
Comment sont sélectionnées les cellules ES ayant intégré un transgène ?
Par résistance à un antibiotique.
Quelle est la différence entre un KO et un KI ?
Un KO inactive un gène, un KI le remplace par un transgène ou une version modifiée.
Quel effet a l'inactivation du gène de la myostatine chez la souris ?
Elle entraîne une croissance accrue des muscles.
Que fait-on après la sélection des cellules ES résistantes ?
On les réinjecte dans un blastocyste puis on implante dans une femelle porteuse.
Que peut remplacer un KI dans un gène ?
Un transgène, un gène rapporteur ou une version modifiée.
Que désigne CRISPR dans le génome bactérien ?
Des répétitions palindromiques régulièrement espacées.
Quel rôle joue CRISPR dans la défense bactérienne ?
Il participe à la défense contre les séquences d’ADN viral.
Quel ARN reconnaît la séquence cible dans CRISPR ?
L’ARNsg reconnaît la séquence cible.
Comment Cas9 est-il recruté dans le système CRISPR ?
Cas9 est recruté grâce au tracrRNA.
Que fait Cas9 après recrutement dans CRISPR ?
Il coupe les deux brins d’ADN en amont de la séquence PAM.
Quelle conséquence a la réparation NHEJ après coupure CRISPR ?
Elle provoque des insertions ou délétions aléatoires souvent conduisant à un KO.
Comment la réparation HDR agit-elle après coupure CRISPR ?
Elle utilise un ADN donneur homologue pour réaliser un KI.
À quel stade CRISPR peut-il être réalisé pour cibler une mutation ?
Au stade d’ovocyte fécondé.
Comment obtient-on une culture primaire de cellules eucaryotes ?
Par prélèvement de cellules par biopsie ou prise de sang placées dans un milieu adapté.
Que consiste le repiquage en culture cellulaire ?
Détacher, diluer et transférer les cellules dans de nouvelles boîtes.
Qu'est-ce que l'inhibition de contact en culture cellulaire ?
L'arrêt de la division des cellules lorsqu'elles se touchent et que la culture est confluente.
Qu'est-ce que la sénescence cellulaire ?
L'arrêt progressif de la prolifération et la mort des cellules après plusieurs divisions.
Quelle est une cause principale de la sénescence cellulaire ?
Le raccourcissement des télomères.
Quels éléments sont nécessaires aux cellules en culture ?
Acides aminés, sucres, facteurs de croissance, ions minéraux, pH adapté, atmosphère contrôlée, température d'environ 37 °C.
Que peuvent produire les cellules souches totipotentes ?
Un organisme entier et ses annexes embryonnaires.
Que produisent les cellules souches pluripotentes ?
Tous les types cellulaires sauf les annexes embryonnaires.
Que produisent les cellules souches multipotentes ?
Plusieurs types cellulaires d’un même lignage.
Que produisent les cellules souches unipotentes ?
Un seul type cellulaire.
Quelle est l'origine des cellules ES ?
La masse interne d’un blastocyste.
Que peuvent donner les cellules ES ?
Tous les types cellulaires de la masse interne du blastocyste.
Que sont les cellules IPS ?
Des cellules différenciées reprogrammées vers un état pluripotent sans détruire un embryon.
Que nécessite la reprogrammation en cellules IPS ?
La présence de quatre facteurs de transcription.
Qu'est-ce qu'un vecteur d'expression ?
Une portion d'acide nucléique exogène permettant d'exprimer un gène dans une cellule hôte.
Que contient généralement un vecteur d'expression ?
Un promoteur eucaryote et l'ADNc correspondant à l'ARNm d'intérêt.
Comment obtient-on l'ADNc utilisé dans un vecteur d'expression ?
Par rétrotranscription d'un ARNm déjà épissé grâce à une transcriptase inverse.
Que peut faire l'ADNc dans la cellule hôte ?
Il peut être transcrit dans le noyau de la cellule hôte.
Qu'est-ce que la surexpression ?
Une production d'un gène en quantité supérieure à la normale.
Comment la surexpression est-elle souvent obtenue ?
Grâce à un vecteur portant un promoteur puissant.
Quelle méthode introduit l’ADN cellule par cellule ?
La micro-injection.
Quelle méthode permet de traiter plusieurs cellules simultanément ?
L’électroporation.
Comment l’électroporation facilite-t-elle l’introduction d’ADN ?
Par une déstabilisation brève de la bicouche lipidique par champ électrique.
Qu’utilise la lipofection pour introduire l’ADN dans la cellule ?
Des bulles lipidiques qui fusionnent avec la membrane cellulaire.
Comment le bombardement avec des particules d’or ou de tungstène introduit-il l’ADN ?
En projetant des particules recouvertes d’ADN à travers la membrane plasmique.
Pourquoi l’intensité de l’électroporation doit-elle être contrôlée ?
Un traitement trop fort peut tuer les cellules.
Combien de temps doit durer l’électroporation ?
Quelques millisecondes.
Quelle fonction principale ont les bactéries dans les modèles expérimentaux ?
Elles amplifient rapidement des plasmides et produisent des protéines simples.
Quel rôle jouent les levures dans les modèles expérimentaux ?
Elles modélisent les mécanismes eucaryotes.
Que modélisent les animaux dans les modèles expérimentaux ?
Ils modélisent les interactions entre tissus et organismes.
Quelle est la bactérie principale utilisée en laboratoire ?
Escherichia coli.
Quel organisme eucaryote unicellulaire est choisi pour les études génétiques ?
Saccharomyces cerevisiae.
Quelle caractéristique distingue les cellules transformées des cellules primaires ?
Elles peuvent proliférer en hauteur ou en suspension et s’autostimuler sans facteurs de croissance.
Quelle capacité ont les cellules transformées que n'ont pas les cellules primaires ?
Elles ignorent l’inhibition de contact et forment une lignée continue.
Que sont les cellules HeLa ?
Une lignée cellulaire continue issue d’un cancer humain utilisée en laboratoire.
Teste tes connaissances avec un QCM de 25 questions sur Méthodes de biologie cellulaire.
1. À propos de l’établissement et du repiquage des cultures cellulaires :
2. Parmi les propositions suivantes concernant la souris de laboratoire, la(les)quelle(s) est(sont) exacte(s) ?
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