Microscopie et marquage cellulaire

Extrait de la fiche de révision

Plan du Cours

  1. Résolution et principes de microscopie
  2. Microscopie optique à transmission
  3. Microscopie à fluorescence
  4. Préparation des échantillons
  5. Coloration et contraste cellulaire
  6. Marquage immunocytochimique
  7. Marquages direct et indirect

1. Résolution et principes de microscopie

Notions clés & Définitions

  • Limite de séparation : La plus petite distance à laquelle deux objets distincts restent discernables.

★ À maîtriser

  • L’œil nu distingue les objets jusqu’à 100 µm, tandis que la microscopie optique atteint une résolution de 200 nm, soit 500 fois meilleure.

Compléments

  • La lumière utilisée en microscopie optique est relativement peu destructrice, ce qui permet d’observer des cellules vivantes en culture dans certaines conditions.

  • La microscopie optique a une résolution plus faible que la microscopie électronique.

Astuce mémo

Œil nu : 100 µm ; microscope optique : 200 nm

2. Microscopie optique à transmission

  • En microscopie à transmission, la lumière traverse les cellules, qui peuvent être vivantes et non colorées ou fixées et colorées.
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Aperçu du QCM

1. Quelle grandeur désigne la plus petite distance à laquelle deux objets distincts restent discernables ?

2. Un observateur compare une observation à l’œil nu, dont la limite est de 100 µm, à une observation en microscopie optique dont la résolution est de 200 nm. Quel rapport de résolution obtient-il ?

3. Une équipe examine au microscope à transmission une préparation de cellules fixées et colorées. Quel principe optique s’applique à cette observation ?

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Aperçu des flashcards

Qu’est-ce que la limite de séparation ?

La plus petite distance à laquelle deux objets restent discernables.

Quelle résolution atteint la microscopie optique ?

200 nm, soit 500 fois meilleure que celle de l’œil nu.

En microscopie à transmission, que traverse la lumière ?

Les cellules.

Que permet de suivre la microscopie à transmission dans leur récipient ?

Des cultures cellulaires directement dans leur récipient de culture.

Qu’est-ce qu’un fluorochrome ?

Une molécule qui absorbe des photons à une longueur d’onde d’excitation spécifique, puis en émet en revenant à l’état fondamental.

Comment la longueur d’onde d’excitation se compare-t-elle à celle d’émission d’un fluorochrome ?

Elle est toujours plus faible.

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Questions fréquentes

Que contient la fiche de révision sur Microscopie et marquage cellulaire ?

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Combien de questions contient le QCM sur Microscopie et marquage cellulaire ?

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