QCM : Microscopie et marquage cellulaire (11 questions)

Explication

La limite de séparation correspond à la plus petite distance permettant encore de distinguer deux objets distincts. Le grossissement concerne l’agrandissement, la taille observable concerne les dimensions de l’objet et le contraste caractérise les différences visuelles de l’image.

Explication

Comme 100 µm équivalent à 100 000 nm, le rapport est $100\,000/200=500$ : la microscopie optique distingue donc des objets séparés par une distance 500 fois plus petite. Inverser le rapport attribue à tort l’avantage à l’œil nu, tandis que 200 µm et le facteur 5 résultent de comparaisons erronées.

Explication

En microscopie à transmission, la lumière traverse les cellules, qui peuvent être fixées et colorées ou vivantes et non colorées. L’excitation de fluorochromes relève de la fluorescence, la réflexion n’est pas le principe décrit et l’option des cellules vivantes non colorées ne correspond pas à la préparation indiquée.

Explication

La source envoie les photons au condenseur, qui les focalise sur l’objet ; l’objectif récupère ensuite les rayons et les dirige vers l’oculaire placé près de l’œil. Placer l’objectif avant le condenseur inverse le trajet, intervertir objectif et oculaire confond leurs rôles, et faire précéder l’objet par le condenseur omet la focalisation sur celui-ci.

Explication

Un fluorochrome absorbe des photons à une longueur d’onde d’excitation spécifique, passe à un état excité, puis émet des photons en revenant à l’état fondamental. Un filtre sélectionne des longueurs d’onde, mais n’absorbe puis n’émet pas lui-même les photons comme le fait un fluorochrome.

Explication

Les coupes en microscopie optique mesurent de 1 à 10 µm, ce qui permet aux faisceaux lumineux de traverser la préparation. Une épaisseur de 10 à 100 µm pourrait être pertinente pour d’autres préparations, mais ce n’est pas la plage indiquée ici.

Explication

La réfringence naturelle peut créer un contraste suffisant pour observer certaines cellules, notamment des cellules vivantes en culture, sans les colorer. La révélation spécifique des protéines relève plutôt de l’immunocytochimie, et non de la réfringence.

Explication

La préparation classique suit une séquence allant de la fixation à la déshydratation, puis à l’inclusion et à la coupe, avant l’obtention du contraste. Placer la coupe avant l’inclusion inverse deux étapes, car l’inclusion rend l’échantillon assez solide pour être coupé.

Explication

Dans le marquage indirect, des anticorps secondaires marqués se fixent à l’anticorps primaire et amplifient le signal, ce qui accroît la sensibilité. Le couplage direct de l’anticorps anti-antigène à un marqueur caractérise plutôt le marquage direct.

Explication

La lumière employée en microscopie optique est relativement peu destructrice, ce qui rend possible l’observation de cellules vivantes dans certaines conditions. Une fixation chimique, au contraire, tue les cellules et sert à préserver leur organisation.

Explication

La microscopie optique à transmission permet d’observer directement des cultures cellulaires dans leur récipient, car la lumière traverse les cellules. La microscopie à fluorescence repose sur la sélection de longueurs d’onde et ne décrit pas ce principe de transmission à travers la préparation.