Flashcards : Électrophorèse capillaire et sur gel (54 cartes)

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1Question

Que sépare l’électrophorèse et par quel mécanisme ?

Réponse

Elle sépare des espèces chargées en solution par leur migration sous l’influence d’un champ électrique.

2Question

Où les espèces sont-elles déposées en électrophorèse de zone ?

Réponse

Sur un support.

3Question

Où les espèces sont-elles introduites en électrophorèse capillaire ?

Réponse

Dans un capillaire.

4Question

Dans un gel de polyacrylamide ou d’agarose, où dépose-t-on l’échantillon ?

Réponse

Dans des puits préformés.

5Question

Dans un gel d’électrophorèse, vers quel pôle migrent les molécules chargées ?

Réponse

Vers le pôle de signe opposé.

6Question

Quel effet s’ajoute aux forces électriques lors de l’électrophorèse sur gel ?

Réponse

Une filtration par le gel.

7Question

Quelle est la formule du facteur de retardation RfRf ?

Réponse

Rf=distance parcourue par la moleˊculedistance parcourue par l’eˊtalonRf = \frac{\text{distance parcourue par la molécule}}{\text{distance parcourue par l’étalon}}

8Question

Comment calcule-t-on le champ électrique dans le capillaire ?

Réponse

E=ULE = \frac{U}{L}

9Question

Qu’est-ce que la migration électrophorétique ?

Réponse

Le déplacement d’une molécule chargée dans un électrolyte immobile sous l’action d’un champ électrique, vers l’électrode de signe opposé.

10Question

Comment calcule-t-on la mobilité électrophorétique ?

Réponse

μe=veE\mu_e = \frac{v_e}{E}

11Question

Qu’est-ce que le flux électro-osmotique ?

Réponse

L’écoulement de l’électrolyte dans le capillaire sous l’effet du champ électrique.

12Question

Que deviennent les groupements silanols de la silice à pH supérieur à 2 ?

Réponse

Ils sont déprotonés et forment une couche anionique fixe qui attire les cations de l’électrolyte.

13Question

Quelle formule définit la mobilité apparente en électrophorèse capillaire ?

Réponse

μapp=vappE\mu_{app} = \frac{v_{app}}{E}

14Question

Comment calcule-t-on la mobilité électrophorétique à partir des mobilités apparente et électro-osmotique ?

Réponse

μe=μapp−μos\mu_e = \mu_{app} - \mu_{os}

15Question

Sur quelle grandeur repose l’identification en électrophorèse capillaire ?

Réponse

Sur la mobilité électrophorétique calculée.

16Question

Que sépare la chromatographie électrocinétique micellaire et sur quelle propriété repose-t-elle ?

Réponse

Elle sépare des molécules neutres selon leur hydrophobicité et leur partage entre phase aqueuse et micelles chargées.

17Question

Quelle condition de concentration permet au tensioactif de former des micelles ?

Réponse

Sa concentration doit dépasser la concentration micellaire critique (CMC).

18Question

À pH supérieur à 5, qu’entraîne le flux électro-osmotique malgré la migration électrophorétique des micelles de SDS ?

Réponse

Il entraîne les micelles de SDS vers la cathode, malgré leur migration électrophorétique vers l’anode.

19Question

Entre quelles phases les analytes neutres se partagent-ils dynamiquement en CEM ?

Réponse

Entre la phase aqueuse et le cœur hydrophobe des micelles, qui forment une pseudo-phase stationnaire mobile.

20Question

Comment l’hydrophobicité influence-t-elle le séjour micellaire et la migration en CEM ?

Réponse

Un composé plus hydrophobe séjourne davantage dans les micelles et migre plus lentement.

21Question

En quoi consiste l’injection hydrostatique dans un capillaire ?

Réponse

Plonger une extrémité dans l’échantillon et provoquer une aspiration à l’autre extrémité.

22Question

Comment peut-on renforcer l’aspiration lors d’une injection hydrostatique ?

Réponse

En pressurisant le pilulier de quelques mbar.

23Question

Quels éléments distinguent les supports et migrations de l’électrophorèse capillaire et sur plaque ?

Réponse

La capillaire utilise un capillaire de silice et combine migration électrophorétique et flux osmotique ; la méthode sur plaque utilise un gel d’agarose et repose sur la migration électrophorétique.

24Question

En électrophorèse capillaire, vers quelle électrode migrent les cations et les anions ?

Réponse

Vers la cathode, sous l’effet du flux électro-osmotique.

25Question

Sur plaque, vers quelles électrodes migrent les cations et les anions ?

Réponse

Les cations vont vers la cathode et les anions vers l’anode.

26Question

Que relie le support ou le capillaire d’un dispositif électrophorétique ?

Réponse

Deux réservoirs d’électrolyte tampon équipés chacun d’une électrode.

27Question

Quelle différence de potentiel peut atteindre un dispositif électrophorétique ?

Réponse

30 kV.

28Question

De quels facteurs dépend la vitesse de migration des espèces en électrophorèse ?

Réponse

De leur charge et de leur taille.

29Question

Quel système peut détecter les espèces après leur migration électrophorétique ?

Réponse

Un système UV.

30Question

Quels types de molécules l’électrophorèse sur gel peut-elle séparer ?

Réponse

Des polypeptides, des oligonucléotides et des mono- ou polysaccharides.

31Question

Comment détecter directement des molécules séparées sur gel ?

Réponse

Dans l’UV ou le visible.

32Question

Quel produit la ninhydrine forme-t-elle pour révéler des molécules sur gel ?

Réponse

Le violet de Ruhemann, qui absorbe dans l’UV.

33Question

Que peut mesurer un densitomètre sur un gel ?

Réponse

L’intensité des bandes, fournissant des informations quantitatives.

34Question

Quel tube remplace la plaque de gel en électrophorèse capillaire ?

Réponse

Un tube de silice de 30 à 100 μm de diamètre et de 30 cm à 1 m de longueur, placé dans une enceinte réfrigérée.

35Question

Quelle force électrique agit sur une particule chargée ?

Réponse

F=qEF = qE

36Question

Quels facteurs augmentent la vitesse électrophorétique d’une molécule ?

Réponse

Une charge plus grande ou une taille plus petite.

37Question

Comment obtient-on les vitesses apparente et électro-osmotique en électrophorèse capillaire ?

Réponse

On divise la longueur entre l’extrémité du capillaire et le détecteur par le temps d’arrivée correspondant.

38Question

Quel détecteur mesure les molécules en électrophorèse capillaire ?

Réponse

Un détecteur UV-Vis à longueur d’onde fixe, choisie selon l’absorption des molécules.

39Question

Où le détecteur UV-Vis observe-t-il les molécules dans le capillaire ?

Réponse

À une fenêtre où la gaine protectrice du capillaire est retirée.

40Question

À quoi correspondent les temps de migration de l’électrophorégramme ?

Réponse

Au temps électro-osmotique pour une molécule neutre ou au temps apparent pour une molécule chargée.

41Question

Comment réalise-t-on l’étalonnage externe en électrophorèse capillaire ?

Réponse

On relie l’aire des pics à la concentration.

42Question

Quelle structure et quelle charge de surface caractérisent les micelles de SDS ?

Réponse

Elles sont sphériques, chargées négativement en surface et possèdent un cœur hydrophobe.

43Question

Quelle structure et quelle charge de surface caractérisent les micelles de CTAB ?

Réponse

Elles sont sphériques, chargées positivement en surface et possèdent un cœur hydrophobe.

44Question

Quelles molécules la CEM permet-elle notamment de doser ou de suivre ?

Réponse

Des phénols, des alkylphénols, des pesticides neutres et des parabènes.

45Question

Quelle relation donne le débit volumique aspiré par pression dans un capillaire ?

Réponse

Q=πdc4ΔP0128ηLQ = \frac{\pi d_c^4 \Delta P_0}{128\eta L}

46Question

Quel volume est aspiré en cinq secondes avec les paramètres d’injection donnés ?

Réponse

21,8 nL.

47Question

Quelle formule donne le volume intérieur d’un capillaire ?

Réponse

V=π4dc2LV = \frac{\pi}{4}d_c^2L

48Question

Quel est le volume intérieur d’un capillaire de 61,5 cm sur 75 × 10⁻⁴ cm ?

Réponse

2,7 μL.

49Question

Quelle formule donne le temps de rinçage d’un volume de capillaire ?

Réponse

t=32ηL2dc2ΔP0t = \frac{32\eta L^2}{d_c^2\Delta P_0}

50Question

Combien dure le rinçage d’un volume de capillaire sous 20 psi ?

Réponse

15,6 s.

51Question

Quelle différence de potentiel est indiquée pour chaque électrophorèse ?

Réponse

30 000 V en capillaire et 30 V sur plaque.

52Question

Quel temps d’analyse est indiqué pour chaque électrophorèse ?

Réponse

10 min en capillaire et 60 min ou plus sur plaque.

53Question

Quels types de détection et de mesure permet l’électrophorèse capillaire ?

Réponse

Une détection UV-Vis et des mesures qualitatives et quantitatives.

54Question

Quels types de détection et de mesure offre l’électrophorèse sur plaque ?

Réponse

Une détection visuelle directe ou par complexation et une mesure qualitative.

Teste-toi avec le QCM

Teste tes connaissances avec un QCM de 20 questions sur Électrophorèse capillaire et sur gel.

1. Quel phénomène permet à l’électrophorèse de séparer des espèces chargées en solution ?

2. Dans un laboratoire, une méthode dépose les espèces sur un support, tandis qu’une autre les introduit dans un tube capillaire. Comment distinguer ces deux méthodes ?

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