★ À maîtriser
📌 Plus la valeur de la résolution est petite, plus le microscope est performant et plus son pouvoir de résolution est élevé.
Compléments
L’ordre croissant des unités de longueur est:
Un grossissement ×1000 signifie que l’objet réel est agrandi 1000 fois lors de l’observation.
Résolution : distinguer deux points ; grossissement : agrandir l’image
★ À maîtriser
Le microscope optique classique utilise des photons provenant d’une source lumineuse et des lentilles en verre; mis au point en 1595 par Janssen et perfectionné en 1665 par Robert Hooke, il atteint une résolution de 200 nm et permet d’observer les cellules et leurs principaux constituants.
La microscopie optique à fluorescence repose sur l’émission d’une radiation lumineuse par une molécule éclairée avec des radiations qu’elle peut absorber; mise au point en 1908 par August Köhler et Henry Siedentopf, elle atteint une résolution de 200 nm et permet d’observer des organites et des molécules se déplaçant dans la cellule.
La nanosocopie localise des molécules fluorescentes individuelles en les faisant clignoter les unes après les autres, puis reconstruit l’image finale avec l’ensemble des molécules localisées.
Compléments
Optique classique → fluorescence → nanosocopie
★ À maîtriser
Le microscope électronique à transmission utilise des électrons à la place des photons; les électrons traversent l’échantillon, sont focalisés par des lentilles électromagnétiques et forment une image observée sur un écran. — Max Knoll, 1931
Le microscope électronique à balayage utilise un faisceau d’électrons qui balaie un échantillon préalablement recouvert d’une fine couche de métal. — Manfred von Ardenne, 1937
Le MET a été mis au point en 1931 par Max Knoll, atteint une résolution de 0,1 nm et permet d’observer en 2D la sinuosité de la membrane plasmique, les vésicules proches de la membrane plasmique, ainsi que les pores nucléaires et les molécules qui les traversent.
Compléments
📌 Le pouvoir de résolution est proportionnel à la longueur d’onde du rayonnement.
MET : électrons traversants et image 2D ; MEB : faisceau balayeur et image 3D
| Microscope | Technique | Résolution et structures observables |
|---|---|---|
| Optique classique | Photons et lentilles en verre | 200 nm; cellules et principaux constituants |
| Optique à fluorescence | Émission lumineuse de molécules éclairées | 200 nm; organites et molécules mobiles |
| Nanoscope | Clignotement successif de molécules fluorescentes puis reconstruction | 20 nm; molécules |
| Microscope | Technique | Résolution et observation |
|---|---|---|
| MET | Les électrons traversent l’échantillon | 0,1 nm; observation en 2D |
| MEB | Un faisceau d’électrons balaie un échantillon métallisé | 1 nm; observation en 3D |
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