QCM : Microscopie et techniques cellulaires (8 questions)

Questions et réponses du QCM

1. Une équipe suit des cellules vivantes sans colorant absorbant la lumière. Concernant les observations permises par le contraste de phase :

Elle permet d’observer les cellules vivantes en examinant les seuls contours cellulaires.
Elle permet de suivre les mouvements cellulaires au cours de l’observation.
Elle convient à des préparations qui introduisent des différences de chemin optique.
Elle est adaptée aux préparations qui absorbent la lumière sans modifier son chemin optique.
Cette méthode permet d’observer la structure du noyau dans des cellules vivantes.

Elle permet de suivre les mouvements cellulaires au cours de l’observation. · Elle convient à des préparations qui introduisent des différences de chemin optique. · Cette méthode permet d’observer la structure du noyau dans des cellules vivantes.

Explication

Le contraste de phase permet d’étudier des cellules vivantes, notamment leur noyau et leurs mouvements. Il convient aux préparations qui n’absorbent pas la lumière mais créent des différences de chemin optique; l’absorption lumineuse et la restriction aux contours ne correspondent pas aux caractéristiques indiquées.

2. Lors du réglage d’un microscope à fluorescence, quel trajet et quel aspect de l’image faut-il attendre ?

Le verre de quartz des éléments traversés transmet les ultraviolets, contrairement au verre ordinaire.
Les zones fluorescentes apparaissent illuminées sur un fond sombre.
Le filtre d’excitation sélectionne les ultraviolets destinés à exciter le fluorochrome.
Le verre ordinaire transmet les ultraviolets, tandis que le verre de quartz les absorbe.
Le filtre de barrage sélectionne les ultraviolets incidents pour exciter le fluorochrome.

Le verre de quartz des éléments traversés transmet les ultraviolets, contrairement au verre ordinaire. · Les zones fluorescentes apparaissent illuminées sur un fond sombre. · Le filtre d’excitation sélectionne les ultraviolets destinés à exciter le fluorochrome.

Explication

Le filtre d’excitation sélectionne la lumière qui excite le fluorochrome, tandis que le quartz transmet les ultraviolets et que le verre ordinaire les absorbe. Les zones fluorescentes se détachent sur un fond sombre; le filtre de barrage assure une autre fonction, celle de bloquer la lumière de la source et de laisser passer la fluorescence émise.

3. Que désigne l’examen par réflexion lors de la formation d’une image fluorescente ?

L’observation des zones fluorescentes en les comparant aux zones sans fluorescence
L’excitation de toute l’épaisseur d’une préparation transparente par un faisceau transmis
L’excitation de la surface de la préparation par illumination depuis le dessus avec l’objectif
L’identification de la structure par absorption de la lumière visible polychromatique

L’excitation de la surface de la préparation par illumination depuis le dessus avec l’objectif

Explication

En réflexion, la fluorescence est induite à la surface de la préparation, éclairée depuis le dessus au moyen de l’objectif. L’excitation de toute la masse correspond au mode par transmission, qui exige une préparation traversable par la lumière.

4. Après avoir éteint la lampe d’un microscope à fluorescence, combien de temps faut-il attendre avant de la rallumer ?

Environ deux heures, pour laisser la lampe refroidir
Au moins trente minutes, pour refroidir l’objectif
Au moins quinze minutes, pour laisser la lampe refroidir
Environ une heure, pour stabiliser les filtres

Environ deux heures, pour laisser la lampe refroidir

Explication

La lampe doit refroidir environ deux heures après son extinction avant d’être rallumée. Le délai d’au moins quinze minutes concerne l’attente après l’allumage, avant de commencer l’observation.

5. Dans le fractionnement différentiel d’un homogénat de foie, quel est le rôle de la centrifugation à 600 g pendant 10 minutes ?

Concentrer dans le premier culot les constituants solubles du cytosol
Séparer dans le premier culot les noyaux, les cellules et les débris du surnageant
Isoler dans le premier culot les microsomes après clarification de l’homogénat
Récupérer dans le premier culot les mitochondries, les lysosomes et les peroxysomes

Séparer dans le premier culot les noyaux, les cellules et les débris du surnageant

Explication

Cette première centrifugation forme un culot contenant les noyaux, des cellules et des débris, tandis que les autres constituants restent dans le surnageant. Les mitochondries, les lysosomes et les peroxysomes sont récupérés dans le culot d’une centrifugation ultérieure à 10 000 g.

6. En quoi le rôle du SDS dans la préparation de l’ADN génomique diffère-t-il de celui du broyage éventuel des tissus ?

Le SDS sépare les chromosomes du cytoplasme, tandis que le broyage dissout les bicouches membranaires.
Le SDS fragmente mécaniquement les tissus, tandis que le broyage dénature les protéines associées à l’ADN.
Le SDS disperse les bicouches membranaires et dénature les protéines, tandis que le broyage aide à désagréger les tissus.
Le SDS précipite l’ADN libéré, tandis que le broyage élimine les lipides des membranes.

Le SDS disperse les bicouches membranaires et dénature les protéines, tandis que le broyage aide à désagréger les tissus.

Explication

Le SDS est un détergent qui disperse les bicouches lipidiques et dénature notamment les protéines associées à l’ADN. Le broyage, lorsqu’il est utilisé, contribue à désagréger les tissus plutôt qu’à dénaturer ces protéines.

7. Pourquoi le contraste de phase permet-il d’observer des préparations qui n’absorbent pas la lumière ?

Parce que ces préparations absorbent sélectivement certaines longueurs d’onde visibles.
Parce que ces préparations réfléchissent les rayons lumineux vers l’objectif.
Parce que ces préparations émettent une lumière visible après avoir absorbé les ultraviolets.
Parce que ces préparations produisent des différences de chemin optique dans les rayons lumineux.

Parce que ces préparations produisent des différences de chemin optique dans les rayons lumineux.

Explication

Les différences de chemin optique introduites par la préparation permettent de créer un contraste même en l’absence d’absorption de la lumière. La réflexion vers l’objectif caractérise plutôt un mode d’examen en fluorescence.

8. Pour repérer une structure cellulaire à l’aide d’un fluorochrome associé à un anticorps, quelle propriété permet à ce dispositif de cibler cette structure ?

Le fluorochrome se fixe à la structure et l’anticorps filtre la lumière ultraviolette.
L’anticorps se fixe à la structure et le fluorochrome émet de la lumière après excitation.
Le fluorochrome dénature les protéines de la structure et l’anticorps révèle cette transformation.
L’anticorps absorbe la lumière émise et le fluorochrome dirige les rayons vers l’oculaire.

L’anticorps se fixe à la structure et le fluorochrome émet de la lumière après excitation.

Explication

L’anticorps reconnaît la structure grâce à son affinité, tandis que le fluorochrome associé fluoresce lorsqu’il est excité. Un fluorochrome peut aussi avoir une affinité propre pour certaines structures, mais ce n’est pas ici le rôle de l’anticorps.

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Quelles structures et activités cellulaires la microscopie à contraste de phase permet-elle d’observer ?

Le noyau, les organites cytoplasmiques, la division et les mouvements cellulaires.

À quelles préparations la microscopie à contraste de phase convient-elle ?

Aux préparations qui n’absorbent pas la lumière, mais créent des différences de chemin optique.

Qu’émet une molécule fluorescente en revenant à son état fondamental ?

Un rayonnement moins énergétique et de plus grande longueur d’onde.

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