Qu'assure un milieu de culture animale in vitro ?
La nutrition et le support des cellules.
Quelles conditions un milieu de culture animale in vitro doit-il maintenir ?
Le pH et l’osmolarité.
Quelle exigence de stérilité doit respecter un milieu de culture animale in vitro ?
Il doit être stérile.
De quoi sont généralement constitués les milieux de culture animale ?
D’une base minimale et d’un additif complexe, le sérum.
Qu'est-ce qu'une base minimale en culture cellulaire ?
Un milieu synthétique de composition parfaitement maîtrisée contenant les éléments indispensables.
Quels minéraux sont indispensables dans une base minimale ?
Le sodium, potassium, calcium, magnésium, phosphate, carbonate et chlore.
À quoi participent les minéraux dans la base minimale ?
Au maintien de la pression osmotique, transports membranaires, métabolisme, réactions enzymatiques et attachement cellulaire.
Quelle est la concentration habituelle du D-glucose dans la base minimale ?
1 g.L⁻¹, correspondant à la concentration physiologique du sang humain.
Combien d'acides aminés indispensables contient la base minimale ?
12 acides aminés indispensables.
Quelle particularité a la L-glutamine dans la base minimale ?
Elle est très instable à 37 °C et doit être ajoutée extemporanément.
Combien de vitamines indispensables contient la base minimale ?
8 vitamines indispensables.
Citez trois vitamines indispensables dans la base minimale.
Choline, acide folique et pyridoxal.
Qu'est-ce que le sérum en culture cellulaire ?
Un additif complexe, incomplètement défini, indispensable à la plupart des cellules.
Quels éléments le sérum apporte-t-il pour stimuler la croissance cellulaire ?
Des facteurs de croissance, oligoéléments, vitamines et hormones.
Comment le sérum favorise-t-il l'adhérence des cellules ?
Par des facteurs d'ancrage comme la fibronectine.
Quelle est une autre action du sérum sur les cellules en culture ?
Il stimule leur prolifération et inhibe la trypsine.
Quels risques présentent les sérums animaux ?
Ils peuvent être contaminés par des virus ou des mycoplasmes.
Pourquoi le pouvoir prolifératif des sérums animaux varie-t-il ?
À cause des concentrations variables en hormones et facteurs de croissance selon les lots.
Qu'est-ce qu'un milieu totalement défini en culture cellulaire ?
Un milieu synthétique sans sérum à composition rigoureusement connue.
Quelle est la limite d'usage d'un milieu totalement défini ?
Son usage reste limité à très peu de lignées cellulaires.
Qu'est-ce que le DMEM en culture cellulaire ?
Un milieu essentiel minimum de Dulbecco contenant acides aminés, vitamines, glucose, sels minéraux et rouge de phénol.
Par quoi le DMEM est-il complété extemporanément ?
Par 10 % de sérum de veau fœtal.
Que fournit le sérum de veau fœtal ajouté au DMEM ?
Des protéines, acides gras, facteurs d’adhésion, facteurs de croissance et inhibiteurs.
Quelles antibiotiques peut contenir le DMEM ?
La pénicilline à 100 U.mL-1 et la streptomycine à 100 μg.mL-1.
À quelle concentration la pénicilline est-elle ajoutée au DMEM ?
À 100 unités par millilitre (100 U.mL-1).
À quelle concentration la streptomycine est-elle ajoutée au DMEM ?
À 100 microgrammes par millilitre (100 μg.mL-1).
Quel antifongique peut être ajouté au DMEM ?
La Fungizone.
À quelle concentration la Fungizone est-elle ajoutée au DMEM ?
À 2,5 microgrammes par millilitre (2,5 μg.mL-1).
Quelles sont les sources possibles de contaminations microbiennes en culture cellulaire ?
Le sérum, le milieu, les réactifs, les cellules, l’air, l’eau, les mains et le matériel de culture.
Pourquoi la contamination par les mycoplasmes est-elle particulièrement problématique ?
Parce que ces bactéries sans paroi modifient la croissance, la viabilité, les chromosomes et l’expression phénotypique des cellules.
Quelles sont les dimensions des mycoplasmes responsables de contaminations ?
Ils mesurent entre 0,1 et 0,3 μm.
Combien de temps les mycoplasmes déshydratés restent-ils viables ?
Ils restent viables pendant 7 à 10 jours.
Quels objets peuvent être contaminés par les mycoplasmes malgré une bonne asepsie ?
La verrerie, les mains et la surface de travail.
Sur quoi repose la prévention des contaminations en culture cellulaire ?
Sur le test et traitement des cellules reçues, la désinfection des surfaces, le nettoyage régulier et l’absence de mouchage ou toux devant la hotte.
Comment détecte-t-on les mycoplasmes en culture cellulaire ?
Par DAPI, fluorochrome de Hoechst ou PCR.
De quoi dépend l’efficacité du traitement des mycoplasmes ?
De la lignée cellulaire.
À quelle température est maintenue la culture dans une étuve ?
À 37 °C.
Entre quelles valeurs doit être le pH du milieu de culture ?
Entre 7,2 et 7,4.
Quelle couleur prend le rouge de phénol en milieu acide ?
Il devient jaune.
Quelle est la formule chimique de l'équilibre du système tampon minéral ?
et .
Pourquoi le système tampon minéral est-il en équilibre avec 5 % de CO2 ?
Pour limiter l’acidification ou l’alcalinisation du milieu.
Quels gaz composent l’atmosphère de culture ?
Azote, oxygène à 21 %, CO2 à 5 %, et vapeur d’eau.
Quelle pression partielle d’oxygène est présente dans l’atmosphère de culture ?
21 % de pression partielle d’oxygène.
Pourquoi l’humidité de l’air est-elle maintenue entre 84 et 85 % ?
Pour prévenir l’évaporation et l’augmentation de l’osmolarité du milieu.
Teste tes connaissances avec un QCM de 19 questions sur Milieux de culture animale in vitro.
1. Quelle condition est requise pour qu’un milieu de culture animale soutienne correctement des cellules in vitro ?
2. Comment les milieux de culture animale sont-ils généralement constitués ?
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