Fiche de révision : Préparation d’un milieu de culture

📋 Plan du Cours

1. Matériel requis
2. Consignes de sécurité
3. Pesée de la gélose
4. Mesure de l’eau distillée
5. Mélange et coulage stérile

📖 1. Matériel requis

📝 Points essentiels

• Le matériel requis comprend: une balance de précision au 0,01 g près, une casserole ou un récipient résistant à la chaleur, une éprouvette graduée d’au moins 50 mL, une plaque chauffante, un agitateur en verre, de la poudre de gélose ou agar-agar, de l’eau distillée

📖 2. Consignes de sécurité

★ À maîtriser

📌 Le port de la blouse de chimie et des lunettes est obligatoire pendant la préparation du milieu de culture.

📌 La plaque chauffante doit être manipulée avec précaution en raison des risques de brûlure.

Compléments

📌 Une pince ou des gants isolants doivent être utilisés pour déplacer le récipient chaud.

📌 Le liquide ne doit pas être porté à une ébullition vive et non contrôlée.

💡 Astuce mémo

Plaque chaude → risque de brûlure → pince ou gants isolants

📖 3. Pesée de la gélose

★ À maîtriser

• La pesée de la poudre consiste à poser une casserole propre et sèche sur la balance, à effectuer la tare, puis à ajouter la poudre avec une spatule jusqu’à obtenir la masse voulue.

Compléments

• Un exemple de masse voulue pour la poudre de gélose est 10,45 g.

💡 Astuce mémo

Poser, tarer, prélever, peser

📖 4. Mesure de l’eau distillée

★ À maîtriser

• La mesure de l’eau consiste à la verser dans l’éprouvette graduée, à ajuster son niveau au trait de jauge désiré et à placer l’œil face au ménisque pour éviter les erreurs de parallaxe.

Compléments

• Un exemple de volume d’eau distillée à mesurer est 50 mL.

💡 Astuce mémo

L’œil face au ménisque, comme une ligne de visée horizontale

📖 5. Mélange et coulage stérile

📝 Points essentiels

• Le mélange consiste à verser l’eau mesurée sur la poudre dans la casserole, puis à chauffer et agiter jusqu’à dissolution complète et obtention d’un mélange fluide et homogène avant le coulage.

📌 Lorsque la gélose est parfaitement dissoute et légèrement refroidie autour de 45–50 °C, le milieu doit être coulé immédiatement dans des boîtes de Petri stériles à proximité d’un bec Bunsen afin de maintenir un environnement stérile.

💡 Astuce mémo

Verser, chauffer, agiter, refroidir, couler