QCM : Techniques de séparation et d'extraction biologiques — 20 questions

Questions et réponses du QCM

1. Que désigne le terme « lysat » après une désintégration cellulaire ?

La membrane plasmique intacte après traitement
Le mélange des composants cellulaires libérés dans le tampon
Le noyau isolé après centrifugation
Le solvant utilisé pour rompre les cellules

Le mélange des composants cellulaires libérés dans le tampon

Explication

Le lysat est le mélange obtenu après la rupture des cellules, avec leurs composants libérés dans le tampon. Il ne s’agit pas de la membrane intacte ni du solvant seul.

2. Quel est l’objectif principal de la désintégration cellulaire ?

Faire migrer les molécules dans un gradient de densité
Séparer uniquement les protéines selon leur charge
Retenir les petites molécules à travers une membrane
Rompre les structures cellulaires pour libérer les substances recherchées

Rompre les structures cellulaires pour libérer les substances recherchées

Explication

La désintégration cellulaire vise à casser les structures cellulaires afin de libérer les molécules d’intérêt. Les autres propositions décrivent d’autres techniques comme la centrifugation ou la dialyse.

3. Lequel des procédés suivants est une méthode physique de lyse cellulaire ?

L’ultrasonication
Le choc osmotique
La lyse enzymatique
La modification du pH

L’ultrasonication

Explication

L’ultrasonication fait partie des méthodes physiques, car elle repose sur une action mécanique/physique. Le choc osmotique, le pH et la lyse enzymatique relèvent des méthodes chimiques.

4. Quel appareil est cité comme broyeuse mécanique pour la lyse physique des cellules ?

La colonne échangeuse d’ions
La membrane de cellulose
L’homogénéisateur de Dounce
L’ultracentrifugeuse

L’homogénéisateur de Dounce

Explication

L’homogénéisateur de Dounce est un broyeur mécanique utilisé pour la lyse physique. Les autres éléments appartiennent à d’autres techniques de séparation ou de purification.

5. Quel procédé relève des méthodes chimiques de lyse cellulaire ?

Le choc osmotique
Les billes de verre
Les cycles congélation–décongélation
La sonication

Le choc osmotique

Explication

Le choc osmotique est une méthode chimique de lyse. Les autres choix sont des méthodes physiques de rupture des cellules.

6. Quel est le principe général d’une lyse chimique ?

Rompre la cellule sans action mécanique directe
Compacter un gradient de densité sous vide
Faire sédimenter les particules selon leur taille
Séparer des molécules par diffusion à travers une membrane

Rompre la cellule sans action mécanique directe

Explication

La lyse chimique repose sur des agents comme des détergents, des enzymes ou des variations de pH/force ionique, sans action mécanique directe. Les autres réponses décrivent d’autres méthodes de séparation.

7. Quelle définition correspond le mieux à la force centrifuge relative (RCF) ?

La densité du milieu de séparation
Le diamètre du rotor
Une force exprimée par rapport à la gravité terrestre
La vitesse de rotation en tours par minute

Une force exprimée par rapport à la gravité terrestre

Explication

La RCF compare la force appliquée aux particules à la gravité terrestre et s’exprime en xg. Elle ne correspond pas à la vitesse en rpm.

8. Dans une centrifugation, de quoi dépend notamment l’intensité de la force centrifuge ?

De la distance à l’axe et de la vitesse de rotation
De la concentration en sel uniquement
De la couleur du tube et du volume du tampon
Du type de membrane et du pH du milieu

De la distance à l’axe et de la vitesse de rotation

Explication

La force centrifuge dépend de la distance r à l’axe et de la vitesse de rotation, via un terme en ω². Les autres propositions ne déterminent pas cette force.

9. Quelle caractéristique correspond à une ultracentrifugeuse ?

Des accélérations très élevées avec fonctionnement sous vide
Une utilisation sans aucune réfrigération
Une vitesse maximale inférieure à 5000 rpm
Une capacité limitée à 2 ml par tube à température ambiante

Des accélérations très élevées avec fonctionnement sous vide

Explication

L’ultracentrifugeuse est conçue pour de très fortes accélérations, fonctionne sous vide et est réfrigérée. Les autres choix décrivent plutôt des centrifugeuses de paillasse ou à basse vitesse.

10. Pourquoi faut-il équilibrer correctement le rotor d’une centrifugeuse ?

Pour améliorer la diffusion des petites molécules
Pour faire traverser les molécules à travers une membrane
Pour éviter un mauvais alignement et une séparation incorrecte
Pour augmenter la polarité du tampon

Pour éviter un mauvais alignement et une séparation incorrecte

Explication

Un rotor mal équilibré peut entraîner une mauvaise séparation et même un désalignement avec risque de casse. L’équilibrage est donc essentiel pour un fonctionnement correct.

11. Sur quoi repose principalement la centrifugation différentielle ?

Sur leur charge électrique uniquement
Sur leur solubilité dans l’alcool
Sur leur passage à travers une membrane
Sur la taille des particules

Sur la taille des particules

Explication

La centrifugation différentielle sépare surtout les particules selon leur taille. Elle ne repose pas principalement sur une membrane, un solvant ou la charge.

12. Dans une centrifugation sur gradient de densité, que se passe-t-il quand une particule atteint sa densité propre ?

Elle s’arrête à ce niveau du gradient
Elle traverse tout le tube sans s’arrêter
Elle se fixe sur la paroi du tube
Elle devient soluble dans le milieu

Elle s’arrête à ce niveau du gradient

Explication

Dans un gradient de densité, les particules migrent jusqu’au niveau où leur densité égale celle du milieu, puis s’y stabilisent. Elles ne traversent pas tout le tube.

13. Quel est le rôle principal de la dialyse dans une séparation ?

Rompre directement la membrane plasmique
Laisser diffuser les petites molécules à travers une membrane
Augmenter la densité du milieu par rotation
Faire sédimenter les particules les plus lourdes

Laisser diffuser les petites molécules à travers une membrane

Explication

La dialyse permet aux petites molécules de traverser une membrane semi-perméable alors que les grosses sont retenues. Elle ne fonctionne pas par sédimentation ni par lyse.

14. Quel principe explique que les grosses molécules restent majoritairement dans le compartiment initial lors d’une dialyse ?

La force centrifuge relative
La précipitation au sulfate d’ammonium
L’exclusion de taille
La centrifugation différentielle

L’exclusion de taille

Explication

L’exclusion de taille permet à la membrane de laisser passer préférentiellement les petites molécules. Les grosses molécules sont donc retenues dans le compartiment d’origine.

15. Quel critère guide principalement le choix d’un solvant pour une extraction ?

La taille des particules du lysat
Le type de membrane utilisée
La polarité de la molécule à extraire
La vitesse de rotation du rotor

La polarité de la molécule à extraire

Explication

Le choix du solvant dépend surtout de la polarité de la molécule à extraire. Les autres critères concernent d’autres techniques comme la centrifugation ou la dialyse.

16. Quel énoncé décrit correctement le rôle d’un alcool lors de la précipitation des acides nucléiques ?

Il sert à créer un gradient de densité continu
Il augmente la vitesse de diffusion à travers la membrane
Il réduit la solubilité après neutralisation par un sel
Il remplace le rotor dans la séparation

Il réduit la solubilité après neutralisation par un sel

Explication

Après ajout d’un sel neutralisant, l’alcool comme l’éthanol ou l’isopropanol diminue la solubilité des acides nucléiques et favorise leur précipitation. Il n’a pas de rôle dans la création d’un gradient de densité.

17. Pourquoi l’infusion donne-t-elle souvent un meilleur rendement que la macération ?

Parce qu’elle élimine l’étape de diffusion
Parce qu’elle utilise une membrane de MWCO faible
Parce qu’elle se fait à température plus élevée
Parce qu’elle réduit la taille des particules par centrifugation

Parce qu’elle se fait à température plus élevée

Explication

L’infusion améliore souvent le rendement grâce à la température élevée, qui favorise le transfert des composés. En revanche, elle n’est pas adaptée aux molécules thermolabiles.

18. Quel facteur augmente le rendement d’une extraction solide-liquide ?

Une baisse de la température
Un ratio liquide/solide plus faible
Un broyage plus fin du solide
Une diminution de la surface de contact

Un broyage plus fin du solide

Explication

Un solide plus finement broyé présente une plus grande surface de contact avec le solvant, ce qui augmente le rendement. Un ratio liquide/solide plus élevé et une température plus élevée favorisent aussi l’extraction.

19. Quel sel est utilisé pour neutraliser les charges des acides nucléiques avant leur précipitation ?

Le chlorure de potassium
L’acétate de sodium
Le chlorure de césium
Le sulfate d’ammonium

L’acétate de sodium

Explication

L’acétate de sodium à 0,3 M est cité comme sel neutralisant avant précipitation des acides nucléiques. Le sulfate d’ammonium est plutôt associé à la précipitation des protéines.

20. Que signifie le terme « salting out » pour une protéine ?

Sa séparation selon la taille des particules
Son passage à travers une membrane de dialyse
L’augmentation de sa solubilité à faible concentration en sel
La diminution de sa solubilité à forte concentration en sel

La diminution de sa solubilité à forte concentration en sel

Explication

Le salting out correspond à la baisse de solubilité quand la concentration en sel devient élevée, ce qui favorise la précipitation. Le salting in décrit au contraire l’augmentation de solubilité à faible sel.

Révisez avec les flashcards

Mémorisez les réponses avec 20 flashcards sur Techniques de séparation et d'extraction biologiques.

Désintégration cellulaire — définition ?

Rupture de la membrane ou paroi pour libérer le contenu.

Lyse cellulaire — rôle ?

Libérer composants cellulaires dans un tampon.

Tampon de lyse — composition ?

pH et force ionique contrôlés.

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Consultez la fiche de révision complète sur Techniques de séparation et d'extraction biologiques.

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