Fiche de révision : Techniques d’étude de la cellule vivante

📋 Plan du Cours

1. Prélèvement des cellules
2. Colorations cellulaires
3. Séparation des constituants cellulaires
4. Traçage des molécules cellulaires
5. Microscopes optique et électronique

📖 1. Prélèvement des cellules

🔑 Notions clés & Définitions

• Cytologie : Étude microscopique des cellules des différentes organisations tissulaires.
• Frottis : Étalement sur une lame de verre d’un liquide ou de cellules prélevées par raclage à la surface de certaines muqueuses.
• Ponction : Méthode utilisée pour prélever des substances liquides dans un organisme vivant, généralement à l’aide de seringues.
• Résection : Retrait chirurgical d’une partie d’organe ou d’un tissu pathologique, comme une tumeur.
• Biopsie : Prélèvement d’un fragment de tissu ou d’organe dans un organisme vivant.

📝 Points essentiels

• Une ponction peut prélever du liquide ou du tissu dans une cavité à l’aide d’une seringue à des fins d’analyse.

• La prostatectomie est un exemple de résection de la prostate.

• Des frottis peuvent être obtenus après des prélèvements réalisés avec divers instruments, dont les écouvillons.

• La résection peut aussi être appelée ablation, et le suffixe « ectomie » désigne une opération consistant à réséquer.

📖 2. Colorations cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Coloration vitale : Réalisée sur des tissus qui restent vivants durant l’étude.

★ À maîtriser

• Dans la coloration au vert de méthyle et à la pyronine, le vert de méthyle colore l’ADN en vert et la pyronine colore l’ARN en rose.

• Après coloration, l’ADN se localise dans le noyau, tandis que l’ARN se localise dans le cytoplasme et le nucléole.

• Les colorants vitaux sont des colorants basiques, tandis que les colorants acides sont généralement toxiques et pénètrent très mal dans les tissus.

Compléments

• La coloration de Feulgen localise l’ADN par hydrolyse partielle de l’ADN à l’acide chlorhydrique à 60 °C, puis par réaction du réactif de Schiff avec la fonction aldéhyde des désoxyriboses.

• L’ADNase détruit l’ADN, tandis que l’ARNase détruit l’ARN.

• Le réactif de Schiff colore l’ADN en rose.

• Les colorants vitaux cités colorent les structures suivantes :

  • Le bleu de méthylène colore le noyau des cellules.
  • Le liquide de Lugol colore le noyau des cellules et les membranes.
  • Le rouge neutre colore les vacuoles.
  • Le vert de Janus colore les mitochondries en bleu dans les cellules vivantes.

• Les colorants fixateurs tuent la cellule afin de préserver ses constituants.

💡 Astuce mémo

Colorants vitaux : cellule vivante ; colorants fixateurs : cellule tuée.

📖 3. Séparation des constituants cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Centrifugation : Séparation des différentes structures, ou organites, présentes dans la cellule afin de les analyser.
• Chromatographie : Technique analytique qui sépare les constituants d’un mélange en phase homogène liquide ou gazeuse.

★ À maîtriser

• La centrifugation différentielle sépare les organites après broyage de la cellule, qui rompt les membranes plasmatiques et produit un homogénat cellulaire.

Compléments

• En chromatographie, l’échantillon en solution est déposé sur un point repère du papier, puis le solvant mobile entraîne ses composants à des vitesses variables selon leur solubilité.

• En chromatographie, la phase mobile est le plus souvent un solvant organique ou de l’eau, tandis que la phase stationnaire est constituée d’eau absorbée par le papier ou liée chimiquement.

• Les composés les plus solubles dans l’eau ou formant facilement des associations par liaison hydrogène sont davantage retenus par la phase stationnaire et migrent plus lentement.

📖 4. Traçage des molécules cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Traçage radioactif : Fixation sur une molécule cellulaire d’un signe de reconnaissance identifiable afin de suivre son cheminement dans la cellule.

📝 Points essentiels

• Le traçage radioactif des atomes d’hydrogène et de carbone permet de déterminer les parties cellulaires intervenant dans l’oxydation du glucose, C₆H₁₂O₆.

• Le traçage utilise des éléments radioactifs ou des composés fluorescents, qui émettent de la lumière.

• Les isotopes radioactifs cités sont :

  • ³H
  • ¹⁴C
  • ¹³¹I
  • ³⁵S

📖 5. Microscopes optique et électronique

📝 Points essentiels

• Deux types de microscopes sont distingués : le microscope optique et le microscope électronique.