Fiche de révision : Histologie : techniques et microscopie

📋 Plan du Cours

1. Définitions et échelles histologiques
2. Les quatre tissus fondamentaux
3. Rôles de l’analyse histologique
4. Préparation histologique en paraffine
5. Technique cytologique et colorations
6. Microscopies optique et électronique

📖 1. Définitions et échelles histologiques

🔑 Notions clés & Définitions

• Histologie : Science fondamentale qui analyse et décrit les tissus à l’aide d’un microscope.
• Tissu : Assemblage de cellules et de matrice extracellulaire assurant une même fonction au sein de l’organisme.

★ À maîtriser

📌 L’observation macroscopique examine principalement les organes à l’œil nu, tandis que l’observation microscopique examine l’organisation des cellules au sein des tissus avec un microscope.

Compléments

• L’histologie étudie une échelle située entre celle de la cellule et celle des organes.

💡 Astuce mémo

Macroscopie = organes à l’œil nu ; microscopie = organisation cellulaire des tissus

📖 2. Les quatre tissus fondamentaux

🔑 Notions clés & Définitions

• Tissu épithélial : Uniquement constitué de cellules jointives et séparant deux environnements distincts.
• Tissu conjonctif : Constitué de cellules isolées dans une matrice extracellulaire plus ou moins solide et formant la charpente du corps en remplissant les espaces entre les autres tissus.
• Tissu musculaire : Constitué de cellules capables de se contracter et assurant le mouvement de l’organisme.
• Tissu nerveux : Recevant et faisant circuler les informations venant de l’extérieur ou de l’intérieur du corps grâce notamment aux neurones.

★ À maîtriser

• Les quatre familles de tissus fondamentaux sont:
  • le tissu épithélial
  • le tissu conjonctif
  • le tissu musculaire
  • le tissu nerveux

• La répartition volumique des tissus est de 3 % pour le tissu épithélial, 45 % pour les tissus conjonctifs, 50 % pour les tissus musculaires et 2 % pour le tissu nerveux.

Compléments

• Les tissus conjonctifs comprennent notamment:
  • l’os
  • le sang
  • le cartilage
  • la graisse

💡 Astuce mémo

É-C-M-N : épithélial, conjonctif, musculaire, nerveux

📖 3. Rôles de l’analyse histologique

★ À maîtriser

• Les analyses histologiques servent à connaître les caractéristiques des tissus biologiques et à comprendre le fonctionnement du corps à l’échelle microscopique.

• Les prélèvements analysés comprennent:

  • les biopsies
  • les pièces opératoires
  • les organismes entiers lors des autopsies

Compléments

• En recherche, l’histologie permet de: comprendre le développement de l’organisme et le fonctionnement des organes, comprendre les processus pathologiques, trouver de nouveaux marqueurs, mettre au point de nouvelles thérapies

💡 Astuce mémo

Enseigner → rechercher → diagnostiquer

📖 4. Préparation histologique en paraffine

★ À maîtriser

• 🔄 La technique histologique suit les étapes suivantes:

  1. fixation du prélèvement
  2. macroscopie
  3. mise en cassette
  4. inclusion en paraffine
  5. mise en bloc
  6. coupe du bloc
  7. création de la lame
  8. coloration de la lame

• Le prélèvement est fixé par immersion dans du formol, qui diffuse passivement et provoque la réticulation des protéines empêchant leur autolyse.

📌 La fixation doit commencer dans la demi-heure suivant le prélèvement, et le formol utilisé contient du formaldéhyde à 4 %, de l’éthanol et de l’eau.

• 🔄 L’inclusion en paraffine comprend: la déshydratation dans des bains d’alcool à concentration croissante, le passage dans un bain de xylène, le passage dans de la paraffine liquide à 65 °C

• Le bloc de paraffine est coupé au microtome à environ 4 μm d’épaisseur afin d’obtenir une seule épaisseur de cellules sur la lame.

• La coloration HES comprend:

  • l’hématoxyline
  • l’éosine
  • le safran

• En coloration HES, les noyaux sont violets, le cytoplasme et les bordures cellulaires sont roses, et l’environnement extracellulaire riche en collagène est orange.

Compléments

• L’inclusion en paraffine est l’étape la plus longue de la technique histologique et dure une nuit entière.

💡 Astuce mémo

Fixer → sélectionner → inclure → bloquer → couper → lamer → colorer

📖 5. Technique cytologique et colorations

★ À maîtriser

📌 La technique cytologique étudie des cellules présentes dans un liquide et déposées sur une lame, sans réaliser de coupe, contrairement à la technique histologique qui analyse des tissus coupés.

• Une lame cytologique peut être obtenue par:
  • filtration
  • étalement d’une goutte entre deux lames
  • centrifugation produisant un culot cellulaire

📌 La coloration HES n’est pas adaptée à la cytologie car le safran colore le milieu extracellulaire, absent des lames cytologiques ; l’hématoxyline colore toujours le noyau et le colorant cytoplasmique varie selon l’observation.

Compléments

• Les prélèvements cytologiques comprennent: les urines, les ponctions d’organes, de kystes ou de ganglions, les frottis, les cellules en culture

💡 Astuce mémo

Histologie = tissu coupé ; cytologie = cellules déposées sans coupe

📖 6. Microscopies optique et électronique

🔑 Notions clés & Définitions

• Résolution : Capacité d’un microscope à distinguer deux points ; plus sa valeur est basse, plus la précision est élevée.

★ À maîtriser

📌 Le microscope optique utilise des photons et possède une résolution de l’ordre de 1 μm, tandis que le microscope électronique utilise des électrons et augmente la résolution d’un facteur 1000, jusqu’à l’ordre du nanomètre.

• Avec un oculaire toujours égal à ×10, les grossissements obtenus avec les objectifs ×1, ×2, ×10, ×20, ×40 et ×100 sont respectivement ×10, ×20, ×100, ×200, ×400 et ×1000.

📌 La microscopie électronique à transmission fait traverser l’échantillon par les électrons pour observer des structures intracellulaires, tandis que la microscopie électronique à balayage balaie sa surface pour reconstituer ses reliefs.

Compléments

• En microscopie optique à fond clair, les lames colorées, notamment par HES, sont observées grâce à une source de lumière blanche, des miroirs, une platine, des objectifs et des oculaires.

• En microscopie électronique à transmission, le prélèvement est inclus dans une résine, coupé à quelques dizaines de nanomètres avec un ultramicrotome, placé sur une grille et contrasté sans coloration.

• La microscopie à fond clair numérique remplace l’observation directe par une image captée par une caméra et visualisée sur ordinateur, ce qui facilite la pathologie digitale, l’utilisation de l’intelligence artificielle et les échanges entre médecins.

💡 Astuce mémo

Optique = photons et tissus colorés ; électronique = électrons et ultrastructure

📊 Tableaux de synthèse

Comparaison des quatre tissus fondamentaux

Comparaison des microscopies