Quelles sont les quatre techniques de chromatographie liquide ?
L’adsorption, le partage, l’échange d’ions et l’exclusion stérique.
Quels composés l’adsorption ou le partage analysent-ils principalement ?
Les composés organiques de faible masse moléculaire.
Quels composés l’échange d’ions traite-t-il surtout en solution aqueuse ?
Les ions minéraux ou organiques.
Selon quelle propriété l’exclusion stérique sépare-t-elle les macromolécules ?
Selon leur taille, donc leur masse moléculaire.
À partir de quelle masse moléculaire l’exclusion stérique s’applique-t-elle approximativement ?
Au-dessus de 1000.
De quelle plage à quelle plage le diamètre des particules de support a-t-il diminué ?
D’environ 100 à 200 µm à 3 à 10 µm.
Quel effet la réduction du diamètre des particules a-t-elle eu sur la pression nécessaire ?
Elle a nécessité des pressions plus élevées.
Quelle pression une colonne HPLC de quelques centimètres nécessite-t-elle environ ?
Environ 100 bars.
À quelle vitesse de phase mobile cette pression permet-elle de fonctionner en HPLC ?
Entre 0,1 et 1 cm/s.
Comment les pressions en tête de colonne diffèrent-elles entre chromatographie gazeuse et HPLC ?
Elles sont 100 à 500 fois plus faibles en chromatographie gazeuse.
En régime isocratique, que devient la composition de la phase mobile ?
Elle reste constante.
En gradient d’élution, comment varie la composition de la phase mobile ?
Elle varie par programmation des solvants.
Quelle pression maximale une pompe HPLC peut-elle fournir ?
Jusqu’à 400 bars.
Dans une pompe HPLC à deux cylindres déphasés, que fait l’amortisseur ?
Il réduit les pulsations.
Quelles sont les deux positions de fonctionnement d’un injecteur à boucle ?
« Load » et « inject ».
Que fait l’échantillon en mode « load » d’un injecteur à boucle ?
Il remplit la boucle.
Quelle est la limite de volume d’un injecteur à boucle ?
Son volume est fixe.
Quelles sont les dimensions des colonnes HPLC décrites ?
Elles mesurent 3 à 25 cm de long et 1 à 5 mm de diamètre interne.
Quelle taille ont les particules garnissant les colonnes HPLC décrites ?
Elles mesurent 3 à 10 µm.
Quelle est la polarité de la phase stationnaire en mode normal HPLC ?
Elle est polaire.
Quelle est la polarité de la phase stationnaire en mode inversé HPLC ?
Elle est apolaire.
En chromatographie en mode normal, quelle polarité caractérise la phase stationnaire et l’analyte ?
Ils sont plutôt polaires.
En chromatographie en mode inversé, quelle polarité caractérise la phase mobile ?
Elle est polaire.
Qu’est-ce qui distingue l’élution isocratique de l’élution en gradient ?
L’élution isocratique conserve la composition de la phase mobile, tandis que le gradient la modifie.
Que relie la loi de Beer-Lambert dans la détection par absorption ?
Quelle condition les substances doivent-elles remplir pour la détection UV-visible ?
Elles doivent être chromophores.
Quels renseignements spectraux un réseau de diodes permet-il en détection UV-visible ?
Des renseignements spectraux.
Comment la détection fluorimétrique mesure-t-elle la fluorescence d’un soluté ?
À angle droit, après excitation par une radiation ultraviolette.
Quelle différence d’indice le détecteur réfractométrique mesure-t-il en continu ?
Entre l’éluant seul et l’éluant contenant le soluté.
Quelle propriété électrique le détecteur conductimétrique mesure-t-il dans la phase mobile ?
La conductivité électrique due au soluté.
Quel rôle joue l’acide fumarique dans l’analyse du jus de raisin ?
Il sert d’étalon interne, ajouté à 0,4 g pour 100 mL.
Comment appelle-t-on l’exclusion stérique en solution organique ?
La perméation de gel.
Comment appelle-t-on l’exclusion stérique en solution aqueuse ?
La filtration sur gel.
Quels types de chromatographie liquide le terme HPLC désigne-t-il ?
L’adsorption et le partage à haute performance.
Quelle relation la loi de Darcy établit-elle pour la vitesse de phase mobile ?
Quelle est la viscosité de l’eau selon les données fournies ?
1 mPa·s.
Comment élimine-t-on les poussières, les gaz dissous et les bulles de la phase mobile ?
Par dégazage sous vide, chauffage, agitation, filtration ou barbotage de gaz inerte.
Comment les gaz dissous affectent-ils la compressibilité des éluants ?
Ils la modifient.
Quel effet l’oxygène dissous a-t-il sur la durée de vie d’une colonne HPLC ?
Il la réduit.
Combien de solvants une pompe HPLC quaternaire peut-elle mélanger ?
Quatre solvants.
Quel est le volume de course d’une pompe HPLC ?
De 20 à 100 µL.
Combien de positions peut comporter le carrousel d’un passeur automatique ?
48 ou 96 positions.
Quelle plage couvre généralement le volume d’injection d’un injecteur à boucle variable ?
De 0,1 à 100 µL.
Quel effet le rinçage de l’aiguille réduit-il ?
L’effet mémoire des composés d’une analyse précédente.
Quelle surface spécifique développent les supports de colonne HPLC ?
De 100 à 500 m²/g.
Quelle hauteur équivalente à un plateau théorique ont les supports HPLC ?
Environ 10⁻² mm.
Quel pourcentage des applications HPLC utilise environ le mode inversé ?
Environ 75 %.
Quelle part du volume libre de la colonne correspond à la porosité des particules ?
De 30 à 70 %.
Dans quel ordre croissant les solvants sont-ils classés selon leur polarité ?
Hydrocarbures aliphatiques, oléfines, hydrocarbures aromatiques, halogénures, sulfures, éthers, nitrodérivés, esters, aldéhydes, cétones, alcools, amines, sulfones, sulfoxydes, amides, acides carboxyliques et eau.
Quel type de gradient d’élution est le plus courant ?
Le gradient linéaire.
Combien de solvants peuvent composer la phase mobile d’un gradient ?
Deux à quatre solvants.
Que peut faire un gradient lorsque l’analyse d’une séparation simple dure trop longtemps ?
Il fait varier la composition de la phase mobile pour améliorer la séparation et réduire le temps d’élution des composés tardifs.
Quelles mesures la détection UV-visible peut-elle effectuer ?
L’absorbance absolue de l’éluant avec soluté ou la différence d’absorbance entre l’éluant et l’éluant avec soluté.
Quelles longueurs d’onde la détection UV-visible peut-elle utiliser ?
Une longueur d’onde fixe de 254 ou 280 nm, ou une longueur d’onde variable de 190 à 800 nm.
Quelle est la sensibilité du détecteur fluorimétrique par rapport au détecteur UV ?
Environ 1000 fois supérieure.
À quoi le détecteur fluorimétrique est-il sensible, et quels composés exige-t-il ?
À l’oxygène dissous ; il exige des composés fluorescents ou des dérivés fluorescents.
Que mesure le réfractomètre à déviation dans ses deux compartiments liquides ?
La déviation d’un faisceau lumineux.
Que mesure le réfractomètre à réflexion à l’interface verre-liquide ?
La lumière réfléchie ou transmise.
Quand le détecteur réfractométrique est-il limité pour détecter un analyte ?
Lorsque l’indice de réfraction de l’analyte égale celui de l’éluant.
Quelle quantité minimale la réfractométrie peut-elle détecter ?
De 100 ng à 1 mg.
Quelle relation exprime la loi d’Ohm entre la tension, la résistance et le courant ?
Quelle formule relie la conductivité, la surface des électrodes et leur distance à la conductance ?
Pourquoi l’introduction directe de l’éluant à 1 mL/min est-elle impossible en spectrométrie de masse ?
Le débit gazeux dépasse les capacités de la pompe à vide.
Quel système alimente la spectrométrie de masse à des débits élevés ?
Un système split/splitless.
Quel procédé d’ionisation utilise la source d’ions par électrospray ?
L’ionisation d’une phase liquide par électronébulisation.
Quelle concentration et quel volume caractérisent le mélange étalon pour l’analyse du jus de raisin ?
0,4 g pour 100 mL, avec un volume analysé de 5 mL.
Quelle est l’aire du pic étalon de l’acide tartrique ?
1000.
Quelle est l’aire du pic étalon de l’acide ascorbique ?
1200.
Quelle est l’aire du pic étalon de l’acide malique ?
1050.
Quelle membrane filtre l’échantillon de jus de raisin avant l’analyse ?
Une membrane de 0,2 µm.
Quelles sont la longueur et le diamètre interne de la colonne d’analyse des acides du raisin ?
10 cm de longueur et 1 mm de diamètre interne.
Quel est le débit de la phase mobile utilisée pour analyser les acides du raisin ?
25 mL/min.
Que décrit la linéarité des volumes injectés par rapport aux volumes programmés ?
La proportionnalité entre les volumes réellement injectés et les volumes programmés sur une plage de volumes.
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1. Une chercheuse veut analyser des ions métalliques dissous dans l’eau. Quelle technique de chromatographie liquide convient le mieux à cet analyte ?
2. Une solution contient des macromolécules dont les masses moléculaires sont proches de 2 000. Quelle technique permet de les séparer selon leur taille ?
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