Flashcards : Composition et extraction membranaires (96 cartes)

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1Question

Qu’est-ce qu’une membrane biologique ?

Réponse

Une enveloppe dynamique qui délimite un espace, préserve sa composition et permet des échanges sélectifs.

2Question

Quelles molécules les membranes laissent-elles passer selon leur composition ?

Réponse

Les ions et les petites molécules.

3Question

Quel effet l’exocytose a-t-elle sur la membrane plasmique ?

Réponse

Elle l’augmente lors de la fusion des vésicules.

4Question

Quel effet l’endocytose a-t-elle sur la membrane plasmique ?

Réponse

Elle la réduit en formant des vésicules.

5Question

Quels lipides composent les membranes biologiques ?

Réponse

Des phospholipides, des glycolipides et des stérols.

6Question

Comment le nombre de carbones influence-t-il la température de fusion des acides gras ?

Réponse

Elle augmente avec le nombre de carbones.

7Question

Comment le nombre d’insaturations influence-t-il la température de fusion des acides gras ?

Réponse

Elle diminue quand le nombre d’insaturations augmente.

8Question

Quelles fonctions les protéines membranaires assurent-elles ?

Réponse

Elles assurent le transport, la signalisation, la reconnaissance de surface et l’adhésion.

9Question

Comment la diffusion facilitée déplace-t-elle les molécules ?

Réponse

Elle est passive et suit un gradient.

10Question

De quoi dépend le transport actif primaire ?

Réponse

D’une ATPase.

11Question

Comment les protéines transmembranaires se distinguent-elles des protéines périphériques ?

Réponse

Les protéines transmembranaires traversent la membrane.

12Question

De quoi sont constituées les membranes biologiques, et quel type de liaison unit protéines et lipides ?

Réponse

Elles associent protéines, lipides et eau par des interactions faibles, sans liaison covalente entre protéines et lipides.

13Question

Que deviennent les têtes polaires et les chaînes hydrophobes des lipides en milieu aqueux ?

Réponse

Les têtes s’hydratent et les chaînes se regroupent par effet hydrophobe et interactions de Van der Waals.

14Question

Que décrit le modèle de la mosaïque fluide des membranes ?

Réponse

Il décrit des assemblages hétérogènes dont les constituants sont dynamiques et mobiles.

15Question

Comment les lipides peuvent-ils agir sur une même protéine selon leur environnement ?

Réponse

Ils peuvent la stimuler ou l’inhiber en modifiant sa conformation.

16Question

Quel est le rapport protéines/lipides de la membrane mitochondriale interne ?

Réponse

3,6.

17Question

Quelles sont les trois étapes de préparation de fractions membranaires enrichies ?

Réponse

Le broyage mécanique, la séparation par centrifugation et la validation des fractions.

18Question

Que contient l’extrait brut obtenu au Potter ?

Réponse

Des compartiments plus ou moins préservés, des organites intacts ou fragmentés et des fragments membranaires isolés.

19Question

Selon quels critères les trois types de centrifugation séparent-ils les particules ?

Réponse

La centrifugation différentielle selon la taille, celle de zone selon le coefficient de sédimentation et celle à l’équilibre selon la densité.

20Question

Quel est le premier culot récupéré en centrifugation différentielle ?

Réponse

Un culot de noyaux et de gros débris.

21Question

Quels lipides se trouvent notamment dans la phase supérieure de l’extraction de Folch ?

Réponse

Les sphingoglycolipides à longues chaînes glycosylées.

22Question

Quels phospholipides sont majoritaires dans le feuillet externe ?

Réponse

La phosphatidylcholine et la phosphatidylsérine.

23Question

Quel type de chaînes d’acides gras caractérise généralement les sphingolipides ?

Réponse

Des chaînes généralement saturées.

24Question

Quelle structure amphiphile caractérise un détergent ?

Réponse

Une tête hydrophile et un pôle hydrophobe.

25Question

À partir de quelle concentration les micelles se forment-elles ?

Réponse

À partir de la concentration micellaire critique (CMC).

26Question

Comment les détergents non ioniques affectent-ils généralement la structure native des protéines ?

Réponse

Ils la préservent mieux que les détergents ioniques.

27Question

Quelle est la première étape de la solubilisation d’une membrane par un détergent ?

Réponse

La partition du détergent dans la membrane.

28Question

Quel risque présente une quantité insuffisante de détergent lors de l’extraction ?

Réponse

Elle expose des portions protéiques et favorise l’agrégation.

29Question

Quelles étapes sont nécessaires à l’identification protéomique des protéines membranaires ?

Réponse

Leur extraction, leur digestion protéolytique en fragments analysables par spectrométrie de masse et l’optimisation des conditions expérimentales.

30Question

Selon quels critères l’électrophorèse 2D sépare-t-elle les protéines ?

Réponse

Elle les sépare selon leur point isoélectrique par IEF, puis selon leur taille par SDS-PAGE.

31Question

Comment la BN-PAGE permet-elle la migration des protéines selon leur taille ?

Réponse

La digitonine les solubilise, puis le bleu de Coomassie leur apporte des charges négatives et limite leur agrégation avant leur migration sur un gel en gradient.

32Question

Que peuvent provoquer les détergents sur les protéines membranaires ?

Réponse

Une dénaturation et un repliement incorrect en micelles.

33Question

Quelles tailles distinguent les SUV, LUV, MLV et GUV ?

Réponse

SUV : 20–110 nm ; LUV : plus de 100 nm ; MLV : plus de 500 nm ; GUV : plus de 1 μm.

34Question

De quoi dépend la courbure membranaire ?

Réponse

De la composition et de la nature des phospholipides, du milieu, de la température et de l’organisation des lipides.

35Question

Quel état des phospholipides caractérise la phase lamellaire Lα ?

Réponse

Les phospholipides y sont désordonnés.

36Question

Quels processus membranaires les lipides de phase HI ou HII peuvent-ils favoriser ?

Réponse

La fusion, l’endocytose ou l’exocytose.

37Question

Comment sont orientées les chaînes d’acides gras dans la phase gel Lβ ?

Réponse

Elles sont ordonnées en configuration tout-trans.

38Question

Quel est l’état des chaînes d’acides gras dans la phase cristal-liquide Lα ?

Réponse

Elles sont désordonnées.

39Question

Comment la longueur des chaînes d’acides gras influence-t-elle la température de transition Lβ vers Lα ?

Réponse

Une longueur accrue augmente la température de transition.

40Question

Comment le nombre de doubles liaisons influence-t-il la température de transition Lβ vers Lα ?

Réponse

Un nombre accru de doubles liaisons diminue la température de transition.

41Question

Quel effet le cholestérol a-t-il sur la fluidité des membranes enrichies en phospholipides saturés ?

Réponse

Il augmente leur fluidité.

42Question

Quel effet le cholestérol a-t-il sur la fluidité membranaire à température physiologique ?

Réponse

Il tend à la diminuer.

43Question

Quelles caractéristiques définissent les radeaux lipidiques dans la membrane plasmique ?

Réponse

Ce sont des microdomaines dynamiques et temporaires, relativement peu fluides, riches en cholestérol, en lipides saturés et en certaines protéines.

44Question

Quelles caractéristiques définissent les cavéoles ?

Réponse

Ce sont des radeaux enrichis en cavéoline et en cavine, formant des invaginations pyriformes d’environ 50 nm de diamètre.

45Question

Que délimite la membrane plasmique des cellules eucaryotes ?

Réponse

La cellule du milieu extracellulaire.

46Question

Quelle barrière se trouve à l’interface des cellules animales avec le milieu ?

Réponse

La membrane plasmique est leur seule barrière.

47Question

Que regroupe le système endomembranaire ?

Réponse

Les membranes qui délimitent les compartiments intracellulaires.

48Question

De quoi sont constitués les glycérophospholipides ?

Réponse

D’un glycérol, de chaînes d’acides gras et d’un groupement phosphate portant différents groupements.

49Question

Quelle part des sphingolipides humains représente la sphingomyéline ?

Réponse

85 %.

50Question

Quelle proportion des lipides des membranes internes des chloroplastes les MGDG et DGDG peuvent-ils représenter ?

Réponse

Jusqu’à 80 %.

51Question

Combien de carbones les acides gras membranaires comportent-ils généralement ?

Réponse

De 16 à 32 carbones.

52Question

Comment les acides gras membranaires se distinguent-ils de ceux des triacylglycérols ?

Réponse

Ils sont plus insaturés.

53Question

Quel passage l’acétylcholine permet-elle au récepteur nicotinique ?

Réponse

Le passage d’ions.

54Question

Comment un récepteur couplé à une protéine G active-t-il celle-ci ?

Réponse

Par un changement de conformation.

55Question

Que transmet la protéine G à l’effecteur membranaire ?

Réponse

Le signal.

56Question

Quel domaine possèdent les récepteurs à activité enzymatique ?

Réponse

Un domaine catalytique intracellulaire.

57Question

Quelles sont les étapes de formation d’agrégats lipidiques in vitro ?

Réponse

Les lipides sont dissous dans un solvant, celui-ci est évaporé, puis de l’eau est ajoutée.

58Question

Quelle structure distingue les liposomes des micelles ?

Réponse

Les liposomes sont des vésicules constituées d’une bicouche de phospholipides.

59Question

Comment les lipides annulaires interagissent-ils avec une protéine membranaire ?

Réponse

Ils l’entourent et s’échangent lentement avec les lipides voisins.

60Question

Quels compartiments cellulaires peuvent rester intacts après broyage ?

Réponse

Les noyaux, mitochondries, lysosomes, chloroplastes, granules de sécrétion et petites vacuoles.

61Question

Que deviennent la membrane plasmique, le Golgi, le réticulum et les endosomes après broyage ?

Réponse

Ils peuvent former des microsomes, petites vésicules refermées qui conservent leur contenu.

62Question

De quoi dépend le coefficient de sédimentation et dans quelle unité s’exprime-t-il ?

Réponse

Il dépend de la masse et de la forme des particules et s’exprime en Svedberg (S).

63Question

Où dépose-t-on l’homogénat en centrifugation de zone ?

Réponse

Au-dessus d’un gradient de saccharose.

64Question

Quelle méthode Folch a été publiée en 1956 pour isoler les lipides membranaires ?

Réponse

La méthode de Folch et al., publiée en 1956.

65Question

Dans la méthode de Folch, quelle étape suit l’ajout d’eau au filtrat ?

Réponse

Les phases sont séparées selon l’hydrophilie des lipides.

66Question

Quelle méthode identifie les lipides avec une faible efficacité ?

Réponse

Les anticorps anti-lipides.

67Question

Vers quel feuillet la phosphatidylsérine peut-elle migrer dans les cellules cancéreuses ?

Réponse

Vers le feuillet externe.

68Question

Quel type de détergent est le SDS ?

Réponse

Un détergent ionique.

69Question

Quel effet les sels ont-ils sur la CMC des détergents ioniques ?

Réponse

Ils diminuent leur CMC en réduisant l’effet de charge.

70Question

Quels détergents sont dialysables ?

Réponse

Les détergents ioniques et les sels biliaires.

71Question

Quel est le rôle du fractionnement subcellulaire dans l’analyse des protéines peu abondantes ?

Réponse

Il enrichit l’extrait en protéines d’intérêt, notamment celles des compartiments internes.

72Question

Comment les lignées cellulaires facilitent-elles l’identification des protéines ?

Réponse

Elles permettent de multiplier rapidement et efficacement les cellules en flasques ou en grandes plaques.

73Question

Pourquoi faut-il éliminer les détergents avant l’IEF des protéines membranaires ?

Réponse

Les variations de pH et les détergents interfèrent avec l’isoélectrofocalisation.

74Question

Quelles étapes suivent la première séparation par BN-PAGE lors de l’analyse 2D d’un complexe ?

Réponse

La bande récupérée est séparée par IEF et SDS-PAGE pour isoler les constituants selon leur charge et leur taille.

75Question

Comment récupère-t-on les protéines d’intérêt après leur séparation sur gel de polyacrylamide ?

Réponse

Par coloration et découpage du gel.

76Question

Quels sont les principaux systèmes modèles lipidiques ?

Réponse

Les liposomes, les monocouches, les bicouches planes, les bicelles et les nanodisques.

77Question

Quelle est la première étape de préparation des liposomes par hydratation d’un film ?

Réponse

Évaporer le solvant pour former un film lipidique.

78Question

Quelle méthode réduit la taille des liposomes avec le plus de précision ?

Réponse

L’extrusion.

79Question

Quel effet l’ajout de ligands peut-il avoir sur les liposomes ?

Réponse

Il peut favoriser leur reconnaissance par les macrophages.

80Question

Quel est l’intérêt de l’encapsulation d’un médicament dans un liposome ?

Réponse

Elle permet de cibler son administration.

81Question

À 37 °C en milieu aqueux, vers quelle organisation évoluent les liposomes quand la phosphatidylcholine augmente ?

Réponse

Vers une organisation lamellaire, puis hexagonale HII.

82Question

Dans l’organisation HII, où se trouvent les têtes polaires ?

Réponse

À l’intérieur.

83Question

Quel changement peut faire passer une phase Lβ à une phase Lα ?

Réponse

Une diminution de la concentration en lipides.

84Question

Quelle organisation la phosphatidylcholine favorise-t-elle ?

Réponse

Une organisation lamellaire.

85Question

Comment le cholestérol s’insère-t-il dans la bicouche par rapport aux phospholipides ?

Réponse

Il s’insère plus profondément.

86Question

Quelles membranes contiennent davantage de cholestérol : celles riches en lipides saturés ou en phospholipides insaturés ?

Réponse

Celles qui contiennent des lipides saturés.

87Question

À quelle fréquence le flip-flop spontané des lipides isolés se produit-il ?

Réponse

Moins d’une fois par mois.

88Question

Quelle taille et quelle résistance aux détergents caractérisent les radeaux lipidiques ?

Réponse

Ils mesurent de 10 à 200 nm et résistent aux détergents qui solubilisent les autres régions membranaires.

89Question

Quels ancrages protéiques peuvent être présents dans les radeaux lipidiques ?

Réponse

Des motifs GPI ou des chaînes acyles.

90Question

Quel est le sort de la plupart des protéines transmembranaires dans les radeaux lipidiques ?

Réponse

La plupart en sont exclues.

91Question

Quelles phases se distinguent dans les membranes modèles grâce à l’interaction du cholestérol et des sphingolipides saturés ?

Réponse

Une phase ordonnée L0 et une phase désordonnée Ld.

92Question

À quels processus les microdomaines membranaires peuvent-ils contribuer ?

Réponse

À la signalisation, à l’endocytose et aux interactions avec des virus ou des toxines.

93Question

Comment les microdomaines membranaires contribuent-ils à ces processus ?

Réponse

Ils recrutent certaines protéines et certains récepteurs.

94Question

Quelle part du volume cellulaire les membranes représentent-elles chez les hépatocytes ?

Réponse

17 %.

95Question

Quels paramètres lipidiques peut-on ajuster pour modifier les liposomes à 37 °C ?

Réponse

La composition et la charge des lipides.

96Question

Quelle membrane est spécifiquement associée à la cardiolipine ?

Réponse

La membrane mitochondriale.

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Teste tes connaissances avec un QCM de 55 questions sur Composition et extraction membranaires.

1. Quelle propriété décrit le mieux une membrane biologique qui maintient le contenu d’un compartiment tout en autorisant certains échanges avec son environnement ?

2. Un compartiment cellulaire est entouré d’une membrane dont la composition permet le passage d’ions et de petites molécules, mais pas celui de macromolécules. Quelle substance devrait pouvoir traverser selon cette règle ?

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