Fiche de révision : Cytologie et techniques d’étude

📋 Plan du Cours

1. Cellule et prélèvements cytologiques
2. Fixation et coloration des cellules
3. Colorations de Feulgen et Brachet
4. Séparation des constituants cellulaires
5. Traceurs biologiques et autoradiographie
6. Microscope optique et observation

📖 1. Cellule et prélèvements cytologiques

🔑 Notions clés & Définitions

• Cytologie : Science biologique qui étudie la cellule.
• Cellule : Plus petite partie d’un organisme et unité structurale et fonctionnelle de celui-ci.

★ À maîtriser

• Le frottis prélève un liquide de l’organisme, comme le sang, le sperme ou le liquide amniotique, puis en étale les cellules.

📌 La ponction prélève à l’aide d’une aiguille creuse un liquide, des tissus ou les deux dans un organe, tandis que la biopsie prélève des tissus chez un être vivant et que l’autopsie prélève des tissus chez un cadavre.

Compléments

• La cellule est souvent invisible à l’œil nu et son étude nécessite des techniques appropriées.

• Le grattage consiste à racler la paroi interne de la joue avec un coton-tige pour obtenir des cellules.

• La biopsie permet d’examiner des tissus prélevés chez un être vivant afin de rechercher l’origine d’une maladie.

• L’autopsie examine des tissus prélevés chez un cadavre afin de rechercher l’origine de la mort.

📖 2. Fixation et coloration des cellules

🔑 Notions clés & Définitions

• Colorant fixateur : Substance qui fixe un prélèvement afin de maintenir intactes ses différentes structures.
• Colorant électif : Substance qui colore spécifiquement un constituant de la cellule.

★ À maîtriser

📌 Un colorant électif vital colore un constituant sans empêcher la cellule de vivre, tandis qu’un colorant électif létal colore un constituant en entraînant immédiatement la mort de la cellule.

Compléments

• Les exemples de colorants fixateurs sont :

  • le formol
  • l’acide acétique
  • l’alcool

• Les colorants électifs et leurs constituants colorés sont : le rouge neutre colore la vacuole en rouge vif, le vert de Janus colore la mitochondrie en vert, le bleu de méthylène colore le noyau en bleu, le vert de méthyle colore le nucléoplasme en vert, l’acide osmique colore le centrosome en noir

💡 Astuce mémo

Le colorant vital colore sans tuer, le colorant létal colore en tuant.

📖 3. Colorations de Feulgen et Brachet

★ À maîtriser

• 🔄 La coloration de Feulgen se réalise ainsi : traiter le prélèvement à l’acide chlorhydrique, attendre un certain temps, appliquer le réactif de Schiff, qui colore l’ADN en rose dans le noyau

• Dans la coloration de Brachet, le vert de méthyle colore l’ADN en vert et la pyronine colore l’ARN en rouge.

• La coloration de Brachet met en évidence l’ADN dans le noyau, notamment le nucléoplasme, et l’ARN dans le nucléole et le cytoplasme.

Compléments

• Dans une cellule témoin traitée par le mélange de Brachet, le noyau est vert, tandis que le nucléole et le cytoplasme sont rouges.

• Après traitement par l’ADNase puis application du mélange de Brachet, le cytoplasme et le nucléole sont colorés en rouge.

• Après traitement par l’ARNase puis application du mélange de Brachet, le noyau est coloré en vert.

💡 Astuce mémo

Feulgen : ADN en rose ; Brachet : ADN en vert et ARN en rouge.

📖 4. Séparation des constituants cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Centrifugation : Séparation des constituants d’un mélange grâce à une force centrifuge produite par une centrifugeuse.
• Chromatographie : Technique de séparation des constituants d’un mélange à l’aide d’un support solide ou liquide qui interagit avec eux et leur impose des vitesses de déplacement différentes.

📝 Points essentiels

• Lors d’une centrifugation différentielle, l’homogénat est centrifugé successivement à des vitesses croissantes : la première vitesse produit un culot de noyaux, une vitesse accrue un culot de mitochondries, puis une vitesse encore plus importante un culot de réticulums endoplasmiques, jusqu’à ce que le surnageant ne contienne plus que des protéines.

💡 Astuce mémo

Vitesse croissante : noyaux, mitochondries, réticulums endoplasmiques.

📖 5. Traceurs biologiques et autoradiographie

🔑 Notions clés & Définitions

• Traceur biologique : L’utilisation de traceurs biologiques consiste à employer des isotopes radioactifs pour suivre l’emplacement d’une molécule jusque dans une cellule.

📝 Points essentiels

• Un isotope est un élément qui se désintègre, ce qui permet de tracer une molécule au moyen d’une autoradiographie.

💡 Astuce mémo

La désintégration des isotopes radioactifs permet de tracer les molécules.

📖 6. Microscope optique et observation

🔑 Notions clés & Définitions

• Préparation microscopique : Ensemble formé par une lame porte-objet, une lamelle couvre-objet, l’objet d’étude ou le matériel biologique et un liquide de montage, comme l’eau ou un colorant.
• Grossissement : Nombre de fois que le microscope peut multiplier la cellule.

★ À maîtriser

📌 Le microscope optique, ou photonique, utilise des photons, tandis que le microscope électronique constitue l’autre type de microscope mentionné.

• La partie optique comprend : l’oculaire, les objectifs, le condenseur, la source lumineuse, qui peut être une lampe ou un miroir

• Pour observer une préparation au microscope, on la place sur la platine, on la fixe avec les valets, on vérifie la lumière et l’ouverture du diaphragme, on choisit l’objectif au plus petit indice, puis on ajuste la vis macrométrique et la vis micrométrique pour obtenir une image nette.

Compléments

• La partie mécanique comprend :

  • le tube optique
  • le revolver
  • la potence
  • la platine
  • le diaphragme
  • le pied ou socle
  • les valets
  • les vis macrométrique et micrométrique

• Pour observer l’image plus claire, on choisit un objectif portant un indice plus grand.

• L’oculaire et les objectifs portent chacun un indice utilisé pour calculer le grossissement du microscope.