Quelle attribution est associée au séquençage Sanger ?
Frederick Sanger, 1977.
Que permet de déterminer le séquençage Sanger ?
La séquence de nucléotides de l’ADN.
Quel autre nom porte le séquençage Sanger ?
La méthode de terminaison de chaîne.
Quelle matrice la PCR à terminaison de chaîne utilise-t-elle ?
L’ADN d’intérêt.
Que provoque l’incorporation aléatoire d’un ddNTP pendant l’élongation ?
L’arrêt de l’élongation et la production de fragments de longueurs différentes.
Quel groupe les ddNTP ne possèdent-ils pas ?
Le groupe 3′-OH.
Vers quelle électrode migre l’ADN chargé négativement pendant l’électrophorèse sur gel ?
Vers l’électrode positive.
Quel critère l’électrophorèse sur gel utilise-t-elle pour séparer les oligonucléotides terminés par chaîne ?
Leur taille.
Quels fragments d’ADN se déplacent le plus vite dans un gel ?
Les fragments les plus petits.
Comment détermine-t-on la séquence à partir des fragments obtenus ?
On lit les fragments du plus petit au plus grand.
Dans quel sens lit-on la séquence du brin synthétisé ?
Dans le sens 5′ à 3′.
Combien de voies le séquençage manuel utilise-t-il pour séparer les fragments ?
Quatre voies, correspondant aux quatre ddNTP.
Comment le séquençage automatisé sépare-t-il les fragments ?
Dans une seule électrophorèse sur gel capillaire.
Quelle structure les deux brins d’ADN forment-ils en s’enroulant l’un autour de l’autre ?
Une double hélice.
De quoi chaque brin d’ADN est-il constitué ?
D’une chaîne de désoxyribonucléotides.
Si l’amorce cible le brin complémentaire, quel brin la séquence lue représente-t-elle ?
Le brin d’intérêt.
Si l’amorce cible le brin d’intérêt, quel brin la séquence lue représente-t-elle ?
Le brin complémentaire, à reconvertir.
Quel est l’objectif de la PCR sur une séquence d’ADN cible ?
Amplifier la séquence entière.
Que produit le séquençage Sanger jusqu’à la longueur de la cible ?
Des fragments terminés de toutes les longueurs possibles.
Entre quels groupes l’ADN polymérase forme-t-elle une liaison phosphodiester ?
Entre le 3′-OH du dernier nucléotide et le 5′-phosphate du suivant.
Combien de réactions PCR le séquençage Sanger manuel utilise-t-il ?
Quatre réactions PCR.
Combien de types de ddNTP chaque réaction Sanger manuelle contient-elle ?
Un seul type de ddNTP.
Comment le séquençage Sanger automatisé répartit-il les quatre ddNTP ?
Il les mélange dans une seule réaction.
Comment les ddNTP sont-ils distingués dans le séquençage Sanger automatisé ?
Chacun porte une étiquette fluorescente unique.
Pourquoi la vitesse de migration des fragments d’ADN dans un gel dépend-elle de leur taille ?
Ils ont la même charge par unité de masse.
Dans quel ordre les bandes d’oligonucléotides apparaissent-elles de bas en haut dans un gel ?
Du plus petit au plus grand.
Dans quel sens l’ADN polymérase synthétise-t-elle l’ADN ?
Dans le sens 5′ à 3′.
À partir de quoi l’ADN polymérase commence-t-elle la synthèse ?
À partir d’une amorce fournie.
Que fait le laser lors du séquençage automatisé ?
Il excite les marqueurs fluorescents des fragments.
Comment l’ordinateur identifie-t-il les ddNTP terminaux ?
À partir de la lumière émise.
Que représente le chromatogramme du séquençage ?
Les pics fluorescents correspondant aux nucléotides le long de l’ADN modèle.
Que révèle une bande dans la voie ddGTP en séquençage manuel ?
Le fragment se termine par une guanine.
Comment les bases azotées complémentaires des deux brins d’ADN sont-elles liées ?
Par des liaisons hydrogène.
Pour la séquence TACG, que produit une amorce ciblant le brin d’intérêt ?
ATGC, à reconvertir en TACG.
Pour la séquence TACG, que produit une amorce ciblant le brin complémentaire ATGC ?
TACG directement.
Quels composants la PCR utilise-t-elle pour amplifier l’ADN cible ?
L’ADN cible, des nucléotides, une amorce d’ADN et une ADN polymérase.
Quelle propriété de la Taq polymérase convient aux températures de la PCR ?
Elle résiste aux températures élevées.
Quel nucléotide le séquençage Sanger ajoute-t-il au matériel de départ de la PCR ?
Des didésoxynucléotides.
Que permettent de générer les didésoxynucléotides en séquençage Sanger ?
Des fragments terminés.
Que peut fournir la PCR pour le séquençage de l’ADN ?
De nombreuses copies de l’ADN à séquencer.
Quel effet un plus grand nombre de matrices a-t-il sur le protocole Sanger ?
Il le rend plus efficace.
Teste tes connaissances avec un QCM de 15 questions sur Séquençage Sanger et PCR.
1. Quel est l’objectif principal du séquençage Sanger ?
2. Lors d’une PCR à terminaison de chaîne, un mélange contient l’ADN d’intérêt comme matrice, des dNTP normaux et une faible proportion de ddNTP. Que produit l’incorporation aléatoire de ces ddNTP ?
Révisez le cours complet dans la fiche de révision de Séquençage Sanger et PCR.
Voir la fiche →Importe ton cours et l'IA génère des flashcards en 30 secondes.
Générateur de flashcards