Qu'est-ce qu'une culture primaire ?
Une culture primaire est une prolifération de cellules dissociées d'un tissu biopsié.
Quelles étapes composent la culture cellulaire ?
Prélever un tissu, dissocier ses cellules avec trypsine et EDTA, puis cultiver avec cellules nourricières et facteurs de croissance.
Que fait-on avant la confluence en culture cellulaire ?
On repique et dilue une partie des cellules avant de les remettre en culture.
Quel type de culture obtient-on après repiquage avant confluence ?
Une culture secondaire.
Que permettent d'étudier les cultures cellulaires ?
La prolifération, différenciation, migration et mort des cellules vivantes.
Pourquoi utilise-t-on les cultures cellulaires plutôt qu'un animal entier ?
Pour un système expérimental plus simple.
Comment repère-t-on les molécules cellulaires ?
Par des réactions cytochimiques, colorants fluorescents, autoradiographie, cytoenzymologie, immunocytochimie ou sondes nucléotidiques.
Qu'est-ce que l'immunocytochimie ?
La localisation d'une protéine antigénique avec un anticorps marqué spécifique.
Quelle différence entre anticorps monoclonal et polyclonal ?
Le monoclonal reconnaît un seul épitope, le polyclonal plusieurs épitopes.
Qu'impose l'immunocytochimie directe ?
Le marqueur est fixé à l'anticorps qui détecte l'antigène.
Qu'impose l'immunocytochimie indirecte ?
Un anticorps primaire non marqué est détecté par un anticorps secondaire marqué.
Que font les isotopes radioactifs en autoradiographie ?
Ils émettent des rayons gamma.
Qu'impressionnent les rayons gamma en autoradiographie ?
Une émulsion photographique aux sels de bromure d’argent.
Que forme l'émulsion photographique aux sels de bromure d’argent ?
Des grains d’argent à l’emplacement des molécules radioactives.
Qu'est-ce que le western blot recherche dans un échantillon biologique ?
La présence d’une protéine.
Quelles étapes comprend le western blot après la lyse des protéines ?
La séparation par SDS-PAGE, le transfert sur membrane, puis la détection par anticorps.
Que fournit le western blot concernant une protéine détectée ?
Sa présence ou absence, son poids moléculaire apparent et sa quantité relative.
Qu'est-ce que l'immunoprécipitation permet de faire avec une protéine d’intérêt ?
L'extraire et la purifier par formation d’un complexe antigène-anticorps précipitable.
Quel est l’objectif principal de la ChIP ?
Identifier une interaction entre une protéine et l’ADN.
Qu'est-ce que la cytométrie en flux ?
Une méthode d’analyse automatique de cellules individuelles entraînées par un flux liquide.
Que font les cellules marquées en cytométrie en flux ?
Elles passent une à une et à grande vitesse dans un faisceau laser.
Que mesure-t-on en cytométrie en flux pour classer les cellules ?
La lumière diffusée ou fluorescente.
Quels sont les trois composants principaux d'un cytomètre en flux ?
Un réseau fluidique, un banc optique et un microprocesseur.
Quel rôle joue le microprocesseur dans un cytomètre en flux ?
Il convertit les signaux électriques en numériques et prépare les analyses en temps réel.
De quoi dépend la diffraction de la lumière sur les cellules ?
De la taille, forme, granulosité et composition membranaire des cellules.
Que permet d'identifier la diffraction de la lumière en cytométrie ?
Différents types cellulaires.
Quel est l'effet de l'iodure de propidium sur l'ADN ?
Il rend l’ADN fluorescent pour identifier la quantité d’ADN et la phase du cycle cellulaire.
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1. Qu’est-ce qui caractérise une culture primaire ?
2. Quelle succession d’étapes correspond à la mise en culture de cellules à partir d’un tissu ?
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