Qu'est-ce que le pouvoir de résolution en microscopie ?
La plus petite distance observable entre deux points sans qu'ils soient confondus.
Comment varie la puissance d'un microscope selon la distance D de résolution ?
Plus D est petite, plus le microscope est puissant.
De quels paramètres dépend le pouvoir de résolution ?
De l'indice de réfraction N, de la longueur d'onde λ et de l'angle α du cône lumineux.
Que décrivent les techniques morphologiques ?
La forme des cellules et des tissus.
Que localisent les techniques d'étude in situ ?
Les constituants biochimiques des cellules et tissus.
À quelle température et conditions atmosphériques cultivet-on des cellules vivantes ?
À 37 °C dans une atmosphère humidifiée avec 5 % de CO2.
Quelle est la première étape de la congélation rapide d'une biopsie ?
Congeler la biopsie dans l’azote liquide à -196 °C avec des cryoprotecteurs.
Que fait-on après la congélation rapide pour préparer la biopsie ?
La couper au cryostat à -20/-30 °C, puis la fixer et la colorer.
Quelles sont les étapes de la préparation classique d'un échantillon ?
Fixer avec des aldéhydes, déshydrater, inclure en paraffine ou résine, refroidir et couper.
Quelle est l'épaisseur typique des coupes pour microscope optique ?
Environ 5 μm.
Quelle est l'épaisseur typique des coupes pour microscope électronique à transmission (MET) ?
Environ 50 nm.
Quels rayonnements utilise le microscope optique standard ?
Des photons.
Quels éléments traversent les photons dans un microscope optique standard ?
Le condenseur, l’objectif et l’oculaire.
Quelle condition est nécessaire pour observer au microscope optique standard ?
Une coupe fine, presque transparente.
Quelle coloration est utilisée pour augmenter le contraste en microscopie optique standard ?
L’éosine ou l’hémalun.
Que permet d’observer le microscope optique standard dans les cellules ?
La forme et l’aspect des cellules et des noyaux.
Quelles structures ne peut pas observer le microscope optique standard ?
La plupart des structures infracellulaires.
Comment le microscope à contraste de phase modifie-t-il les différences de phase?
Il les transforme en différences de brillance.
Quelles préparations le microscope à contraste de phase évite-t-il?
Il évite coupe, fixation et coloration.
Que permet d'observer le microscope à contraste de phase?
Il permet d'observer des cellules vivantes, leurs organites en mouvement et leur division.
Comment fonctionne le microscope à fluorescence?
Il détecte des molécules fluorescentes absorbant une longueur d'onde λ1 et émettant une longueur d'onde supérieure λ2.
Quel type de faisceau utilise le MET pour observer les structures infracellulaires ?
Un faisceau d’électrons.
Que traverse le faisceau d’électrons dans le MET ?
Une coupe ultrafine dans un vide poussé.
Sur quelle partie de l’échantillon le MEB dirige-t-il son faisceau d’électrons ?
Sur la surface entière métallisée de l’échantillon.
Quel type d’image produit le MEB ?
Une image en relief de la surface.
Quel dispositif utilise le microscope confocal pour réaliser des coupes optiques ?
Un laser.
Quel avantage offre le microscope confocal pour l’imagerie d’échantillons épais ?
Il permet de reconstruire des images tridimensionnelles plus nettes.
Qu'est-ce que l'immunohistologie localise principalement ?
Des molécules antigéniques, surtout des protéines et glycoprotéines.
Quelle différence principale distingue le marquage direct du marquage indirect ?
Le marquage direct associe le marqueur à l'anticorps primaire, le marquage indirect utilise un anticorps secondaire marqué.
Quel avantage apporte l'anticorps secondaire marqué dans le marquage indirect ?
Il amplifie le signal.
Comment l'hybridation in situ localise-t-elle une séquence d'acide nucléique ?
Avec une sonde simple brin marquée complémentaire de la séquence recherchée.
Quel est le rôle de la sonde dans l'hybridation in situ ?
Elle est complémentaire de la séquence ciblée.
Quelle étape suit l'incubation d'un tissu avec un précurseur radioactif en autoradiographie ?
L'exposition à une émulsion photographique.
Que révèle la révélation en autoradiographie ?
Des grains d'argent noirs.
Quel processus permet de suivre dans le temps des macromolécules avec un précurseur radioactif ?
L'autoradiographie.
Qu'est-ce que la cytométrie de flux permet de faire avec des cellules marquées ?
Elle permet de différencier, compter et trier les cellules selon leur fluorescence.
Pour quelles applications utilise-t-on la cytométrie de flux ?
Pour le typage des leucémies, la numération lymphocytaire, l’analyse du cycle cellulaire et la détection d’aneuploïdies.
Comment fonctionne la centrifugation différentielle pour séparer les constituants cellulaires ?
Par centrifugations successives d’un homogénat, en récupérant le culot et recentrifugeant le surnageant à chaque étape.
Que sédimente une centrifugation de 10 minutes à 1 000 g ?
Le noyau et les débris cellulaires.
Que sédimentent une centrifugation de 20 minutes à 20 000 g ?
Les mitochondries, lysosomes et peroxysomes.
Que sédimente une centrifugation de 60 minutes à 80 000 g ?
Des fragments du réticulum endoplasmique appelés microsomes.
Quelles étapes composent la fabrication d’anticorps monoclonaux ?
Immuniser une souris, récupérer ses lymphocytes B, fusionner avec myélome, sélectionner clones, amplifier.
Que dose l’ELISA indirect dans un échantillon ?
Un anticorps.
Que dose l’ELISA sandwich dans un échantillon ?
Un antigène.
Comment est mesurée l’intensité de la coloration en ELISA ?
Au spectrophotomètre.
De quoi dépend l’intensité de la coloration en ELISA ?
De la quantité d’antigène ou d’anticorps présente.
Comment la chromatographie sépare-t-elle les constituants d'un mélange ?
Par migration à des vitesses différentes entre une phase mobile et une phase fixe.
Selon quel critère la chromatographie d'exclusion sépare-t-elle les protéines ?
Selon leur taille uniquement.
Quel critère utilise la chromatographie d'affinité pour séparer les protéines ?
L'interaction spécifique avec un ligand comme un anticorps.
Comment sont préparées les protéines avant séparation en électrophorèse ?
Elles sont dénaturées par chauffage avec SDS et un agent réducteur.
Sur quoi les protéines sont-elles déposées pour l'électrophorèse ?
Sur un gel de polyacrylamide.
Selon quel critère les protéines sont-elles séparées en électrophorèse ?
Selon leur poids moléculaire sous courant électrique.
Quelles étapes comprend la biologie moléculaire?
Extraction, purification, détermination des séquences, PCR et RT-PCR.
Quelle est la valeur approximative du pouvoir de résolution de l'œil humain ?
Environ 0,2 mm.
Quel grossissement total atteint un microscope avec un objectif ×100 et un oculaire ×10 ?
Environ ×400.
Dans quelle gamme la fluorescéine absorbe-t-elle et émet-elle?
Elle absorbe dans le bleu et émet dans le jaune-vert.
Dans quelle gamme la rhodamine absorbe-t-elle et émet-elle?
Elle absorbe dans le vert et émet dans le rouge.
Sous quelle tension fonctionne le MET ?
De 40 à 100 kV.
Quels grossissements peut atteindre le MET ?
30 000, 50 000 ou 100 000 fois.
Quelle est la première étape du Western Blot après séparation des protéines ?
Le transfert des protéines sur une membrane de nitrocellulose.
Comment détecte-t-on les protéines sur la membrane en Western Blot ?
Avec un anticorps marqué spécifique de l'antigène recherché.
Que permet de détecter la radioactivité en biologie?
Le devenir de molécules d’ADN ou de protéines.
Que permettent de faire les outils informatiques en biologie moléculaire?
Rechercher des séquences de protéines ou d’acides nucléiques dans des bases de données.
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1. Concernant la définition du pouvoir de résolution, cochez la (les) proposition(s) exacte(s) :
2. Parmi les paramètres intervenant dans le pouvoir de résolution, la(les)quelle(s) est(sont) exacte(s) ?
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