Qu'est-ce que le pouvoir de résolution en microscopie ?
La plus petite distance observable entre deux points sans qu’ils soient confondus.
Que signifie une valeur D plus petite du pouvoir de résolution ?
Le microscope est plus puissant.
Que regroupe l’imagerie cellulaire ?
La description morphologique des cellules et tissus et l’étude in situ de leurs constituants biochimiques.
Dans quelles conditions les cellules vivantes sont-elles cultivées ?
À 37 °C, atmosphère humidifiée avec 5 % de CO2 et milieu adapté.
Quels types d'échantillons cellulaires sont utilisés en laboratoire ?
Sang, moelle hématopoïétique, liquide céphalo-rachidien, urines, épanchements, lavage broncho-alvéolaire, frottis.
Que fait-on après congélation d'une biopsie dans la préparation rapide ?
On la coupe au cryostat en sections de 5 à 10 μm à -20/-30 °C.
Quelle est la température de congélation dans la préparation rapide d'une biopsie ?
-196 °C dans l'azote liquide.
Quels sont les principaux agents utilisés pour fixer un échantillon en préparation chimique ?
Les aldéhydes ou l'osmium.
Quelles étapes suivent la fixation dans la préparation chimique d'un échantillon ?
Déshydratation, inclusion, refroidissement, durcissement, coupe et contraste.
Quels photons traverse le microscope optique standard ?
Des photons qui traversent le condenseur, l’objectif et l’oculaire.
Quels grossissements d’objectif possède un microscope optique standard ?
x25, x40 ou x100.
Quel grossissement total peut atteindre un microscope optique standard ?
Environ 400x.
Que permet d’observer le microscope optique standard ?
La forme et l’aspect des cellules et des noyaux.
Quelles structures ne peut-on pas observer correctement avec un microscope optique standard ?
Les structures infracellulaires.
Comment le microscope à contraste de phase modifie-t-il la lumière traversant les cellules ?
Il transforme les différences de déviation et de phase en différences de brillance.
Quelles préparations le microscope à contraste de phase évite-t-il pour observer les cellules ?
Il n'exige ni coupe, ni fixation, ni coloration.
Que détecte le microscope à fluorescence ?
Il détecte des molécules fluorescentes absorbant et émettant des lumières à différentes longueurs d'onde.
Comment fonctionne le microscope électronique à transmission (MET) ?
Il utilise un faisceau d’électrons traversant une coupe ultrafine dans un vide poussé.
Quelles sont les étapes de préparation d’un échantillon pour le MET ?
Fixation, inclusion en résine, coupe à 50 nm, dépôt sur grille, contraste par métaux lourds.
Sous quelle tension fonctionne le MET et quelle résolution atteint-il ?
Entre 40 et 100 kV avec une résolution de 0,1 à 0,2 nm.
Quel est le principe du microscope électronique à balayage (MEB) ?
Il dirige un faisceau d’électrons sur la surface métallisée et détecte les électrons renvoyés.
Qu'est-ce qu'un microscope confocal ?
Un microscope à fluorescence utilisant un laser pour des coupes optiques successives.
Quel type de lumière utilise le microscope confocal ?
Un laser.
Quelle est la fonction principale du microscope confocal ?
Réaliser des coupes optiques successives et reconstruire des images tridimensionnelles.
Quel avantage offre le microscope confocal pour observer les échantillons ?
Il permet d’observer des échantillons plus épais.
Que permet d’obtenir le microscope confocal selon l’axe Z ?
Une série de plans.
Quelle précision offre le microscope confocal dans la localisation moléculaire ?
Il localise plus précisément une molécule dans la cellule ou sur la membrane plasmique.
Qu'est-ce que l'histochimie localise dans les tissus ?
Des constituants cellulaires ou tissulaires.
Quelle molécule la réaction PAS met-elle en évidence ?
Des résidus glucidiques.
Quelle molécule la réaction de Feulgen-Rossenbeck révèle-t-elle ?
L'ADN des noyaux.
Comment l'histoenzymologie localise-t-elle une enzyme ?
En incubant une coupe avec son substrat puis révélant le produit coloré.
Sur quoi repose la spécificité de l'immunohistologie ?
Sur l'interaction spécifique entre un antigène et un anticorps.
Quelle différence principale distingue le marquage immunohistologique direct de l'indirect ?
Le direct utilise un anticorps couplé directement à un marqueur, l'indirect utilise un anticorps primaire puis plusieurs secondaires marqués.
Comment l'hybridation in situ localise-t-elle une séquence d'acide nucléique ?
Grâce à une sonde simple brin marquée et complémentaire de la séquence recherchée.
Qu'est-ce que la cytométrie de flux permet de faire avec des cellules marquées ?
Différencier, compter et trier les cellules.
Quel est le rôle du laser en cytométrie de flux ?
Il excite les fluorochromes des anticorps fluorescents.
Comment les cellules sont-elles triées en cytométrie de flux ?
Un courant trie les gouttelettes selon leur fluorescence.
Comment fonctionne la centrifugation différentielle ?
Elle soumet un homogénat à des centrifugations successives de plus en plus rapides et longues.
Que contient le culot après centrifugation à 1000 g pendant 10 minutes ?
Les noyaux et les débris cellulaires.
Que sédimente une centrifugation à 20 000 g pendant 20 minutes ?
Les mitochondries, lysosomes et péroxysomes.
Quelle est la première étape pour fabriquer des anticorps monoclonaux ?
Immuniser une souris.
Comment obtient-on des cellules productrices d'anticorps monoclonaux après immunisation ?
En fusionnant les lymphocytes B avec des cellules de myélome.
Que dose l'ELISA indirecte ?
Un anticorps.
Comment l'anticorps est-il détecté dans une ELISA indirecte ?
Par un anticorps secondaire couplé à une enzyme produisant une coloration.
Que dose l'ELISA sandwich ?
Un antigène.
Comment l'antigène est-il capturé dans une ELISA sandwich ?
Par un anticorps fixé au fond d'un puits.
De quoi dépend l'intensité de la coloration dans un ELISA ?
De la quantité initiale d'antigène ou d'anticorps.
Comment la chromatographie sépare-t-elle les constituants d'un mélange ?
Grâce à une phase mobile et une phase fixe où les molécules migrent à des vitesses différentes.
Sur quel critère la chromatographie d'exclusion sépare-t-elle les protéines ?
Uniquement selon leur taille grâce à des billes poreuses.
Comment la chromatographie d'affinité sépare-t-elle les protéines ?
Selon leur reconnaissance spécifique par un ligand fixé à la colonne.
Quelle préparation subissent les protéines avant séparation en électrophorèse ?
Elles sont dénaturées par chauffage avec SDS et un agent réducteur.
Comment les protéines sont-elles séparées et révélées en électrophorèse ?
Elles migrent dans un gel de polyacrylamide sous courant puis sont révélées par coloration ou Western Blot.
Quelle est la valeur du pouvoir de résolution de l’œil humain ?
0,2 mm.
De quels facteurs dépend le pouvoir de résolution ?
De l’indice de réfraction, de la longueur d’onde et de la moitié de l’angle du cône lumineux.
Comment obtient-on principalement les échantillons tissulaires ?
Par biopsie ou résection lors d'une intervention ou prélèvement diagnostique.
Quelle est la première étape pour réaliser un étalement cellulaire ?
Déposer une goutte de sang ou suspension cellulaire sur une lame.
Quelle épaisseur doivent avoir les coupes en microscopie optique standard ?
Environ 5 μm.
Quelles colorations utilise-t-on en microscopie optique standard ?
L’éosine ou l’hémalun.
Quels filtres utilise le microscope à fluorescence pour sélectionner les longueurs d'onde ?
Un filtre d'excitation pour la lumière absorbée et un filtre d'arrêt pour la lumière émise.
Dans quelles longueurs d'onde la fluorescéine absorbe-t-elle et émet-elle ?
Elle absorbe dans le bleu et émet dans le jaune-vert.
Dans quelles longueurs d'onde la rhodamine absorbe-t-elle et émet-elle ?
Elle absorbe dans le vert et émet dans le rouge.
Comment est préparé l’échantillon pour le MEB et sous quelle tension fonctionne-t-il ?
Échantillon fixé, non coupé, recouvert de carbone, or ou platine, sous 1 à 40 kV.
Quel produit brun est observable dans la réaction à la peroxydase ?
Le produit formé par la transformation de la diaminobenzidine en présence de H2O2.
Pour quelles analyses la cytométrie de flux est-elle utilisée ?
Pour le typage des leucémies, la numération lymphocytaire, la formule du lavage broncho-alvéolaire et l’étude du cycle cellulaire et de la ploïdie.
Que produit une centrifugation à 80 000 g pendant 60 minutes sur le surnageant ?
Un culot de microsomes et un surnageant contenant principalement le cytosol.
Que permet de détecter l'ELISA dans des sérums concernant le VIH ?
Des anticorps dirigés contre des protéines de l'enveloppe du VIH.
Que se passe-t-il pour les protéines non reconnues en chromatographie d'affinité à pH 7 ?
Elles traversent la colonne sans fixation.
Comment détache-t-on les protéines reconnues de l'anticorps en chromatographie d'affinité ?
Avec un tampon acide à pH 3.
En quoi consiste le Western Blot ?
Transférer les protéines sur une membrane puis détecter un antigène avec un anticorps marqué spécifique.
Teste tes connaissances avec un QCM de 35 questions sur Techniques d’études de biologie cellulaire.
1. Quelle méthode localise des constituants cellulaires ou tissulaires en colorant les molécules par des réactions chimiques ?
2. Quelle séquence décrit correctement le tri des cellules en cytométrie de flux ?
Révisez le cours complet dans la fiche de révision de Techniques d’études de biologie cellulaire.
Voir la fiche →Importe ton cours et l'IA génère des flashcards en 30 secondes.
Générateur de flashcards