Fiche de révision : Anatomie et cytologie pathologiques

📋 Plan du Cours

1. Fondements et objectifs de l’anatomie pathologique
2. Prélèvements et cytologie conventionnelle
3. Cytologie en milieu liquide
4. Biopsies et traitement histologique
5. Colorations et immunohistochimie
6. Techniques complémentaires spécialisées
7. Déontologie et examens post mortem
8. Compte rendu et concertation diagnostique

📖 1. Fondements et objectifs de l’anatomie pathologique

🔑 Notions clés & Définitions

• Anatomie pathologique : Discipline médicale qui étudie les lésions associées ou provoquées par les maladies dans les organes, les tissus ou les cellules, à l’aide de techniques morphologiques macroscopiques et microscopiques.
• Lésion : Altération morphologique d’un organe décelable par tout moyen d’observation.

📝 Points essentiels

• 🔄 La démarche anatomopathologique suit ces étapes :

  1. Comparer les tissus normaux et pathologiques
  2. Confronter les lésions aux données cliniques, biologiques et d’imagerie
  3. Interpréter les éléments pour établir un diagnostic

• L’anatomie pathologique vise à établir un diagnostic et un pronostic, à évaluer l’effet des thérapeutiques et à contribuer aux protocoles de recherche sur leur efficacité et leurs effets secondaires.

💡 Astuce mémo

Comparer tissu normal et tissu lésé → corréler aux données cliniques → établir un diagnostic

📖 2. Prélèvements et cytologie conventionnelle

★ À maîtriser

• Les prélèvements cytologiques conventionnels peuvent être obtenus par :

  • Raclage
  • Aspiration
  • Desquamation
  • Apposition
  • Cytoponction à l’aiguille fine avec ou sans aspiration

• Les lésions solides sont prélevées par :

  • Ponction à l’aiguille avec ou sans aspiration
  • Empreinte
  • Grattage
  • Brossage
  • Frottis

• Pour obtenir un étalement cytologique monocellulaire, le produit déposé à une extrémité d’une lame propre et sèche est étalé uniformément avec une autre lame, sans retour en arrière, en dissociant les placards cellulaires sans les écraser.

📌 La cytologie conventionnelle est peu coûteuse et constitue la méthode de dépistage la plus commune, mais elle peut perdre des cellules sur la spatule ou la brosse et être gênée par le sang ou le mucus.

Compléments

• Les prélèvements cytologiques peuvent provenir de tissus superficiels accessibles ou de tissus profonds nécessitant souvent un repérage ou un guidage, notamment échographique, tomodensitométrique ou endoscopique.

• Les fixations et colorations cytologiques citées sont :

  • Séchage à l’air
  • Cytospray
  • Alcool-éther
  • May-Grünwald-Giemsa
  • Papanicolaou

• Les liquides cytologiques sont transmis rapidement au pathologiste, qui peut les centrifuger, étaler le culot sur des lames ou l’inclure en paraffine sous forme de cytobloc.

💡 Astuce mémo

Prélever → étaler → fixer → colorer

📖 3. Cytologie en milieu liquide

★ À maîtriser

• 🔄 La cytologie en milieu liquide se déroule ainsi :

  1. Prélever les cellules du col avec une brosse cervicale spéciale
  2. Les déposer dans un contenant hermétique avec un liquide de conservation
  3. Envoyer le contenant au laboratoire pour produire la lame

• La cytologie en milieu liquide peut améliorer la collecte cellulaire, réduire les frottis non interprétables et les lames inadéquates, uniformiser les lames, faciliter leur lecture et augmenter la productivité.

Compléments

• La cytologie en milieu liquide permet également la réalisation de tests de biologie moléculaire, notamment des tests HPV.

📌 La cytologie en milieu liquide a pour inconvénients majeurs le coût élevé des tests pour un laboratoire de cytopathologie et sa faible diffusion.

💡 Astuce mémo

Lames classiques étalées directement ; milieu liquide conservé en contenant hermétique

📖 4. Biopsies et traitement histologique

🔑 Notions clés & Définitions

• Biopsie : Prélèvement d’un échantillon de tissu sur un être vivant en vue d’un examen anatomopathologique.
• Biopsie-exérèse : Prélève la totalité d’une lésion à des fins diagnostique et thérapeutique et peut correspondre à l’exérèse partielle ou complète d’un ou plusieurs organes, séparément ou en monobloc.

★ À maîtriser

• Une biopsie peut être réalisée par ponction avec une aiguille ou un trocart, au cours d’une endoscopie à l’aide d’une pince, ou chirurgicalement après anesthésie locale ou générale.

📌 La valeur d’une biopsie dépend de sa taille, de son nombre et du choix d’une zone prélevée hors des territoires de nécrose ou d’hémorragie ; les tissus doivent être préservés de l’écrasement, de l’étirement et du bistouri électrique.

• Le traitement histologique comprend l’enregistrement, la fixation, l’examen macroscopique, la déshydratation, l’éclaircissement, l’imprégnation et l’inclusion en paraffine, la confection de coupes, leur étalement sur lames, la coloration et l’analyse microscopique.

• La fixation histologique est indispensable à la conservation de la morphologie cellulaire ; elle doit être immédiate ou très rapide, avec du formol tamponné à 10 %, en quantité égale à 10 fois le volume de la pièce.

Compléments

📌 Un prélèvement à l’état frais doit être acheminé sans délai au service d’anatomie pathologique, tandis qu’un prélèvement fixé peut être acheminé moins rapidement.

• La durée de fixation est de 4 à 6 heures pour les biopsies et d’au moins 24 à 48 heures pour les pièces opératoires.

💡 Astuce mémo

Enregistrer → fixer → examiner → inclure → couper → colorer

📖 5. Colorations et immunohistochimie

🔑 Notions clés & Définitions

• Immunohistochimie : Révèle sur une coupe histologique, par réaction antigène-anticorps, la présence de récepteurs antigéniques cytoplasmiques, membranaires ou intranucléaires.

★ À maîtriser

• La coloration de routine HES colore les noyaux en bleu avec l’hématoxyline et le cytoplasme en rose avec l’éosine.

• La coloration de routine permet le diagnostic de la grande majorité des lésions tumorales et non tumorales, tandis qu’environ 20 % des cas nécessitent des analyses spécialisées telles que des colorations histochimiques ou l’immunohistochimie.

• En cancérologie, l’immunohistochimie contribue au diagnostic et à la recherche du cancer primitif, à l’évaluation de facteurs pronostiques et prédictifs de réponse aux traitements, ainsi qu’à la détection de micrométastases et d’agents infectieux.

Compléments

• Le PAS met en évidence les mucines neutres, le glycogène, les membranes basales, ainsi que les filaments et spores mycéliens ; le bleu Alcian met en évidence le mucus acide.

• Le trichrome de Masson colore les fibres de collagène en vert avec le vert lumière ou en bleu avec le bleu d’aniline ; la coloration de la réticuline marque les fibres réticuliniques en noir et peut préciser l’architecture tumorale.

• Les colorations spéciales citées comprennent l’orcéine pour les fibres élastiques en brun, Perls pour le fer en bleu, Fontana pour les mélanocytes en noir, le rouge Congo pour l’amylose en rouge-orange avec biréfringence rouge-verte en lumière polarisée, Oil-red O pour les triglycérides et Ziehl-Neelsen pour les mycobactéries en rouge.

📖 6. Techniques complémentaires spécialisées

★ À maîtriser

• L’examen extemporané est réalisé en cours d’intervention sur un prélèvement frais, rapidement coupé par congélation au cryostat, afin d’orienter le diagnostic, d’évaluer les limites d’exérèse ou de modifier l’acte chirurgical.

• Les analyses de biologie moléculaire appliquées aux prélèvements tumoraux étudient le génome (ADN), le transcriptome (ARNm) ou le protéome, et peuvent aider au diagnostic tumoral ou à prédire la réponse à un traitement.

Compléments

• L’immunofluorescence directe met surtout en évidence les dépôts tissulaires d’immunoglobulines et de complément dans les biopsies cutanées et les biopsies rénales congelées, observées au microscope à fluorescence.

• La microscopie électronique repère certains micro-organismes et les détails de l’architecture cellulaire et tissulaire ; elle nécessite une fixation rapide au glutaraldéhyde, une inclusion en résine et des coupes semi-fines et ultrafines.

• L’hybridation in situ, notamment la FISH, détecte des séquences spécifiques d’ADN ou d’ARN à l’aide d’une sonde d’ADN double brin repérée par un marqueur fluorescent.

• L’expression génique en microarray classe des tumeurs selon leur gravité et leur pronostic en fonction des gènes qu’elles expriment.

📌 La culture cellulaire étudie in vitro le développement des cellules et leurs modifications morphologiques et fonctionnelles, et nécessite des prélèvements rapides et stériles.

📖 7. Déontologie et examens post mortem

🔑 Notions clés & Définitions

• Autopsie : Examen anatomopathologique pratiqué sur un cadavre, comprenant un examen macroscopique et, si nécessaire, un examen microscopique des tissus et des techniques complémentaires.

★ À maîtriser

📌 L’anatomopathologiste et le personnel de son service sont soumis au secret médical et ne communiquent les résultats qu’au médecin prescripteur.

📌 L’autopsie scientifique est demandée par un médecin ayant pris en charge le patient après une mort naturelle pour rechercher les causes du décès ou faire le bilan d’une maladie, tandis que l’autopsie médico-légale est demandée par un magistrat en cas de mort a priori suspecte pour rechercher les causes de la mort ou l’intervention d’un tiers.

Compléments

• L’autopsie scientifique est réalisée par un pathologiste, tandis que l’autopsie médico-légale est réalisée par un médecin légiste.

📌 La dissection anatomique est réalisée par des anatomistes à des fins d’enseignement et de recherche sur des personnes ayant donné leur corps à la science.

💡 Astuce mémo

Autopsie scientifique : médecin et mort naturelle ; autopsie médico-légale : magistrat et mort suspecte

📖 8. Compte rendu et concertation diagnostique

★ À maîtriser

• Le compte rendu anatomopathologique écrit décrit puis interprète les lésions et présente une conclusion synthétique sous forme de diagnostic lésionnel ou d’hypothèses diagnostiques selon les renseignements cliniques et les lésions observées.

📌 Le diagnostic morphologique doit être confronté aux données cliniques et, le cas échéant, aux données biologiques et d’imagerie.

Compléments

📌 Le compte rendu indique, si nécessaire et notamment pour les tumeurs, des éléments pronostiques et décrit les méthodes complémentaires utilisées ; l’usage de terminologies et de classifications nationales et internationales est recommandé.

• Des réunions de concertation pluridisciplinaire entre cliniciens et pathologistes confrontent le diagnostic morphologique aux données cliniques, d’imagerie et de biologie moléculaire, notamment dans les réseaux de prise en charge de pathologies ciblées ou en cancérologie.

💡 Astuce mémo

Confronter morphologie et données cliniques → conclure sur le diagnostic et le pronostic

📊 Tableaux de synthèse

Types d’examens post mortem