QCM : Méthodes d’analyses tissulaires — 29 questions

Explication

Le microtome réalise des coupes de paraffine d’environ 3 à 5 micromètres d’épaisseur. Les coupes inférieures à 100 nanomètres sont associées à l’ultramicrotome utilisé en microscopie électronique.

Explication

Dans $d = 0,61\frac{\lambda}{n\sin\alpha}$, diminuer $\lambda$ ou augmenter $\alpha$ réduit la distance minimale $d$ et améliore donc la résolution. Augmenter la longueur d’onde produit l’effet inverse sur la résolution.

Explication

En immunofluorescence, l’excitation à une longueur d’onde donnée est suivie d’une émission à une autre longueur d’onde, comme 488 nm puis 535 nm. Cette émission lumineuse se distingue d’un précipité insoluble produit par une réaction enzymatique.

Explication

L’œil humain distingue des détails d’environ 200 μm, tandis que le microscope optique atteint environ 200 nm. La confusion fréquente consiste à attribuer ces deux valeurs au mauvais instrument.

Explication

L’immunohistologie repose sur des anticorps dirigés contre des protéines, alors que l’hybridation in situ utilise des sondes complémentaires d’acides nucléiques. La confusion fréquente consiste à attribuer les anticorps à l’hybridation in situ, qui emploie des sondes nucléiques.

Explication

La microscopie optique utilise des lentilles en verre et règle le grossissement par changement d’objectif, tandis que la microscopie électronique utilise des lentilles électromagnétiques et une lentille projecteur. L’objectif ne règle donc pas le grossissement électronique selon cette distinction.

Explication

À l’échelle du foie, le microscope optique permet d’observer le lobule hépatique, les travées et les hépatocytes. L’œil observe l’organe et la lame, tandis que le microscope électronique révèle des structures plus fines comme les mitochondries et l’échelle nucléosomale.

Explication

La résolution correspond à la distance minimale qui sépare deux points pouvant encore être distingués comme distincts. Le grossissement augmente la taille apparente de l’image, mais n’améliore pas nécessairement la séparation de détails proches.

Explication

L’activité de la HRP ou de la phosphatase alcaline transforme la DAB en un précipité insoluble précisément au site où l’anticorps est fixé. La DAB ne sert pas à détecter directement l’ADN et la réaction ne repose pas sur une dissolution des protéines.

Explication

Le rayonnement traverse successivement la source, le condenseur, l’échantillon, l’objectif puis le projecteur. Le condenseur intervient avant l’échantillon, tandis que l’objectif forme ensuite l’image intermédiaire.

Explication

La microscopie optique forme l’image à partir de photons, alors que la microscopie électronique utilise un faisceau d’électrons. La nature différente du rayonnement employé contribue aux capacités de résolution distinctes des deux techniques.

Explication

La préparation suit l’ordre déshydratation, clarification, imprégnation en paraffine chaude, puis mise en bloc. Le xylène intervient après l’élimination de l’eau et rend le tissu compatible avec la paraffine.

Explication

En MET, les électrons traversent l’échantillon, ce qui produit une image en deux dimensions. La visualisation de surface en trois dimensions correspond à la MEB, et non à la MET.

Explication

En microscopie électronique, l’échantillon est fixé au glycéraldéhyde et au tétraoxyde d’osmium, inclus dans une résine dure, puis coupé à moins de 100 nanomètres avec un ultramicrotome. La paraffine et les coupes de 3 à 5 micromètres correspondent à la préparation histologique courante.

Explication

L’histologie analyse les tissus et leur organisation à partir de préparations observées, souvent après marquage. L’anatomopathologie s’intéresse plutôt aux modifications des tissus en situation pathologique.

Explication

En marquage indirect, l’anticorps secondaire repéré reconnaît l’anticorps primaire et plusieurs anticorps secondaires peuvent renforcer le signal. L’anticorps primaire assure la reconnaissance de la cible, mais ne porte pas nécessairement le repérage dans ce procédé.

Explication

Le critère d’Airy décrit la résolution par $d = 0,61\frac{\lambda}{n\sin\alpha}$. Les autres expressions inversent ou modifient la relation entre la longueur d’onde, l’indice et l’angle des rayons.

Explication

Le safran est le composant de la coloration HES qui colore surtout les tissus conjonctifs en jaune-orangé ou jaune-saumoné. L’hématoxyline intervient plutôt dans la coloration des noyaux et des structures basophiles.

Explication

L’hybridation in situ commence par la dénaturation de l’ADN, puis le refroidissement permet l’appariement des sondes fluorescentes avec leurs séquences complémentaires. Les anticorps et la DAB appartiennent aux méthodes immunohistologiques, tandis que des sondes non complémentaires ne permettent pas un ciblage spécifique.

Explication

La diffusion inélastique transfère de l’énergie à l’échantillon et est associée à une zone claire. La diffusion élastique dévie fortement l’électron sans transfert d’énergie et produit une zone sombre.

Explication

Dans la coloration HE, l’hématoxyline basique se fixe aux compartiments acides basophiles et les colore en bleu-violet, alors que l’éosine acide colore les compartiments basiques en rouge rosé. Inverser les affinités des deux colorants constitue la confusion classique entre basophilie et éosinophilie.

Explication

Une majorité de signaux rouges HER2 par rapport aux signaux verts du chromosome 17 indique une amplification de HER2. Des nombres comparables de signaux rouges et verts correspondent plutôt à l’absence d’amplification, et la FISH repose sur des sondes plutôt que sur des anticorps.

Explication

La fixation préserve le prélèvement en freinant la cytolyse, la nécrose et la contamination microbienne, tout en le durcissant. L’élimination de l’eau relève de la déshydratation, qui intervient ensuite dans la préparation en paraffine.

Explication

La microscopie électronique peut atteindre une résolution d’environ 0,2 nm et accéder à des structures proches de l’échelle atomique. Le microscope optique possède une résolution bien moins fine, de l’ordre de 200 nm.

Explication

Les replis tissulaires font partie des artéfacts de préparation, au même titre que certains résidus sanguins intravasculaires ou décollements tissulaires. Une architecture conservée ou une population identifiée par marquage décrit une caractéristique de l’échantillon plutôt qu’une altération technique.

Explication

En microscopie optique, l’échantillon peut être observé sans déshydratation et de manière non destructrice. La microscopie électronique exige au contraire une déshydratation et soumet l’échantillon à un faisceau destructeur.

Explication

T. Schwann et R. Virchow sont associés à la théorie cellulaire et sont présentés comme les deux pères de l’histologie. Golgi est plutôt associé à l’appareil de Golgi, tandis que Malpighi appartient aux débuts de l’observation microscopique des tissus.

Explication

La MEB utilise les électrons réfléchis sur la surface de l’échantillon et permet une visualisation en trois dimensions avec une résolution d’environ $1\,\text{nm}$. La MET repose au contraire sur la transmission des électrons à travers l’échantillon.

Explication

Un artéfact est une modification introduite par les étapes techniques de préparation et ne doit pas être prise pour une structure tissulaire réelle. Une lésion biologique ou un signal moléculaire spécifique relève de l’échantillon ou de son marquage, et non d’un artéfact de préparation.