Fiche de révision : Préparation histologique des tissus

📋 Plan du Cours

1. Prélèvement et fixation des tissus
2. Lavage et préparation du tissu
3. Inclusion et formation des blocs
4. Coupe et collage des échantillons
5. Déparaffinage et réhydratation
6. Coloration et montage des lames

📖 1. Prélèvement et fixation des tissus

🔑 Notions clés & Définitions

• Fixation : Préserve la structure cellulaire et évite sa dégradation par coagulation des protéines ou précipitation.

★ À maîtriser

• Les pièces tissulaires sont immergées dans une solution fixatrice, telle que le formol ou un mélange de fixation, dont le volume est au moins égal à vingt fois celui des pièces.

Compléments

• L’animal est sacrifié puis rapidement disséqué afin de prélever l’organe ou le morceau tissulaire requis, qui est immédiatement placé dans une boîte de Pétri pour éviter sa détérioration.

📖 2. Lavage et préparation du tissu

★ À maîtriser

• La préparation tissulaire est lavée à l’eau courante pour arrêter l’effet du fixateur, déshydratée par des bains d’alcool de concentrations croissantes, puis éclaircie avec un solvant tel que le xylène ou le toluène.

Compléments

• La déshydratation fait passer l’échantillon d’alcool à 70° ou 90° jusqu’à l’alcool absolu à 100°.

• L’éclaircissement rend le tissu transparent et capable d’absorber le milieu d’inclusion.

💡 Astuce mémo

Laver, déshydrater, éclaircir : l’eau sort, le solvant rend le tissu transparent.

📖 3. Inclusion et formation des blocs

📝 Points essentiels

• Pour inclure le tissu, on l’imprègne complètement dans un milieu soluble, notamment de la paraffine chaude, puis on le verse dans un moule spécial où il se solidifie et s’homogénéise.

📖 4. Coupe et collage des échantillons

★ À maîtriser

• Un microtome découpe le tissu en fines tranches, qui sont déposées sur des lames.

Compléments

• Pour coller une coupe, on l’étale dans un bain d’eau puis on la récupère dans un bain de gélatine, d’albumine ou sur une lame chauffante.

📖 5. Déparaffinage et réhydratation

📝 Points essentiels

• Avant la coloration, la lame est déparaffinée puis réhydratée par des bains d’alcool de concentrations décroissantes, suivis d’un bain d’eau distillée.

💡 Astuce mémo

Avant l’inclusion, l’alcool monte jusqu’à 100 % ; avant coloration, il redescend vers l’eau.

📖 6. Coloration et montage des lames

★ À maîtriser

• La lame est montée définitivement avec un milieu de montage et une lamelle, puis observée au microscope optique.

Compléments

📌 La coloration peut être spécifique ou différentielle, par exemple à l’hématoxyline et à l’éosine pour cette dernière.