Fiche de révision : Culture cellulaire et applications

📋 Plan du Cours

1. Types de cultures cellulaires
2. Cocultures et interactions cellulaires
3. Applications des cultures cellulaires
4. Conditions de culture
5. Analyses des cellules cultivées

📖 1. Types de cultures cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Culture cellulaire : Multiplication de cellules jusqu’à ce que leur densité devienne trop importante.
• Culture primaire : Première culture réalisée après l’isolement des cellules, en fonction ou sur un support.
• Ligne cellulaire : Population homogène de cellules établie après de multiples divisions successives, avec en théorie une capacité limitée de division.
• Culture secondaire : Issue d’un premier passage depuis une culture primaire et pouvant nécessiter de décoller les cellules par trypsinisation.

★ À maîtriser

• Lorsque la culture atteint la cofluence, c’est-à-dire qu’il n’y a plus de place disponible, les cellules sont transférées dans un autre flacon ou support par un passage.

Compléments

• Les cellules d’une ligne cellulaire peuvent être des cellules cancéreuses spontanément immortelles ou des cellules rendues immortelles par traitement.

💡 Astuce mémo

Primaire → passage → secondaire → ligne cellulaire

📖 2. Cocultures et interactions cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Coculture : Culture simultanée de plusieurs types cellulaires afin de reproduire des interactions existant in vivo.
• Insert : Dispositif séparant les cellules dans des compartiments différents baignés par le même milieu, avec une communication possible par le passage de petites molécules ou de cellules.
• Interaction continue : L’interaction continue sépare les cellules dans des compartiments différents et ne permet une communication qu’entre les milieux à travers une membrane qui sélectionne ce qui passe.

📝 Points essentiels

📌 La culture directe met ensemble deux types cellulaires dans le même compartiment, ce qui permet leur contact mais rend difficile leur récolte séparée.

• Dans un milieu conditionné, le second type cellulaire est cultivé sur un milieu où le premier type a été cultivé puis retiré, de sorte que les facteurs du premier type restent sans mélange des cellules.

💡 Astuce mémo

Mélange direct des cellules versus séparation avec communication

📖 3. Applications des cultures cellulaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Organoïde : Structure rappelant un organe et produite in vitro par la mise en culture d’un seul type cellulaire.

★ À maîtriser

• Les cultures cellulaires sont utilisées en recherche fondamentale, en médecine et dans l’industrie pharmaceutique.

• Les applications médicales comprennent:

  • Greffes
  • Dépistage de maladies génétiques
  • Thérapie génique
  • Fécondation in vivo
  • Ingénierie tissulaire

• L’industrie pharmaceutique utilise les cultures cellulaires pour les études toxicologiques et pharmacologiques de nouvelles molécules ainsi que pour produire des substances à usage thérapeutique et des vaccins.

Compléments

• Les organoïdes sont utilisés pour comprendre des maladies et réaliser des tests pharmacologiques.

📖 4. Conditions de culture

★ À maîtriser

• La culture cellulaire utilise notamment une température de 37 °C, une humidité indiquée à 84 %, un pH de 7,4 et un apport d’oxygène contrôlé selon les cellules cultivées.

📌 La stérilité du milieu est maintenue par une manipulation sous hotte et par l’utilisation d’antibiotiques et d’antifongiques.

• Les conditions nutritives et le support de culture doivent être adaptés, avec un support possible en deux dimensions ou en trois dimensions.

Compléments

• Un bioréacteur peut être utilisé pour créer des contraintes mécaniques existant in vivo, notamment le cisaillement et la pression.

📖 5. Analyses des cellules cultivées

📝 Points essentiels

📌 Les tests sur cellules lysées sont réalisés après destruction des cellules, dont il ne reste que des morceaux, et comprennent notamment le Western blot et la RT-PCR.

• Les tests sur cellules vivantes comprennent:

  • Imagerie
  • Tests fonctionnels
  • Tests enzymatiques

• Les tests sur cellules fixes comprennent:

  • Coloration
  • Immunohistochimie ou immunocytochimie
  • Hybridation in situ
  • CFM

💡 Astuce mémo

Lysées = morceaux, vivantes = fonctions, fixes = cellules arrêtées mais mortes

📊 Tableaux de synthèse

Types de tests cellulaires