Quelles sources et lentilles distinguent les microscopes optique et électronique ?
L’optique utilise des photons et des lentilles en verre ; l’électronique, des électrons et des lentilles électromagnétiques.
Quel est le rôle de l’objectif dans un microscope optique ?
Il agrandit l’objet.
Que fait la lumière lors d’une réflexion ?
Elle est renvoyée dans son milieu d’origine.
Qu’est-ce que le pouvoir de résolution ?
La capacité à distinguer les images de deux points aussi proches que possible.
Quelle distance minimale sépare deux points résolus en microscopie optique ?
Environ 0,2 μm.
Quelles étapes comprend la préparation d’un tissu en microscopie optique ?
La fixation, l’inclusion, la coupe au microtome, la coloration et le montage.
Que prévient la fixation tissulaire après la mort ?
L’autolyse et la putréfaction bactérienne.
À quelle température la paraffine se solidifie-t-elle ?
À température ambiante.
Quel est l’effet de la coloration en microscopie optique ?
Elle augmente le contraste et révèle les composants cellulaires.
Quelle couleur l’hématoxyline donne-t-elle au noyau dans la coloration H&E ?
Violet ou bleu.
En épifluorescence, sur quel fond l’image se forme-t-elle ?
Sur fond noir.
Qu’émet-on pour former l’image en épifluorescence ?
La lumière émise par des fluorochromes convenablement excités.
Que fait un fluorophore après avoir absorbé la lumière d’excitation ?
Il émet spontanément et instantanément une lumière fluorescente.
Qu’est-ce que la fluorescence primaire des structures biologiques ?
L’émission naturelle de structures comme les mitochondries et les lysosomes.
Comment la microscopie confocale recueille-t-elle le signal fluorescent ?
Un laser focalisé excite les fluorochromes en un point et le signal émis dans le plan focal est recueilli.
Quelle longueur d’onde caractérise les électrons en microscopie électronique par rapport à la lumière blanche ?
Elle est plus courte que celle de la lumière blanche.
Quel pouvoir de résolution la microscopie électronique peut-elle atteindre ?
Moins de 0,5 nm.
Quel grossissement maximal la microscopie électronique peut-elle atteindre ?
800 000 fois.
Quels éléments la microscopie électronique peut-elle rendre visibles ?
Les organites et les assemblages supramoléculaires.
À quelle température la résine d’inclusion est-elle polymérisée en microscopie électronique ?
À 60 °C.
Comment les électrons forment-ils une image en microscopie électronique à transmission ?
Ils traversent l’échantillon, et les régions plus épaisses apparaissent plus sombres.
Quels critères morphologiques sont étudiés à l’échelle tissulaire et cellulaire ?
L’affinité tinctoriale, l’aspect et la position du noyau, la forme et l’organisation des cellules, leurs liens avec les cellules voisines et la matrice extracellulaire, ainsi que la cellularité.
Que désigne la cellularité en morphologie tissulaire ?
Le rapport entre les cellules et la matrice extracellulaire.
Quels critères morphologiques sont étudiés à l’échelle intracellulaire ?
L’abondance des organites, les vésicules ou granules, le nucléole et la chromatine.
Qu’examine-t-on concernant les organites à l’échelle intracellulaire ?
Leur abondance.
Quel lien existe entre les structures cellulaires et tissulaires et leurs fonctions ?
Elles sont étroitement liées à leurs fonctions.
Qu’est-ce que la culture cellulaire ?
Une technique de laboratoire maintenant des cellules vivantes hors de leur organisme.
Qu’est-ce qui distingue les cellules épithéliales des cellules mésenchymateuses ?
Les cellules épithéliales sont plates ou polygonales et peu entourées de substance intercellulaire.
Quelles propriétés caractérisent les cellules de culture primaire ?
Elles sont saines, mortelles et non tumorigènes.
De quelles sources obtient-on des cellules libres et circulantes ?
Du sang périphérique, de la moelle osseuse ou de liquides physiologiques.
Comment obtient-on des cellules en cohésion issues de tissus solides ?
Par biopsie ou dissection, suivie d’une dissociation mécanique, chimique ou enzymatique.
Comment sépare-t-on les populations cellulaires par adhérence à un support ?
On élimine les cellules non adhérentes après 24 heures.
De quelle origine provient la lignée HeLa, et dans quelles conditions le prélèvement a-t-il été fait ?
Elle provient d’une métastase prélevée sans consentement chez une patiente afro-américaine atteinte d’un cancer du col de l’utérus.
Quel record historique détient la lignée HeLa parmi les lignées humaines ?
C’est la première lignée cellulaire immortelle d’origine humaine jamais établie.
Quels éléments de base contient un milieu de culture ?
Une source de carbone, des ions minéraux, des acides aminés, de l’eau et un tampon au bicarbonate de sodium et au dioxyde de carbone.
Quel rôle les facteurs mitogènes du sérum jouent-ils dans la division cellulaire ?
Ils déclenchent la division cellulaire.
Quelles formes de culture conviennent aux cellules non adhérentes, adhérentes en monocouche et adhérentes en 3D ?
Suspension liquide, monocouche et suspension gélifiée d’agar ou de collagène, respectivement.
Qu’est-ce que la confluence dans une culture cellulaire ?
Le stade où le tapis cellulaire recouvre toute la surface disponible.
Qu’est-ce que le repiquage cellulaire ?
Le transfert des cellules dans de nouveaux récipients contenant un milieu neuf, à une densité inférieure à celle de la confluence.
À quelle confluence repique-t-on une lignée cellulaire ?
Entre 80 et 90 % de confluence.
Quel est le principe de séparation de la chromatographie liquide ?
Les composants migrent à des vitesses différentes selon leur affinité pour les phases mobile et stationnaire.
Comment la chromatographie d’affinité retient-elle une protéine ?
Par son interaction biologique avec un ligand spécifique fixé par covalence à une matrice inerte.
Selon quel critère la filtration sur gel sépare-t-elle les protéines ?
Selon leur masse moléculaire.
Quel rôle joue le gel en polyacrylamide lors de l’électrophorèse ?
Il agit comme un filtre moléculaire pour séparer les protéines chargées sous champ électrique.
Comment le Western blot identifie-t-il une protéine ?
À l’aide d’un anticorps spécifique.
Que cherche à déterminer l’analyse des acides nucléiques ?
Le contenu informationnel de l’ADN et le niveau d’expression d’un gène dans une condition donnée.
Quelles étapes principales comprend l’extraction d’ADN ou d’ARN ?
La lyse cellulaire, l’élimination des protéines, la précipitation, la digestion enzymatique et l’élution.
Que fait la PCR à une séquence d’ADN cible ?
Elle l’amplifie exponentiellement par des cycles de température répétés.
Quelles sont les trois étapes d’un cycle de PCR ?
La dénaturation, l’hybridation des amorces et l’extension de la chaîne.
Quels objets le microscope optique permet-il notamment d’observer ?
Des tissus, des cellules, des hématies et des bactéries.
Quel est le rôle du diaphragme dans un microscope optique ?
Il règle la quantité de lumière.
Quelle formule exprime la distance minimale de résolution en fonction de et de ?
Quelles concentrations de formaldéhyde servent à fixer les tissus en microscopie optique ?
4 % ou 10 %.
Quelle épaisseur ont les coupes destinées à la microscopie optique ?
2 à 5 μm.
Quelle couleur le PAS donne-t-il aux glucides en coloration histochimique ?
Fuchsia.
D’où provient la protéine fluorescente verte GFP ?
De la méduse Aequorea victoria.
Que permet le couplage de la fluorescéine et de la rhodamine dans une même cellule ?
Il permet de suivre leurs répartitions simultanément.
Qu’est-ce qui produit un bruit de fond important lors du suivi de fluorochromes ?
L’épaisseur de l’objet et l’excitation des fluorochromes sur le trajet lumineux.
Quelle épaisseur ont les coupes destinées à la microscopie électronique ?
De 60 à 100 nm.
Quels métaux lourds peuvent colorer un échantillon en microscopie électronique ?
Le plomb, l’uranium ou le tungstène.
Quel modèle la culture cellulaire permet-elle d’obtenir ?
Un modèle proche de la cellule réelle.
Quelle interaction la culture cellulaire fait-elle perdre avec le microenvironnement tissulaire ?
Les interactions avec les cellules du stroma, les vaisseaux et les cellules immunitaires.
Comment les cellules de type lymphoblaste se présentent-elles en culture ?
Elles sont sphériques et restent en suspension comme cellules libres et circulantes.
De quoi les cellules primaires ont-elles besoin pour croître en culture ?
D’un facteur de croissance adapté et de boîtes prétraitées avec des protéines matricielles.
Quel phénomène génétique entraîne une dégradation lente des fonctions de l’organisme ?
La sénescence.
Quelles propriétés font des cellules libres et circulantes une source de matériel ?
Elles sont relativement pures, accessibles et riches en matériel.
Quel type de population la dissociation de tissus solides permet-elle d’obtenir ?
Une population cellulaire hétérogène.
Comment commence la préparation d’une culture primaire de kératinocytes ?
Par un prélèvement cutané fragmenté au scalpel.
Sur quel support cultive-t-on les kératinocytes après leur digestion et leur numération ?
Sur une couche de collagène.
À quelles recherches thérapeutiques les cultures de kératinocytes peuvent-elles contribuer ?
À la recherche en pharmacologie, toxicologie ou physiopathologie cutanée.
À quelles avancées les cellules HeLa ont-elles contribué ?
Au développement du premier vaccin antipoliomyélitique, à la fécondation in vitro et à l’étude du SIDA et du cancer.
Quel processus les lignées HeLa et HEK293 servent-elles notamment à étudier ?
Le trafic intracellulaire.
Quel processus les lignées RPE1 et PtK1 servent-elles notamment à étudier ?
La progression du cycle cellulaire.
Quelle propriété cellulaire la lignée MDCK sert-elle notamment à étudier ?
La polarité.
Quels matériaux l’ATCC acquiert-elle, authentifie-t-elle et distribue-t-elle pour la recherche ?
Des micro-organismes, des lignées cellulaires et d’autres matériaux pour la recherche en sciences de la vie.
Combien de lignées cellulaires la collection de l’ATCC compte-t-elle ?
Plus de 4 000 lignées cellulaires humaines, animales et végétales.
À quoi servent notamment les ions minéraux du milieu de culture ?
Ils servent de cofacteurs enzymatiques et contribuent à une osmolarité identique à celle du sérum physiologique.
Quel indicateur coloré révèle les variations du pH d’un milieu de culture ?
Le rouge de phénol.
Quel antifongique peut être ajouté au milieu de culture ?
L’amphotéricine B.
À quelle concentration le sérum de veau fœtal est-il utilisé ?
À 10 %.
Quelle enzyme l’alpha-1-antitrypsine du sérum inhibe-t-elle ?
La trypsine.
Comment le sérum est-il décomplémenté ?
Par chauffage pendant 30 minutes à 56 °C.
Quelle culture représente le mieux les conditions physiologiques du corps : 2D ou 3D ?
La culture en 3D.
Combien de temps dure environ une division cellulaire ?
De 4 à 24 heures.
À quelle fréquence faut-il changer le milieu de croissance cellulaire ?
Tous les 2 à 3 jours.
Quel effet le contact entre cellules peut-il avoir dans un tapis cellulaire ?
Il peut inhiber le cycle cellulaire.
De quels facteurs dépend la vitesse de migration en gel de polyacrylamide ?
De la taille, de la forme et de la densité de charge des protéines, ainsi que de la réticulation du gel.
Vers quelle électrode les protéines chargées négativement migrent-elles en électrophorèse sur gel de polyacrylamide ?
Vers l’anode positive.
À quoi servent les marqueurs de poids moléculaire en analyse des protéines ?
À estimer le poids moléculaire de la protéine étudiée.
Combien de gènes peuvent changer d’expression après une modification de l’environnement ?
Plusieurs dizaines ou plusieurs centaines de gènes.
Comment les amorces de PCR se fixent-elles à l’ADN cible ?
Elles s’hybrident spécifiquement par complémentarité des bases à l’un des deux brins.
Quel rôle joue l’ADN polymérase lors d’une PCR ?
Elle synthétise un nouveau brin à partir du brin matrice après fixation à une amorce.
Quels deux éléments permettent l’automatisation de la PCR ?
Les thermocycleurs et la Taq Polymerase thermostable.
Teste tes connaissances avec un QCM de 50 questions sur Culture cellulaire et méthodes d’analyse.
1. Pour observer une cellule avec un microscope optique plutôt qu’un microscope électronique, quelle combinaison caractérise l’instrument optique ?
2. Dans un montage d’optique, un rayon lumineux est dévié lorsqu’il traverse un échantillon transparent. Quel phénomène observe-t-on ?
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