QCM : Méthodes d’étude en biologie cellulaire — 20 questions

Explication

Une lignée limitée possède une durée de vie déterminée et finit par dégénérer après plusieurs passages, contrairement à une lignée immortelle. La confusion vient de l’inversion des propriétés respectives des deux types de lignées.

Explication

Les cellules cancéreuses, les cellules transformées par un virus comme SV40 et les cellules génétiquement modifiées font partie des cellules immortelles. Les autres catégories regroupent des cellules définies par leur origine, leur morphologie ou leur mode de culture, sans indiquer leur immortalité.

Explication

Les cellules circulantes comme les lymphocytes sont non adhérentes, alors que les cellules d’organes sont généralement adhérentes. L’adhérence ne dépend donc pas du simple fait d’être cultivée, mais du type cellulaire et de son origine.

Explication

La culture doit reproduire plusieurs paramètres physiologiques tout en utilisant des contenants stériles et un milieu adapté. Une forte teneur en nutriments ne suffit pas si la température, le pH, l’oxygène ou l’osmolarité ne sont pas maîtrisés.

Explication

Le milieu minimum fournit des éléments définis comme l’eau, le glucose, les sels minéraux et une source d’azote, tandis que le milieu empirique est enrichi et adapté à une lignée. La confusion consiste à attribuer au milieu minimum les composants biologiques complexes du milieu empirique.

Explication

La biopsie est d’abord dissociée par un cocktail enzymatique, puis la suspension est cultivée dans un milieu enrichi avant la prolifération et la sélection clonale. La biopsie produit donc d’abord plusieurs populations cellulaires, et non un clone déjà isolé.

Explication

Le Ficoll associé à la centrifugation réalise une séparation fondée sur la densité, puis les anticorps couplés à des billes magnétiques ou la cytométrie en flux permettent d’isoler des populations particulières. Le Ficoll ne reconnaît pas directement les marqueurs cellulaires.

Explication

La congélation repose sur un comptage préalable, l’utilisation d’environ un million de cellules par ampoule avec 10 % de DMSO et une conservation dans l’azote liquide ou un congélateur à très basse température. Le bleu de trypan sert plutôt à évaluer la viabilité, et une température de 37 °C ne convient pas au stockage congelé.

Explication

La CI50 correspond à la concentration d’une molécule qui inhibe 50 % de l’effet étudié et sert donc à évaluer sa cytotoxicité. La concentration maximale tolérée décrit une limite de tolérance, mais ne mesure pas directement cette inhibition à 50 %.

Explication

Les lignées cellulaires permettent d’étudier le cycle cellulaire, le métabolisme et la régulation génique, ainsi que des applications médicales comme les greffes et la thérapie génique. La vitesse de migration et la toxicité moléculaire correspondent à des mesures expérimentales particulières, pas à l’ensemble des applications citées.

Explication

En cytométrie, les cellules passent une à une devant un laser, de sorte que chaque événement correspond à une cellule analysée. Le déplacement à travers une membrane poreuse relève d’un test de migration, tandis que la coloration mesurée au spectrophotomètre relève d’un dosage enzymatique.

Explication

L’immunohistochimie repose sur un anticorps couplé à une enzyme observé en lumière directe, tandis que l’immunofluorescence utilise un anticorps couplé à un fluorophore observé en fluorescence. Inverser l’enzyme et le fluorophore confond précisément les deux techniques.

Explication

L’ELISA sandwich est conçu pour doser un antigène, tandis que l’ELISA indirect recherche ou dose un anticorps. La confusion vient de l’inversion des cibles entre les deux formats, et non d’une mesure d’enzyme ou de fluorophore.

Explication

L’anticorps secondaire couplé à une molécule réactive avec un substrat permet la révélation colorée du dosage. L’intensité de cette coloration est proportionnelle à la concentration de la protéine cible, tandis qu’une gamme étalon sert à la quantification mais ne constitue pas le rôle de l’anticorps secondaire.

Explication

À $1\,000\,G$, les éléments volumineux et denses, comme les cellules, les noyaux et le cytosquelette, sédimentent dans le culot. Les ribosomes, beaucoup plus petits, nécessitent une force centrifuge bien supérieure, proche de $150\,000\,G$.

Explication

La centrifugation dépend notamment de la taille et de la densité : les petits éléments ou ceux qui sont peu denses sédimentent plus lentement. La libération par détergent et la charge électrique relèvent d’autres méthodes expérimentales, pas de cette règle de fractionnement.

Explication

La chromatographie d’affinité exploite une interaction spécifique entre une molécule et un ligand fixé sur la colonne. La filtration sur gel sépare selon la taille, tandis que l’échange d’ions repose sur la charge.

Explication

Le Western blot libère d’abord les protéines, les sépare dans un gel d’acrylamide, les transfère vers une membrane, puis les révèle avec des anticorps et par chimiluminescence. L’électrophorèse précède donc le transfert, qui ne constitue pas une étape de révélation.

Explication

Des quantités déposées équivalentes permettent d’interpréter les différences d’intensité des bandes sans confondre variation biologique et différence de chargement. Lors du transfert, les protéines migrent du pôle négatif vers le pôle positif, et non dans la direction inverse.

Explication

L’expérimentation animale requiert un accord du ministère, une habilitation et un examen par des comités d’éthique avant sa mise en œuvre. Une validation scientifique seule ou une démarche effectuée après l’expérience ne répond pas à l’ensemble de ces exigences.