Fiche de révision : Introduction à l’histologie

📋 Plan du Cours

1. Définition et organisation des tissus
2. Classification des tissus fondamentaux
3. Du prélèvement à l’imagerie
4. Pouvoir séparateur et microscopes
5. Études in situ et moléculaires
6. Préparation technique des tissus
7. Interprétation des coupes histologiques
8. Instruments et localisation moléculaire
9. Les quatre tissus fondamentaux
10. Structure, fonction et intérêt médical

📖 1. Définition et organisation des tissus

🔑 Notions clés & Définitions

• Tissu : Formé de cellules partageant une différenciation commune et associées à une matrice extracellulaire en proportion variable.

★ À maîtriser

📌 Le tissu épithélial contient beaucoup de cellules jointives et très peu de matrice extracellulaire, tandis que le tissu conjonctif contient peu de cellules dispersées dans une matrice extracellulaire abondante.

• 🔄 L’organisation du vivant suit la séquence suivante:
  1. Les cellules forment des tissus
  2. Les tissus s’associent en organes
  3. Les organes et tissus associés forment des appareils ou des systèmes
  4. Les appareils et systèmes constituent l’être vivant

📌 L’épithélium repose sur du tissu conjonctif, les nerfs périphériques et les vaisseaux cheminent dans le tissu conjonctif, et le tissu musculaire est entouré de tissu conjonctif.

Compléments

📌 Les cellules épithéliales reposent sur une lame basale qui les sépare du tissu conjonctif sous-jacent.

💡 Astuce mémo

Épithélium : beaucoup de cellules ; conjonctif : beaucoup de matrice

📖 2. Classification des tissus fondamentaux

🔑 Notions clés & Définitions

• Tissu sanguin : Classé à part, car il dérive du tissu conjonctif par une origine mésenchymateuse commune et possède une matrice extracellulaire constituée par le plasma.

📝 Points essentiels

• Les quatre tissus fondamentaux retenus sont:
  • le tissu épithélial
  • le tissu conjonctif au sens large
  • le tissu musculaire
  • le tissu nerveux

💡 Astuce mémo

É-C-M-N : épithélial, conjonctif, musculaire, nerveux

📖 3. Du prélèvement à l’imagerie

🔑 Notions clés & Définitions

• Pouvoir séparateur : La plus petite distance qui doit exister entre deux points pour qu’ils puissent être distingués séparément.

★ À maîtriser

• Le pouvoir séparateur de l’œil nu est de 0,2 mm, tandis qu’une cellule mesure environ 5 à 20 micromètres.

• 🔄 La préparation d’un organe épais nécessite de:

  1. le fixer
  2. l’inclure
  3. le couper en tranches très fines
  4. l’observer au microscope

Compléments

• Les cellules vivantes peuvent être observées ex vivo ou en culture in vitro à 37°C en atmosphère humidifiée, généralement avec un microscope inversé à contraste de phase.

• Le bleu de trypan pénètre dans les cellules mais est rejeté par les cellules vivantes, si bien qu’il colore uniquement les cellules mortes en bleu.

💡 Astuce mémo

Vivant → frottis → empreinte → préparation à plat → coupe

📖 4. Pouvoir séparateur et microscopes

★ À maîtriser

• Le microscope optique possède un pouvoir séparateur de 200 nm, soit 0,2 µm, et permet d’observer les cellules et les gros organites.

• Le microscope électronique possède un pouvoir séparateur de 0,2 nm et permet d’observer les organites, leur intérieur et certaines molécules.

• En microscopie à fluorescence, un fluorochrome est excité à une longueur d’onde donnée puis émet une lumière à une longueur d’onde supérieure, séparée par un miroir dichroïque.

📌 La microscopie électronique à transmission (MET) observe les structures traversées par les électrons, tandis que la microscopie électronique à balayage (MEB) observe les surfaces grâce aux électrons réfléchis.

Compléments

• Les coupes destinées à la microscopie électronique à transmission mesurent entre 50 et 80 nm et sont obtenues avec un ultramicrotome muni de couteaux en diamant.

💡 Astuce mémo

Optique : lumière et cellules ; électronique : électrons et ultrastructure

📖 5. Études in situ et moléculaires

🔑 Notions clés & Définitions

• Histochimie : Localise des constituants biochimiques grâce à des réactions chimiques visibles dans le tissu.
• Histoenzymologie : Détecte une activité enzymatique en révélant le produit de l’action d’une enzyme sur un substrat donné, et non l’enzyme elle-même.
• Immunohistologie : Utilise un anticorps monoclonal dirigé contre une protéine et couplé à un marqueur détectable.
• Hybridation in situ : Utilise des sondes nucléiques constituées de segments d’ADN qui s’hybrident avec leurs séquences complémentaires d’ADN ou d’ARN dans la cellule.

📝 Points essentiels

• Le réactif de Schiff devient rouge en présence d’aldéhydes, et la coloration PAS permet de colorer les glucides.

💡 Astuce mémo

Histochimie → histoenzymologie → immunohistologie → hybridation in situ

📖 6. Préparation technique des tissus

★ À maîtriser

• 🔄 La préparation histologique suit les étapes de:
  1. fixation
  2. inclusion
  3. coupe
  4. coloration
  5. montage

📌 La fixation préserve les structures biologiques et empêche leur dégradation, mais le choix du fixateur dépend de l’analyse recherchée.

• 🔄 Pour une inclusion classique en paraffine:

  1. Le tissu est déshydraté dans des bains d’alcool à 70°, 95° et 100°
  2. Il est passé dans du toluène
  3. Il est immergé dans de la paraffine chaude à 56°C
  4. Le refroidissement forme un bloc solide

• La congélation dans l’azote liquide à -196°C permet de durcir rapidement le tissu et de préserver certaines propriétés antigéniques ou lipidiques.

• Le microtome réalise des coupes de 2 à 10 micromètres avec un couteau en acier, tandis que le cryomicrotome est utilisé pour les tissus congelés.

• La coloration hématéine-éosine colore le noyau en violet et le cytoplasme en rose, tandis que le trichrome de Masson colore le collagène en vert, le noyau en brun et le cytoplasme en rouge.

Compléments

• Le liquide de Bouin, composé de formol et d’acide picrique, préserve bien les structures mais génère une autofluorescence incompatible avec les techniques de fluorescence.

💡 Astuce mémo

Fixer → inclure → couper → colorer → monter

📖 7. Interprétation des coupes histologiques

★ À maîtriser

📌 Une lame histologique est une tranche de 2 à 10 micromètres réalisée selon un plan de coupe qui détermine l’aspect observé d’un objet tridimensionnel.

• L’absence d’un noyau sur une coupe ne signifie pas qu’il est absent du tissu, car le plan de coupe peut ne pas traverser le noyau.

• Les artefacts sont des images ou des résultats artificiels produits par les manipulations de préparation et pouvant induire en erreur.

Compléments

• Lors de la préparation, le mucinogène des cellules caliciformes et les lipides peuvent être extraits, créant des espaces clairs qui paraissent vides sur la coupe.

💡 Astuce mémo

Une tranche 2D comme une fenêtre déformante sur un objet 3D

📖 8. Instruments et localisation moléculaire

★ À maîtriser

• La MET observe l’ultrastructure et les organites, tandis que la MEB observe la surface et le relief des cellules.

Compléments

• 🔄 L’autoradiographie permet de suivre le déplacement de macromolécules en:

  1. injectant des molécules radioactives
  2. réalisant des coupes à différents moments
  3. observant leur localisation
  4. reconstituant leur déplacement cellulaire

• La cytométrie en flux analyse plusieurs milliers de cellules en suspension, la cytométrie en image quelques dizaines de cellules adhérentes et la microscopie confocale une à dix cellules.

💡 Astuce mémo

MET : traverse ; MEB : réfléchit

📖 9. Les quatre tissus fondamentaux

★ À maîtriser

• Les quatre tissus fondamentaux remplissent les fonctions suivantes:

  • épithélium : tissu des surfaces
  • tissu conjonctif : tissu des matériaux extracellulaires
  • tissu musculaire : tissu du mouvement de masse
  • tissu nerveux : tissu de la communication rapide à longue distance

• La grille de lecture d’un tissu examine:

  • son origine embryologique
  • ses cellules et sa matrice extracellulaire
  • son architecture
  • ses fonctions
  • son organe repère
  • ses détails spécifiques

📌 L’épithélium possède beaucoup de cellules jointives et polarisées avec peu de matrice extracellulaire, tandis que le tissu conjonctif possède peu de cellules et beaucoup de matrice extracellulaire composée de fibres, de substance fondamentale et de cellules.

• Le tissu musculaire comprend:

  • le type squelettique, strié et volontaire
  • le type cardiaque, strié et involontaire
  • le type lisse, non strié et involontaire

• Le tissu nerveux comprend des neurones et des cellules gliales, ces dernières étant les plus abondantes et formant notamment la myéline.

Compléments

• Les trois types de tissu musculaire convertissent une énergie chimique en énergie mécanique.

• Les cellules de Schwann appartiennent au système nerveux périphérique, tandis que les oligodendrocytes appartiennent au système nerveux central.

• Les épithéliums peuvent dériver de:

  • l’ectoderme
  • le mésoderme
  • l’endoderme

💡 Astuce mémo

Surface, matrice, mouvement, communication : les quatre fonctions tissulaires

📖 10. Structure, fonction et intérêt médical

★ À maîtriser

📌 L’histologie est nécessaire en anatomopathologie, car connaître l’aspect normal des tissus permet de reconnaître les anomalies.

• La faible épaisseur de la barrière alvéolo-capillaire facilite le passage de l’oxygène et du dioxyde de carbone entre l’air et le sang.

• Les microvillosités apicales des entérocytes forment une bordure en brosse qui augmente la surface d’échange et favorise l’absorption des nutriments.

Compléments

• Dans l’œsophage de Barrett, un épithélium malpighien est remplacé par un épithélium cylindrique muco-sécrétant pouvant évoluer vers un adénocarcinome.

💡 Astuce mémo

Structure adaptée → fonction tissulaire → diagnostic anatomopathologique

📊 Tableaux de synthèse

Comparaison des quatre tissus fondamentaux

Techniques de microscopie