Fiche de révision : Tissus conjonctifs et sanguins

📋 Plan du Cours

1. Préparation et conservation des tissus
2. Colorations et immunohistochimie
3. Microscopies optique et électronique
4. Organisation et classification épithéliales
5. Jonctions et spécialisations épithéliales
6. Glandes et modes de sécrétion
7. Modes d’extrusion glandulaire
8. Organisation des glandes
9. Collagène et collagénèse
10. Matrice extracellulaire
11. Cellules et tissus conjonctifs
12. Hématopoïèse et cellules sanguines
13. Diapédèse et migration leucocytaire
14. Granulocytes et monocytes
15. Lymphocytes et plaquettes
16. Cellules et croissance du cartilage
17. Matrice et types de cartilage

📖 1. Préparation et conservation des tissus

★ À maîtriser

• La congélation directe d’un tissu permet des analyses biochimiques de l’ARN, de l’ADN et des protéines, mais elle fait perdre la morphologie du tissu.

• La fixation doit être réalisée immédiatement après le prélèvement afin de conserver les structures du tissu, notamment avec du formol ou du liquide de Bouin.

• La durée de fixation varie selon le volume du prélèvement : plus le prélèvement est volumineux, plus la fixation doit être longue pour permettre la pénétration et la diffusion du fixateur.

• 🔄 La préparation peut suivre plusieurs étapes:

  1. fixation chimique au glutaraldéhyde
  2. post-fixation au tétraoxyde d’osmium
  3. inclusion dans une résine époxy
  4. coupes à l’ultramicrotome

📌 L’inclusion en cryoprotecteur ou OCT durcit l’échantillon à -20 degrés Celsius tout en conservant les ultrastructures cellulaires pour l’immunohistochimie et l’hybridation in situ.

• Le cryostat réalise des coupes observables en microscopie optique d’une épaisseur de 4 à 30 μm.

Compléments

• Le liquide de Bouin contient:
  • formol
  • acide acétique
  • acide picrique
  • eau

💡 Astuce mémo

Fixer → inclure → couper → observer

📖 2. Colorations et immunohistochimie

🔑 Notions clés & Définitions

• Immunohistochimie : Repérage des antigènes d’intérêt à l’aide d’anticorps spécifiques.

★ À maîtriser

• La coloration à l’hématéine-éosine-safran colore:
  • les noyaux en violet
  • le cytoplasme en rose
  • les fibres de collagène en orange

📌 L’immunohistochimie directe utilise un anticorps couplé à un traceur, tandis que l’immunohistochimie indirecte utilise au moins deux anticorps ou un complexe et amplifie les signaux faibles.

Compléments

• Le bleu de trypan permet de repérer les cellules mortes.

• L’Immunogold est une technique d’immunohistochimie directe lisible en microscopie électronique à transmission, car ses particules d’or mesurent entre 1 et 20 nm.

💡 Astuce mémo

Antigène repéré par anticorps, jamais l’inverse

📖 3. Microscopies optique et électronique

📝 Points essentiels

• La microscopie optique permet généralement d’observer des éléments dont la taille est comprise entre 200 μm et 0,2 μm.

📌 Le contraste de phase permet d’étudier des cellules vivantes sans préparation ni coloration, tandis que le fond noir permet d’étudier des éléments transparents.

• La microscopie confocale permet notamment d’étudier les colocalisations cellulaires et est aussi appelée microscopie 3D.

📌 Le microscope électronique utilise un faisceau d’électrons et permet de visualiser la forme, l’aspect et l’ultrastructure des cellules.

📌 Le microscope électronique à transmission fournit une image en 2D et possède une résolution de 0,8 Å, tandis que le microscope électronique à balayage visualise en 3D la surface des objets avec une résolution de quelques nm.

💡 Astuce mémo

MET traverse, MEB balaie la surface

📖 4. Organisation et classification épithéliales

🔑 Notions clés & Définitions

• Lame basale : Mince feuillet de protéoglycanes sécrété par les cellules épithéliales.
• Polarité épithéliale : Organisation en trois régions : un pôle basal, un pôle apical et des régions latérales.

★ À maîtriser

📌 Les épithéliums simples sont généralement impliqués dans la sécrétion et l’absorption, tandis que les épithéliums stratifiés ont principalement un rôle de protection.

Compléments

• Dans un épithélium, les vésicules de sécrétion se trouvent au pôle apical tandis que le noyau se situe au pôle basal.

• Un épithélium à une couche est simple, un épithélium à deux couches est bistratifié et un épithélium à plus de deux couches est pluristratifié.

• Les épithéliums pseudo-stratifiés ont généralement des fonctions de sécrétion et d’absorption similaires à celles des épithéliums simples, mais leurs noyaux sont répartis à des hauteurs différentes.

💡 Astuce mémo

Simple absorbe et sécrète, stratifié protège

📖 5. Jonctions et spécialisations épithéliales

🔑 Notions clés & Définitions

• Jonction serrée : Barrière étanche entre les cellules épithéliales qui limite la migration des protéines membranaires.

★ À maîtriser

• Le complexe de jonction comprend de l’apex vers la base:

  • les jonctions serrées
  • les jonctions adhérentes
  • les desmosomes

• Les jonctions serrées utilisent les protéines transmembranaires claudine, occludine et JAM, reliées aux filaments d’actine par les protéines zonula occludens ZO1, ZO2 et ZO3.

📌 Les contacts focaux relient les filaments d’actine intracellulaires à la matrice extracellulaire, tandis que les jonctions adhérentes relient l’actine de cellules épithéliales adjacentes.

• Les connexons sont des canaux hydrophiles formés de six connexines et permettent le passage de molécules de taille inférieure à 1,5 kDa entre les cellules.

📌 Les microvillosités possèdent une armature de filaments d’actine stabilisés par la fimbrine, tandis que les stéréocils sont de très longues microvillosités immobiles et non des cils mobiles.

• L’axonème d’un cil contient neuf doublets périphériques et un doublet central de microtubules, tandis que le corpuscule basal contient neuf triplets périphériques.

Compléments

• Les replis basolatéraux augmentent la surface d’échange et sont riches en mitochondries pour fournir l’ATP nécessaire au transport actif des ions.

💡 Astuce mémo

Un complexe apical ferme, adhère puis ancre

📖 6. Glandes et modes de sécrétion

★ À maîtriser

• Les glandes exocrines libèrent leur produit vers l’extérieur ou dans une lumière, avec ou sans canal excréteur, tandis que les glandes endocrines déversent leurs hormones dans les capillaires sanguins sans canal excréteur.

• Les cellules muqueuses possèdent un noyau aplati refoulé au pôle basal et de volumineuses vésicules apicales de mucine, tandis que les cellules séreuses ont un noyau arrondi parabas basal et une lumière étroite.

• Les sécrétions des glandes séreuses sont aqueuses, tandis que celles des glandes muqueuses sont visqueuses.

• Le mode d’extrusion mérocrine libère le produit par exocytose apicale sans détruire la cellule, le mode apocrine détache le cytoplasme apical et le mode holocrine détruit progressivement la cellule.

Compléments

• Dans une glande mixte séro-muqueuse, un acinus muqueux central peut être bordé en périphérie par un croissant de cellules séreuses.

📌 Les cellules sécrétrices de stéroïdes possèdent un réticulum endoplasmique lisse développé, des vacuoles lipidiques et de nombreuses mitochondries, tandis que les cellules sécrétrices d’électrolytes possèdent également de nombreuses mitochondries et des replis membranaires.

• La glande sudoripare est un exemple de glande apocrine.

💡 Astuce mémo

Mérocrine exocyte, apocrine pince, holocrine détruit

📖 7. Modes d’extrusion glandulaire

🔑 Notions clés & Définitions

• Extrusion mérocrine : Libère le produit de sécrétion par exocytose au pôle apical sans dégrader la membrane plasmique.
• Extrusion apocrine : Consiste en l’étranglement ou la constriction du cytoplasme apical contenant le produit de sécrétion.
• Extrusion holocrine : Consiste en la dégénérescence progressive de la cellule, qui mène à sa destruction.

💡 Astuce mémo

Mérocrine conserve la membrane, holocrine détruit la cellule, apocrine étrangle le pôle apical.

📖 8. Organisation des glandes

★ À maîtriser

• Une glande comporte un adénomère, qui est sa portion sécrétoire, et un canal excréteur, qui est sa portion non sécrétoire.

• Un acinus sphérique à petite lumière est dit acinaire, tandis qu’une structure en forme de sac à grande lumière est dite alvéolaire et qu’une structure en forme de doigt de gant est dite tubulaire.

• Une glande est dite composée lorsque son canal excréteur est ramifié. — Dr. Mouton Liger, Tissu épithélial partie 2

Compléments

📌 Les glandes composées sont unilobulées ou multilobulées ; les glandes multilobulées se terminent par un canal collecteur recevant plusieurs canaux excréteurs, tandis que les glandes unilobulées se terminent par un canal excréteur unique.

• Les glandes composées présentent des lobules distincts séparés par des travées de tissu conjonctif et constituent une sous-catégorie des glandes exocrines.

💡 Astuce mémo

Adénomère sécrète, canal excréteur conduit.

📖 9. Collagène et collagénèse

★ À maîtriser

• Le collagène de type I est le collagène le plus abondant du corps et se trouve notamment dans la peau, les os et les tendons.

📌 Les fibrilles de collagène présentent une striation périodique régulière et s’assemblent pour former des fibres de collagène.

• La collagénèse comprend une phase intracellulaire suivie d’une phase extracellulaire.

• 🔄 La formation d’une fibre de collagène suit cinq étapes:

  1. Formation du procollagène dans le fibroblaste
  2. Sortie du procollagène hors du fibroblaste
  3. Clivage de ses extrémités alpha pour former le tropocollagène
  4. Assemblage des tropocollagènes en fibrilles
  5. Assemblage des fibrilles en fibres

Compléments

• Le collagène de type X est localisé dans le cartilage hypertrophié et minéralisé.

• Il existe 28 types de collagènes différents.

💡 Astuce mémo

Procollagène intracellulaire → tropocollagène extracellulaire → fibrilles → fibres.

📖 10. Matrice extracellulaire

🔑 Notions clés & Définitions

• Glycosaminoglycanes : Chaînes composées de 70 à 200 unités disaccharidiques répétées qui retiennent beaucoup d’eau grâce à leur charge négative.

★ À maîtriser

• Les fibres élastiques associent l’élastine aux microfibrilles de fibrilline et sont les premières fibres affectées par le vieillissement.

• Les glycosaminoglycanes sulfatés se fixent par des liaisons covalentes à une protéine centrale pour former un protéoglycane, tandis que l’acide hyaluronique est non sulfaté.

📌 Les protéoglycanes s’associent à l’acide hyaluronique par l’intermédiaire d’une protéine de liaison pour former des agrégats dont la masse moléculaire est supérieure à 100 millions de daltons.

Compléments

• L’orcéine met en évidence les fibres élastiques et les colore en noir en coupe histologique.

📌 Les fibres de réticuline sont abondantes dans la lame réticulaire sous les épithéliums, et non dans la lame basale.

• Une molécule d’acide hyaluronique peut comporter jusqu’à 5000 disaccharides et former une chaîne de 2,5 μm de longueur.

💡 Astuce mémo

L’acide hyaluronique forme un tronc, les protéines de liaison des branches et les protéoglycanes des feuilles.

📖 11. Cellules et tissus conjonctifs

★ À maîtriser

• Les tissus conjonctifs sont les tissus les plus abondants de l’organisme, sont vascularisés et innervés, et dérivent du mésoblaste intra-embryonnaire.

• Le tissu conjonctif participe à la défense immunitaire grâce notamment aux histiocytes, mastocytes, lymphocytes et granulocytes.

• Les fibroblastes sont présents dans tous les tissus conjonctifs et jouent un rôle central dans la phase de prolifération de la cicatrisation.

📌 Les adipocytes blancs sont uniloculaires et stockent principalement des triglycérides, tandis que les adipocytes bruns sont multiloculaires, riches en mitochondries et participent à la thermogenèse sans frisson.

📌 Les vacuoles des macrophages correspondent à des lysosomes, les phagolysosomes contiennent des débris cellulaires après phagocytose et les pseudopodes participent à la mobilité et à la phagocytose.

Compléments

• La phase vasculaire et inflammatoire de la cicatrisation cutanée est la plus courte et dure 2 à 4 jours.

• Les adipocytes de la graisse blanche sont les plus abondants chez l’adulte, tandis que les adipocytes multiloculaires sont principalement présents chez le nouveau-né.

📌 Le tissu conjonctif lâche aréolaire contient des fibres collagènes, élastiques et réticulées, tandis que le tissu conjonctif lâche réticulé se trouve notamment dans la moelle osseuse et les organes lymphoïdes.

• Le tissu mucoïde ou muqueux est un tissu conjonctif lâche très riche en substance fondamentale et en acide hyaluronique, mais pauvre en cellules et en fibres de collagène.

💡 Astuce mémo

Graisse blanche uniloculaire stocke, graisse brune multiloculaire chauffe.

📖 12. Hématopoïèse et cellules sanguines

★ À maîtriser

• 🔄 Les sites de l’hématopoïèse se succèdent ainsi:
  1. Splanchnopleure embryonnaire à partir de la troisième semaine
  2. Îlots de Wolff et Pander jusqu’à la huitième semaine
  3. Foie et rate chez le fœtus du deuxième au sixième mois
  4. Moelle osseuse des os courts et plats chez l’adulte

📌 Les cellules souches hématopoïétiques sont multipotentes et donnent une cellule souche myéloïde appelée CFU-GEMM ainsi qu’une cellule souche lymphoïde appelée CFU-L.

• Les érythrocytes peuvent traverser des capillaires dont le calibre est inférieur à leur diamètre grâce à leur grande déformabilité.

• La spectrine est un composant majeur du squelette membranaire de l’érythrocyte et lui confère une grande déformabilité.

• L’érythrocyte mature est une cellule anucléée en forme de disque biconcave, d’un diamètre de 7,5 μm, d’un volume de 90 μm³ et d’une durée de vie de 120 jours.

📌 Les antigènes présents sur les érythrocytes déterminent les groupes sanguins, le groupe AB correspond aux receveurs universels et le groupe O aux donneurs universels.

📌 La globine constitue la partie protéique de l’hémoglobine et comporte quatre chaînes protéiques identiques deux à deux, tandis que l’hème constitue sa partie non protéique et contient un noyau porphyrique et un atome de fer ferreux.

• L’hémoglobine fœtale est constituée de deux chaînes alpha et de deux chaînes gamma.

• 🔄 La diapédèse comprend:

  1. Roulement initial permis par les sélectines
  2. Marginalisation par des liaisons fortes
  3. Passage du leucocyte entre les cellules endothéliales

Compléments

• Lors de la différenciation érythrocytaire, l’érythroblaste expulse son noyau pendant la troisième phase, et non pendant la deuxième phase d’accumulation d’hémoglobine.

• Lorsqu’une mère Rhésus négatif porte un premier fœtus Rhésus positif, le passage de sang fœtal déclenche la production d’anticorps anti-D qui peuvent attaquer les hématies d’un second fœtus Rhésus positif.

💡 Astuce mémo

Embryon → foie et rate fœtaux → moelle osseuse adulte.

📖 13. Diapédèse et migration leucocytaire

📝 Points essentiels

• 🔄 La diapédèse leucocytaire comprend les étapes suivantes:
  1. Attachement et roulement
  2. Marginalisation
  3. Passage des leucocytes entre les cellules endothéliales

📌 Les sélectines permettent le roulement initial par des liaisons faibles, tandis que les intégrines participent à la marginalisation par des liaisons fortes.

📌 La diapédèse permet aux leucocytes de traverser l’endothélium sans détruire les cellules, en ouvrant leurs jonctions serrées.

💡 Astuce mémo

Attachement-roulement, marginalisation, diapédèse

📖 14. Granulocytes et monocytes

★ À maîtriser

📌 Les neutrophiles luttent contre les bactéries et les virus, tandis que les éosinophiles et les basophiles participent à la lutte contre les parasites.

📌 Les éosinophiles possèdent des granulations spécifiques cristalloïdes, tandis que les neutrophiles possèdent des granulations spécifiques allongées.

• Les éosinophiles sont 100 fois plus présents dans les tissus que dans le sang.

• Les monocytes se différencient en histiocytes ou en cellules dendritiques lorsqu’ils passent dans les tissus, et non dans le sang.

• Les monocytes participent à la phagocytose grâce à leurs pseudopodes, tandis que leurs microvillosités participent à leur migration.

Compléments

• Les basophiles possèdent des noyaux trifoliés ou quadrifoliés.

📌 Les neutrophiles ont une durée de vie sanguine de 24 heures, tandis que les basophiles vivent 3 à 4 jours dans le sang.

💡 Astuce mémo

Neutrophiles : bactéries et virus ; éosinophiles et basophiles : parasites

📖 15. Lymphocytes et plaquettes

★ À maîtriser

• Les lymphocytes B, T et NK ne sont pas distinguables les uns des autres en histologie ou en cytologie standard.

• Les lymphocytes T matures naïfs sont produits par le thymus, tandis que les lymphocytes B matures naïfs proviennent de la moelle osseuse.

• Seuls les plasmocytes, et non les lymphocytes B mémoires, produisent des anticorps après activation des lymphocytes B.

• Les lymphocytes T Helper reconnaissent les antigènes présentés par le CMH de classe II avec le corécepteur CD4, tandis que les lymphocytes T cytotoxiques reconnaissent les antigènes présentés par le CMH de classe I avec CD8.

• Les plaquettes proviennent de la fragmentation du cytoplasme des mégacaryocytes et ne possèdent pas de noyau.

📌 Le thrombus blanc se forme lors de l’hémostase primaire, tandis que la coagulation et la transformation du fibrinogène en fibrine relèvent de l’hémostase secondaire.

• Le facteur de von Willebrand favorise l’adhésion des plaquettes au collagène sous-endothélial du tissu lésé.

Compléments

• Les lymphocytes NK sont activés par des cytokines telles que l’IFNγ et l’IL2 et peuvent tuer des cellules infectées ou tumorales grâce aux perforines.

💡 Astuce mémo

CMH II-CD4 pour les T Helper ; CMH I-CD8 pour les T cytotoxiques

📖 16. Cellules et croissance du cartilage

★ À maîtriser

📌 Les chondroblastes sont des cellules jeunes du périchondre fortement actives dans la synthèse de la matrice extracellulaire, tandis que les chondrocytes sont des cellules matures à activité de synthèse modérée.

• Les chondrocytes mesurent environ 20 à 40 μm, possèdent des inclusions lipidiques et résident dans des lacunes appelées chondroplastes.

• La croissance appositionnelle résulte de la différenciation des chondroblastes du périchondre en jeunes chondrocytes, tandis que la croissance interstitielle résulte de la division mitotique des chondrocytes dans leurs chondroplastes.

Compléments

• Un groupe isogénique coronaire permet la croissance du cartilage en épaisseur.

💡 Astuce mémo

Périchondre → chondroblastes → chondrocytes → croissance cartilagineuse

📖 17. Matrice et types de cartilage

🔑 Notions clés & Définitions

• Chondrone : Comprend un chondrocyte, son espace péri-cellulaire et des fibres de collagène disposées en panier, ce qui protège la cellule contre les forces de pression et de cisaillement.

★ À maîtriser

• La chondronectine permet l’ancrage des chondrocytes aux fibres de collagène de type II de la matrice extracellulaire.

• La substance fondamentale du cartilage est très riche en protéoglycanes, principalement en agrécane qui représente 90 % de ces protéoglycanes.

📌 Le cartilage contient principalement du collagène de type II, tandis que le cartilage fibreux contient principalement des faisceaux de collagène de type I.

• La matrice extracellulaire cartilagineuse est composée à 70 % d’eau et résiste à la compression ainsi qu’à la déformation.

📌 La matrice extracellulaire territoriale, proche des chondrocytes, est très basophile, riche en glycosaminoglycanes et pauvre en fibres, tandis que la matrice interterritoriale, éloignée des chondrocytes, est riche en fibres.

• Le cartilage de conjugaison permet la croissance en longueur des os longs chez l’enfant.

Compléments

• Le cartilage élastique est moins abondant que le cartilage hyalin et se trouve notamment dans la sphère ORL.

💡 Astuce mémo

MEC territoriale : proche et riche en GAG ; interterritoriale : éloignée et riche en fibres

📊 Tableaux de synthèse

Types de glandes et sécrétions

Modes d’extrusion glandulaire