À quoi sert le microscope photonique dans l’analyse des prélèvements tissulaires ?
À compléter un diagnostic chez le patient.
Qu’est-ce que la fluorescence ?
La propriété d’émettre de la lumière après avoir absorbé des photons de plus haute énergie.
Quelle est l’origine de la fluorescence primaire ou autofluorescence ?
Elle est émise par l’objet lui-même.
De quoi dépend la fluorescence secondaire ?
De l’association de l’objet à une substance fluorescente, comme le DAPI.
Comment le microscope confocal génère-t-il la fluorescence ?
À l’aide d’un laser.
Que permettent de reconstituer les signaux transmis par le pinhole du microscope confocal ?
Une image localisant précisément la fluorescence.
Quelles cellules le microscope inversé permet-il d’observer en culture ?
Des cellules vivantes non colorées.
Quelle source d’éclairage le microscope électronique utilise-t-il ?
Un faisceau d’électrons.
Quelle résolution le microscope électronique peut-il atteindre au mieux ?
0,04 nm.
Que visualise le MET lorsqu’il traverse l’échantillon ?
L’ombre du spécimen.
Que détecte le MEB pour montrer la surface et la forme du spécimen ?
Les électrons qui rebondissent sur celui-ci.
Que concernent les techniques cytologiques ?
Les cellules libres en suspension.
Quelles cellules sont concernées par les techniques cytologiques ?
Celles du sang, de la moelle osseuse, des frottis vaginaux et du liquide céphalo-rachidien.
Comment les cellules sont-elles prélevées lors d’une préparation cytologique ?
Par ponction.
Comment les cellules sont-elles étalées lors d’une préparation cytologique ?
Sur une lame.
Comment les cellules sont-elles séchées lors d’une préparation cytologique ?
À l’air libre.
Que préparent les techniques histologiques avant l’observation au microscope ?
Des coupes minces de tissus consistants.
Quelles sont les étapes de la préparation histologique ?
La fixation, l’imprégnation et l’inclusion, la confection des coupes et la coloration.
Quand la fixation histologique doit-elle commencer après le prélèvement ?
Immédiatement ou très rapidement après le prélèvement.
Comment l’eau intracellulaire est-elle remplacée avant l’inclusion histologique ?
Par déshydratation dans des bains d’alcool à titre croissant de 70°, 95° et 100°.
Quel est le rôle de l’inclusion dans la préparation histologique ?
Elle durcit les tissus fixés en remplaçant l’eau intracellulaire par une substance solide, généralement la paraffine.
Quelle épaisseur les coupes obtenues par microtomie mesurent-elles ?
De 3 à 5 μm.
Quel colorant basique nucléaire la coloration histologique usuelle emploie-t-elle ?
L’hématéine ou l’hématoxyline.
Quel colorant acide cytoplasmique la coloration histologique usuelle emploie-t-elle ?
L’éosine, l’érythrosine ou la phloxine.
Quelle épaisseur ont les coupes ultrafines destinées au MET ?
De 50 à 80 nm.
Avec quel instrument réalise-t-on les coupes ultrafines pour le MET ?
Avec un ultramicrotome muni d’un couteau en verre ou en diamant.
Quelles sont les deux étapes de fixation des échantillons préparés pour le MET ?
Une fixation au glutaraldéhyde, puis au tétroxyde d’osmium.
Comment prépare-t-on un échantillon pour le MEB avant le balayage électronique ?
On le fixe, le déshydrate et le recouvre d’une mince couche conductrice de métal vaporisée sous vide.
Quelles étapes constituent la mise en culture cellulaire ?
Le prélèvement d’un fragment tissulaire vivant, sa dissociation, le comptage des cellules, leur mise en culture et leur repiquage.
Quel pH convient aux conditions de culture cellulaire ?
Un pH de 7 à 7,4.
Quelle température convient aux conditions de culture cellulaire ?
.
Quelle est la première étape de la fécondation in vitro décrite ?
Féconder l’ovocyte par le spermatozoïde.
Que fait-on de l’embryon obtenu lors de la fécondation in vitro décrite ?
On le fragmente.
Comment et combien de temps incube-t-on le flacon dans la procédure décrite ?
Avec la suspension cellulaire dans un flacon, pendant 24 heures à 37 °C.
Quels éléments optiques en verre comprend le microscope photonique ?
Le condenseur, l’objectif et l’oculaire.
Quelle source lumineuse comprend le microscope photonique ?
Une lampe photonique.
Qu’ajoute le microscope à fluorescence au microscope photonique ?
Un faisceau ultraviolet permettant de détecter des colorants fluorescents.
Que se passe-t-il d’abord dans l’échantillon observé au microscope à fluorescence ?
Les molécules fluorescentes sont excitées par un faisceau lumineux.
Quelle forme d’image de surface le MEB produit-il ?
Une image en trois dimensions.
Comment le MEB transforme-t-il les électrons émis par l’échantillon ?
Il les convertit en image affichée sur un écran.
Quelles colorations cytologiques sont mentionnées ?
Le May-Grünwald-Giemsa, le Papanicolaou et le bleu de méthylène.
Quels colorants le MGG associe-t-il ?
Le bleu de méthylène, l’azur et l’éosine.
Quelle couleur le bleu de méthylène donne-t-il aux constituants acides ?
Bleue.
Quels sont les fixateurs chimiques cités en histologie ?
L’alcool éthylique, l’acide acétique, l’acide picrique, les mélanges de Bouin et de Carnoy.
Quelle étape est évitée lorsque l’échantillon est fixé par congélation ?
L’étape d’inclusion.
Avec quel instrument coupe-t-on les tissus congelés ?
Avec un cryostat.
Sur quel support les coupes histologiques sont-elles collées ?
Sur des lames de verre.
Quel produit remplace la paraffine lors du déparaffinage histologique ?
Le toluène.
Quels titres d’alcool servent à la réhydratation histologique ?
100°, 95° et 70°.
Sur quelle substance le safran se fixe-t-il en coloration histologique ?
Sur le collagène.
Quelles résines synthétiques servent à l’inclusion pour le MET ?
Des résines comme l’époxy ou l’araldite.
Quelle propriété des résines d’inclusion les rend transparentes aux électrons ?
Elles sont plus dures que la paraffine.
Avec quoi contraste-t-on les coupes destinées au MET ?
Avec des sels de métaux lourds, notamment l’osmium, le plomb et l’uranium.
Pourquoi les coupes destinées au MET sont-elles contrastées avec des métaux lourds ?
Parce que ces métaux sont denses aux électrons.
Quel rôle joue la trypsination dans la culture cellulaire ?
Elle dissocie les cellules à l’aide d’enzymes comme la trypsine ou la collagénase.
Quelle concentration cellulaire est indiquée pour l’addition au milieu de culture ?
cellules pour 10 ml.
Sous quelles formes physiques les milieux de culture peuvent-ils se présenter ?
Sous forme liquide ou solide, en gel.
Quels composants un milieu de culture peut-il contenir ?
De l’eau, des sels minéraux, des vitamines, des acides aminés ou protéines, du glucose, des antibiotiques, du sérum de veau fœtal et des facteurs de croissance.
Quels moyens assurent au maximum la stérilité des cultures cellulaires ?
Une hotte à flux laminaire et des lampes UV germicides.
Que transforment les objectifs spéciaux d’un microscope inversé à contraste de phase ?
Les différences de phase en différences d’amplitude.
Quels sont les trois ensembles de lentilles électromagnétiques du microscope électronique ?
Le condenseur, l’objectif et le projecteur.
Quels fixateurs physiques sont les plus utilisés en médecine ?
L’azote liquide à −196 °C et la neige carbonique à −78,5 °C.
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1. Pour observer une cellule au MET, quelle préparation de coupe convient ?
2. Après avoir prélevé un fragment tissulaire vivant, quelle démarche correspond à la mise en culture puis au repiquage des cellules ?
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