QCM : Méthodes d’étude de la cellule (21 questions)

Questions et réponses du QCM

1. Pour observer une cellule au MET, quelle préparation de coupe convient ?

Une coupe de 50 à 80 nm réalisée au microtome puis déposée sur une grille métallique
Une coupe de 5 à 8 µm réalisée au microtome puis déposée sur une lame de verre
Une coupe de 50 à 80 nm réalisée à l’ultramicrotome puis déposée sur une lame de verre
Une coupe de 50 à 80 nm réalisée à l’ultramicrotome puis déposée sur une grille métallique

Une coupe de 50 à 80 nm réalisée à l’ultramicrotome puis déposée sur une grille métallique

Explication

Pour le MET, les coupes ultrafines mesurent 50 à 80 nm, sont réalisées à l’ultramicrotome avec un couteau en verre ou en diamant, puis recueillies sur des grilles métalliques. Les coupes de plusieurs micromètres sont trop épaisses, et les lames de verre ne remplacent pas les grilles.

2. Après avoir prélevé un fragment tissulaire vivant, quelle démarche correspond à la mise en culture puis au repiquage des cellules ?

Dissocier par trypsination, mettre en milieu de culture, compter, puis repiquer au-dessus de la densité de confluence
Colorer le fragment, compter les cellules, puis les repiquer dans le même milieu à confluence
Compter le fragment intact, le repiquer en milieu neuf, puis dissocier les cellules par trypsination
Dissocier par trypsination, compter, mettre en milieu de culture, puis repiquer en milieu neuf sous la densité de confluence

Dissocier par trypsination, compter, mettre en milieu de culture, puis repiquer en milieu neuf sous la densité de confluence

Explication

La procédure prévoit la dissociation du fragment vivant par trypsination, le comptage des cellules, leur mise en milieu, puis leur transfert dans un milieu neuf à une densité inférieure à celle de la confluence. Repiquer au-dessus de cette densité contredit la condition de repiquage, et le comptage intervient avant la mise en culture.

3. Une culture cellulaire doit être maintenue dans une étuve afin de préserver des conditions favorables et de stabiliser le pH ; quels réglages conviennent ?

pH de 7 à 7,4, température de 37 °C et atmosphère de 95 % d’oxygène avec 5 % de CO₂
pH de 7,5 à 8, température de 37 °C et atmosphère de 95 % d’air avec 5 % de CO₂
pH de 7 à 7,4, température de 37 °C et atmosphère de 95 % d’air avec 5 % d’azote
pH de 7 à 7,4, température de 37 °C et atmosphère de 95 % d’air avec 5 % de CO₂

pH de 7 à 7,4, température de 37 °C et atmosphère de 95 % d’air avec 5 % de CO₂

Explication

Les conditions indiquées sont un pH de 7 à 7,4, une température de 37 °C et une atmosphère de 95 % d’air et 5 % de CO₂, maintenue en étuve pour stabiliser le pH. L’oxygène pur ne remplace pas l’air, et les autres choix modifient le pH ou le gaz spécifié.

4. Un échantillon de foie doit être examiné au microscope afin d’en observer l’organisation tissulaire. Quel principe de préparation s’applique à ce tissu consistant ?

Le préparer en coupes minces avant l’observation microscopique
Le monter entier sur une lame avant l’observation microscopique
Le dissocier en cellules isolées avant l’observation microscopique
L’observer à l’œil nu avant de préparer une coupe épaisse

Le préparer en coupes minces avant l’observation microscopique

Explication

Les techniques histologiques préparent les tissus consistants, comme le foie, en coupes minces adaptées à l’observation microscopique. La dissociation concerne une préparation cellulaire, tandis que l’observation macroscopique ou d’un tissu entier ne correspond pas à ce principe.

5. Pour préparer un objet biologique à une observation au MEB, quelle suite d’étapes faut-il réaliser ?

Fixer et déshydrater l’objet, le métalliser sous vide, puis le balayer par un faisceau d’électrons
Fixer et déshydrater l’objet, le balayer par un faisceau d’électrons, puis le métalliser sous vide
Déshydrater l’objet, l’inclure en résine, puis le découper en coupes ultrafines
Fixer l’objet, le contraster avec des sels lourds, puis le balayer sans métallisation

Fixer et déshydrater l’objet, le métalliser sous vide, puis le balayer par un faisceau d’électrons

Explication

La préparation au MEB comprend la fixation et la déshydratation, suivies du dépôt sous vide d’une mince couche conductrice de métal, puis du balayage électronique. Le balayage avant la métallisation inverse les étapes, tandis que les coupes ultrafines et leur contraste concernent la préparation au MET.

6. Lors d’une coloration histologique usuelle, quel couple de colorants permet de distinguer les noyaux et le cytoplasme ?

Un colorant acide nucléaire et un colorant basique cytoplasmique
Deux colorants basiques, l’un nucléaire et l’autre cytoplasmique
Un colorant du collagène et un colorant basique cytoplasmique
Un colorant basique nucléaire et un colorant acide cytoplasmique

Un colorant basique nucléaire et un colorant acide cytoplasmique

Explication

La coloration usuelle associe un colorant basique, comme l’hématéine ou l’hématoxyline, pour les noyaux et un colorant acide, comme l’éosine, pour le cytoplasme. Inverser les affinités ou attribuer à l’éosine le rôle nucléaire confond ces fonctions; le safran, lui, peut se fixer sur le collagène.

7. Un laboratoire reçoit des cellules libres prélevées dans du liquide céphalo-rachidien. À quel domaine de techniques ce type de matériel correspond-il ?

Aux techniques histologiques
Aux techniques de microscopie électronique
Aux techniques cytologiques
Aux techniques de culture cellulaire

Aux techniques cytologiques

Explication

Les techniques cytologiques concernent les cellules libres en suspension, notamment celles du liquide céphalo-rachidien. Les techniques histologiques portent sur des tissus consistants, et la culture cellulaire ou la microscopie électronique désignent d’autres démarches.

8. Quelle propriété caractérise la fluorescence d’un corps qui absorbe des photons de haute énergie ?

Absorber de la lumière après avoir émis des photons de plus haute énergie
Émettre de la lumière après avoir absorbé des photons de plus haute énergie
Réfléchir des photons de plus haute énergie sans produire de lumière
Émettre des photons de plus haute énergie avant toute absorption

Émettre de la lumière après avoir absorbé des photons de plus haute énergie

Explication

La fluorescence correspond à l’émission de lumière après l’absorption de photons de plus haute énergie. L’absorption après émission inverse le processus, la réflexion n’est pas une émission fluorescente, et l’émission préalable omet l’absorption déclenchante.

9. Un prélèvement tissulaire vient d’être obtenu pour une analyse histologique. Quand faut-il commencer sa fixation pour préserver au mieux la morphologie cellulaire ?

Immédiatement ou très rapidement après le prélèvement
Après la confection des coupes, juste avant la coloration
Après la coloration, avant le montage sur lame
Après un délai de conservation, avant l’inclusion

Immédiatement ou très rapidement après le prélèvement

Explication

La fixation doit commencer immédiatement, ou très rapidement après le prélèvement, afin de conserver la morphologie cellulaire dans un état proche du vivant. La différer jusqu’à la coupe, à la coloration ou après une période de conservation compromet cet objectif.

10. Une équipe souhaite observer des cellules vivantes, non colorées, maintenues en culture. Quel microscope est adapté à cette observation ?

Un microscope électronique à transmission
Un microscope inversé
Un microscope à fluorescence
Un microscope photonique destiné aux prélèvements tissulaires

Un microscope inversé

Explication

Le microscope inversé permet d’observer des cellules vivantes non colorées en culture cellulaire. L’analyse de prélèvements tissulaires correspond au microscope photonique, la fluorescence suppose un signal fluorescent, et le microscope électronique relève d’une autre méthode d’observation.

11. Un médecin doit examiner un prélèvement tissulaire provenant d’un patient pour compléter son diagnostic. Quel instrument convient à cet examen ?

Un microscope confocal
Un microscope inversé
Un microscope photonique
Un microscope électronique

Un microscope photonique

Explication

Le microscope photonique permet d’analyser des prélèvements tissulaires chez un patient afin de compléter un diagnostic. Le microscope inversé sert à observer des cellules vivantes en culture, tandis que le confocal et le microscope électronique désignent d’autres dispositifs.

12. Quelles étapes constituent la préparation histologique d’un tissu destiné à être observé au microscope ?

Confection des coupes, fixation, inclusion, observation microscopique
Imprégnation, coloration, déshydratation, observation macroscopique
Fixation, imprégnation et inclusion, confection des coupes, coloration
Fixation, réhydratation, confection des coupes, déparaffinage

Fixation, imprégnation et inclusion, confection des coupes, coloration

Explication

La préparation comprend la fixation, l’imprégnation et l’inclusion, la confection des coupes puis la coloration. La réhydratation et le déparaffinage ne remplacent pas ces étapes, et la fixation intervient avant la coupe.

13. Un échantillon destiné au MET doit conserver ses lipides pendant la déshydratation ; quelle séquence de fixation faut-il appliquer ?

Tétroxyde d’osmium, puis glutaraldéhyde
Tétroxyde d’osmium, puis sels d’uranium
Glutaraldéhyde, puis tétroxyde d’osmium
Glutaraldéhyde, puis sels de plomb

Glutaraldéhyde, puis tétroxyde d’osmium

Explication

La double fixation au glutaraldéhyde puis au tétroxyde d’osmium aide à éviter l’extraction de composants tels que les lipides durant la déshydratation. Inverser l’ordre ou remplacer un fixateur par des sels de contraste ne correspond pas à cette séquence.

14. Lors d’une fécondation in vitro suivant le protocole décrit, quelle séquence doit être appliquée après la fécondation de l’ovocyte par le spermatozoïde ?

Fragmenter l’embryon, introduire une suspension de cellules embryonnaires avec une pipette stérile, puis incuber 24 heures à 37 °C
Fragmenter l’embryon, incuber 24 heures à 37 °C, puis introduire une suspension de cellules embryonnaires avec une pipette stérile
Introduire une suspension de cellules embryonnaires avec une pipette stérile, fragmenter l’embryon, puis incuber 24 heures à 37 °C
Introduire une suspension de cellules embryonnaires avec une pipette stérile, puis incuber 24 heures à 37 °C sans fragmenter l’embryon

Fragmenter l’embryon, introduire une suspension de cellules embryonnaires avec une pipette stérile, puis incuber 24 heures à 37 °C

Explication

Le protocole prévoit de fragmenter l’embryon obtenu, d’introduire la suspension cellulaire dans le flacon avec une pipette stérile, puis de l’incuber 24 heures à 37 °C. L’inversion place l’introduction avant la fragmentation, l’omission supprime cette étape, et l’incubation préalable retarde l’introduction des cellules.

15. Lors d’une observation, un objet émet lui-même une lumière fluorescente sans être associé à un colorant. De quel type de fluorescence s’agit-il ?

Contraste de phase, lié aux différences d’amplitude
Fluorescence confocale, issue d’un pinhole
Fluorescence primaire, ou autofluorescence
Fluorescence secondaire, liée à un colorant

Fluorescence primaire, ou autofluorescence

Explication

La fluorescence primaire, ou autofluorescence, est émise par l’objet lui-même; la fluorescence secondaire demande l’association à une substance fluorescente. Le pinhole caractérise le dispositif confocal, tandis que le contraste de phase relève d’un autre mode d’observation.

16. Après une ponction, une technicienne prépare un prélèvement cytologique sur lame. Quelle suite d’étapes respecte la préparation décrite ?

Séchage à l’air libre, étalement sur lame, puis coloration
Étalement sur lame, coloration, puis séchage à l’air libre
Étalement sur lame, séchage à l’air libre, puis coloration
Étalement sur lame, séchage à l’air libre, sans coloration

Étalement sur lame, séchage à l’air libre, puis coloration

Explication

Après le prélèvement par ponction, les cellules sont étalées sur une lame, séchées à l’air libre et colorées. Sécher avant l’étalement inverse l’ordre, et omettre la coloration laisse la préparation incomplète.

17. Un laboratoire veut localiser précisément la fluorescence dans un échantillon; le dispositif utilise un laser et transmet les signaux par un pinhole pour reconstituer l’image. Quel microscope répond à ce besoin ?

Un microscope inversé
Un microscope confocal
Un microscope à fluorescence standard
Un microscope électronique à transmission

Un microscope confocal

Explication

Le microscope confocal est un microscope à fluorescence amélioré : le laser génère la fluorescence et les signaux transmis par le pinhole servent à reconstituer une image à localisation précise. Le microscope standard ne se définit pas par ce dispositif, l’inversé sert à observer des cellules vivantes en culture, et le microscope électronique utilise un faisceau d’électrons.

18. Un laboratoire choisit un microscope électronique pour distinguer des détails très rapprochés d’un échantillon. Quelle résolution maximale peut-il atteindre ?

Jusqu’à 4 nm, voire 8 nm
Jusqu’à 0,8 nm, voire 0,4 nm
Jusqu’à 0,04 µm, voire 0,08 µm
Jusqu’à 0,08 nm, voire 0,04 nm

Jusqu’à 0,08 nm, voire 0,04 nm

Explication

Le microscope électronique utilise un faisceau d’électrons et peut atteindre une résolution de 0,08 nm, voire 0,04 nm. Les valeurs en nanomètres plus élevées surestiment la limite de résolution, tandis que les valeurs en micromètres changent l’échelle.

19. Un technicien règle un microtome pour obtenir des coupes que la lumière du microscope puisse traverser. Quelle épaisseur doit-il viser ?

De 5 à 10 mm
De 30 à 50 μm
De 3 à 5 μm
De 50 à 80 nm

De 3 à 5 μm

Explication

La microtomie produit des coupes de 3 à 5 μm, suffisamment fines pour être traversées par la lumière du microscope. Les épaisseurs de 50 à 80 nm correspondent aux coupes ultraminces, tandis que des coupes de plusieurs dizaines de micromètres seraient trop épaisses.

20. Après fixation, un tissu doit être durci pour faciliter la coupe et être inclus en paraffine. Quelle séquence convient à cette préparation ?

Déshydrater dans des alcools à titre croissant, puis remplacer l’eau par la paraffine
Colorer le tissu, puis remplacer l’eau par un bain de paraffine
Réhydrater dans des alcools à titre croissant, puis remplacer la paraffine par l’eau
Déshydrater dans des alcools à titre décroissant, puis remplacer l’eau par la paraffine

Déshydrater dans des alcools à titre croissant, puis remplacer l’eau par la paraffine

Explication

L’inclusion durcit le tissu fixé en remplaçant l’eau intracellulaire par une substance solide, généralement la paraffine; elle est précédée d’une déshydratation en alcools de titre croissant. Les titres décroissants servent à la réhydratation, et la coloration ne remplace pas cette préparation.

21. Pour étudier un échantillon, une chercheuse veut voir sa surface et sa forme plutôt que l’ombre produite par les électrons qui le traversent. Quel microscope convient à son objectif ?

Le MEB, qui détecte les électrons traversant l’échantillon
Le MET, qui détecte les électrons traversant l’échantillon
Le MET, qui détecte les électrons rebondissant sur l’échantillon
Le MEB, qui détecte les électrons rebondissant sur l’échantillon

Le MEB, qui détecte les électrons rebondissant sur l’échantillon

Explication

Le MEB détecte les électrons qui rebondissent sur l’échantillon et révèle sa surface et sa forme. L’observation des électrons transmis et de l’ombre du spécimen caractérise le MET; les deux autres réponses attribuent à tort le type d’électrons à l’un des microscopes.

Révisez avec les flashcards

Mémorisez les réponses avec 62 flashcards sur Méthodes d’étude de la cellule.

À quoi sert le microscope photonique dans l’analyse des prélèvements tissulaires ?

À compléter un diagnostic chez le patient.

Qu’est-ce que la fluorescence ?

La propriété d’émettre de la lumière après avoir absorbé des photons de plus haute énergie.

Quelle est l’origine de la fluorescence primaire ou autofluorescence ?

Elle est émise par l’objet lui-même.

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