L’ADNc X provient de l’ARN messager codant pour la protéine X humaine et possède des extrémités franches.
Le clonage consiste à intégrer un vecteur recombinant dans une bactérie afin que le vecteur se réplique et se multiplie avec les bactéries.
Deux stratégies de sous-clonage de la totalité de la séquence de l’ADNc X dans pGEM sont possibles : utiliser les sites HindIII et EcoRV, ou utiliser les sites HindIII et BamHI.
ADNc → vecteur → bactérie → amplification
1. Quelle est l’origine de l’ADNc X utilisé pour produire la protéine X humaine ?
2. Quel est le résultat recherché lorsqu’un vecteur recombinant est introduit dans une bactérie au cours d’un clonage ?
3. Quelles combinaisons de sites permettent d’envisager le sous-clonage de toute la séquence de l’ADNc X dans pGEM ?
De quoi provient l'ADNc X ?
De l'ARN messager codant pour la protéine X humaine.
Quelles extrémités possède l'ADNc X ?
Des extrémités franches.
En quoi consiste le clonage dans une bactérie ?
À intégrer un vecteur recombinant pour qu'il se réplique avec la bactérie.
Quelles sont les deux stratégies de sous-clonage de l'ADNc X dans pGEM ?
Utiliser les sites HindIII et EcoRV ou HindIII et BamHI.
Qu'est-ce qu'une enzyme de restriction ?
C'est une endonucléase qui coupe l'ADN en sites précis.
Qu'est-ce qu'un plasmide bactérien ?
Une molécule d'ADN circulaire double brin capable de réplication autonome.
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